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哺乳动物胚胎性别鉴定试剂盒的研究被引量：2: 2006年; 依据牛、山羊、兔、猪等哺乳动物SRY基因高度同源性设计一对22 bp的SRY引物,按照3×2×3因子组合,建立了PCR扩增胚胎DNA最适条件。采用此最适条件扩增了15个羊-兔异种克隆胚胎DNA,结果表明PCR法可以用来鉴别哺乳动物胚胎的性别。采用设计的性别鉴定引物,按照最优PCR扩增胚胎DNA条件配制了PCR性别鉴定试剂盒。; 洪桂云陈宏权; 关键词：PCR 克隆胚胎性别鉴定试剂盒

波尔山羊及黄牛耳部成纤维细胞的体外培养被引量：18: 2002年; 为了获得丰富的核移植供核体细胞 ,通过活体采集波尔山羊及黄牛耳部皮肤 ,利用组织块和消化法开展原代培养 ,并进行传代培养和培养细胞的冷藏、冷冻保存实验。建立了简易的波尔山羊和黄牛成纤维细胞体外培养程序。; 张运海章孝荣刘亚金仁桃琚书存章美玲汪存利; 关键词：耳部成纤维细胞体外培养波尔山羊黄牛体细胞核移植技术

影响体细胞核移植效率的因素被引量：3: 2003年; 哺乳动物体细胞核移植 (克隆 )是近年来迅速发展起来的一项新技术 ,对濒危动物保护、优良种畜快速扩群以及核质关系的研究、药物试验等诸多领域都具有重大意义。但体细胞核移植是一项程序繁杂的工作 ,每一步操作所采用的试剂、材料和方案等都会影响到核移植效率 ,因而其影响因素十分众多。文章根据目前已有资料 ,论述了卵母细胞来源、卵母细胞与供体细胞的胞质容量、卵母细胞的去核方案、体细胞供体动物的年龄、供体细胞的组织来源与传代次数及供体细胞的冷藏、冷冻和所处的细胞周期阶段对核移植效率的影响。另外 ,对重组胚的融合 -激活方案、核移植方案及重构胚的培养方案对核移植效率的影响也作了简要论述。; 刘亚章孝荣; 关键词：体细胞核影响因素卵母细胞动物育种

连续核移植对异种山羊(Bore)克隆胚胎发育的影响被引量：3: 2006年; 目的探讨连续核移植与异种山羊克隆胚胎发育之间的关系。方法分别以波尔(Bore)山羊耳部成纤维细胞、山羊-兔异种克隆桑椹胚卵裂球为核供体,以兔卵母细胞为受体,进行连续核移植。结果共构建145枚异种原代重构卵、73枚继Ⅰ代及20枚继II代重构卵,经电融合后,获得重构胚数分别为90、58和14枚,融合率分别为62.1%、79.5%和70%;162枚重构胚在同等条件下进行体外共培养,卵裂率分别为72.2%、75.9%和28.6%,囊胚率分别为10%、13.8%和0%;融合率方面,原代、继I及继II重构卵之间无显著差异(P>0.05);早期发育率无显著差异,但继Ⅰ代重构胚高于原代重构胚,相反,继II代远低于前两者,差异极显著(P<0.01)。结论波尔山羊体细胞核经第1次核移植过程中异种受体卵胞质作用后,比高度分化的体细胞更有利于重构胚的发育,但异种山羊克隆胚卵裂球反复多次暴露在异种卵胞质中,可能不利于细胞核的发育。; 章志国章孝荣刘亚金仁桃章美玲汪存立赵焕; 关键词：山羊异种克隆发育率

山羊(Bore)-兔异种克隆胚胎连续核移植的研究被引量：9: 2005年; 以山羊-兔异种克隆桑椹胚卵裂球为核供体,兔卵母细胞为受体进行连续核移植研究,最终连续 2 次,共获得继Ⅰ代重构胚 58 枚,继Ⅱ代重构胚 14 枚。融合率分别为 79.5%和 70%,差异不显著(P>0.05)卵裂率分别为 75.9%和 28.6%,差异显著(P<0.05)。但继Ⅱ代重构胚最终未能发育至囊胚,继Ⅰ代重构胚囊胚率达到 10.2%。; 章志国章孝荣刘亚金仁桃章美玲汪存利赵焕; 关键词：山羊异种克隆囊胚率桑椹胚重构胚卵裂球

牛体外受精卵的二步法培养体系的研究被引量：1: 2007年; 以CR1aa为基础培养液,采用二步法对牛体外受精卵进行体外培养,完善牛体外受精卵的培养体系。实验一:对照组连续7 d均为CR1aa+50 mL/L FBS培养,处理组前3 d为CR1aa+3 mg/mLBSA培养,后4 d换为CR1aa+50 mL/L FBS。处理组的囊胚率显著高于对照组,但卵裂率和囊胚孵化率无显著差异。实验二:对照组连续7 d均为CR1aa+50 mL/L FBS培养,处理组前3 d为CR1aa培养,后4 d换为CR1aa+50 mL/L FBS。处理组的卵裂率显著高于对照组,但囊胚率和囊胚孵化率差异不显著。实验三:对照组连续7 d均为CR1aa+50 mL/L FBS+0.1mmol/L GSH培养,处理组前3 d为CR1aa+0.1 mmol/LGSH培养,后4 d换为CR1aa+50 mL/L FBS+0.1 mmol/L GSH。处理组的卵裂率显著高于对照组,囊胚率极显著高于对照组,但囊胚孵化率差异不显著。结果表明,GSH与二步法培养系统结合相对于传统的一步法培养系统更适于牛体外受精卵的体外培养。; 曹海清陶勇姚桂东章孝荣; 关键词：体外受精卵谷胱甘肽

牛-兔种间重组胚体外发育能力的研究被引量：12: 2004年; 以超排的青年母兔和经产母兔卵母细胞为受体细胞,以处于休眠期和非休眠期的黑毛和牛耳成纤维细胞为核供体,共获得180枚种间重组胚,采用M199+10%FBS和RD+10%FBS2种培养液进行体外培养,有112枚发育到2-细胞期(62.2%),26枚发育到桑椹胚期(14.4%),20枚发育到囊胚期(11.1%)。结果显示,供体细胞处于休眠期与否,对重组胚的卵裂率无显著影响(P<0.05),但以休眠期细胞为核供体的重组胚8-细胞～16-细胞胚的发育率及桑椹胚发育率显著高于非休眠期细胞的重组胚(P<0.05),二者在囊胚发育率上差异极显著(P<0.01);以M199为培养液的胚胎在卵裂率、桑椹胚发育率和囊胚发育率上与RD组无显著差异(P>0.05)。; 刘亚章孝荣陈大元张运海章志国金仁桃汪存利章美玲李东伟李斌赵焕程立子; 关键词：卵裂率囊胚发育率

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安徽省“十五”重大科技专项(01603006)