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国家自然科学基金(30471210)

作品数：3 被引量：20H指数：3
相关作者：孙淑静谢宝贵饶永斌郑域茹卢启泉更多>>
相关机构：福建农林大学更多>>
发文基金：国家自然科学基金福建省卫生教育联合攻关计划项目卫生部科技专项基金更多>>
相关领域：生物学农业科学医药卫生化学工程更多>>

文献类型

  • 3篇期刊文章
  • 1篇会议论文

领域

  • 3篇生物学
  • 1篇化学工程
  • 1篇医药卫生
  • 1篇农业科学

主题

  • 4篇基因
  • 3篇银耳
  • 2篇基因合成
  • 2篇基因转化
  • 1篇蛋白
  • 1篇蛋白基因
  • 1篇电穿孔
  • 1篇芽孢
  • 1篇胰岛
  • 1篇胰岛素
  • 1篇胰岛素基因
  • 1篇荧光
  • 1篇荧光蛋白
  • 1篇人乳铁蛋白
  • 1篇人乳铁蛋白基...
  • 1篇人胰岛素
  • 1篇人胰岛素基因
  • 1篇乳铁蛋白基因
  • 1篇绿色荧光
  • 1篇绿色荧光蛋白

机构

  • 4篇福建农林大学

作者

  • 4篇谢宝贵
  • 3篇饶永斌
  • 3篇孙淑静
  • 2篇郑域茹
  • 2篇卢启泉
  • 1篇朱坚
  • 1篇吴小平
  • 1篇陈东兴
  • 1篇胡方平
  • 1篇刘新锐
  • 1篇游凯

传媒

  • 1篇热带作物学报
  • 1篇中国农学通报
  • 1篇食用菌学报

年份

  • 1篇2010
  • 1篇2008
  • 1篇2007
  • 1篇2005
共 3 条 记 录，以下是 1-4
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排序方式：
绿色荧光蛋白基因银耳表达载体构建及表达被引量：6
2008年
以银耳芽孢为材料,由载体pEGFP、pCAMBIA1300经过HindIII和EcoRⅠ双酶切、连接、转化,重组质粒酶切验证,成功构建了由双孢蘑菇gpd启动子调控EGFP基因的银耳真核表达载体,命名pCB-BEGFP。采用电击转化法将携带EGFP基因的银耳表达载体pCB-BEGFP转化到银耳芽孢。提取4个转化子基因组DNA,用EGFP基因特异引物PCR扩增,电泳结果表明有与EGFP基因大小一致的特异带出现;荧光显微镜观察在再生培养基上的转化子可看到很强的绿光;其中一个转化子蛋白SDS-PAGE电泳,结果发现在大约27kD处有一明显的蛋白条带出现,与预期的蛋白分子量相近。以上结果证明EGFP基因转入银耳芽孢中,双孢蘑菇启动子可以调控外源基因的在银耳芽孢中正确表达。
孙淑静郑域茹谢宝贵游凯胡方平
关键词：银耳绿色荧光蛋白基因
人胰岛素基因的人工合成及转化银耳的研究被引量：16
2007年
用PCR法合成人胰岛素基因,克隆到pUC18载体上,经测序证实其碱基序列与人胰岛素基因的序列完全一致。本实验还构建了银耳表达载体,由限制性内切酶介导(Restriction enzy me-mediated DNA Integration,REMI)转化银耳芽孢。随机挑取21个抗性菌落,转管繁殖2代后检测其GUS活性,实验结果:18个菌株阳性,3个菌株阴性。从这21个菌株中选取10个菌株,提取染色体DNA,用人胰岛素基因、GUS基因和Tnos序列的特异引物进行PCR,结果表明,这10菌株都能扩增出相应长度的特异片段,证明了它们是人胰岛素基因转化子。
谢宝贵卢启泉饶永斌孙淑静郑金贵
关键词：人胰岛素基因合成基因转化银耳芽孢
蜜蜂抗菌肽基因的人工合成及银耳表达载体构建
按酵母菌密码子偏好设计蜜蜂抗菌肽基因碱基序列,PCR法合成的蜜蜂抗菌肽基因全长78个碱基对,增加了起始密码子和终止密码子。合成的蜜蜂抗菌肽基因克隆到pUC18载体上,经测序证实,其碱基序列与设计的序列完全一致。本实验还构...
吴小平卢启泉饶永斌谢宝贵
关键词：基因合成
文献传递
人乳铁蛋白基因转化银耳的研究被引量：4
2010年
利用电穿孔转化法,把携带人乳铁蛋白基因(hlf)的银耳表达载体pCB-hlf导入银耳芽孢菌株Tr21,用PCR鉴定该基因阳性转化子,检测转基因菌株的GUS活性,并用Southern杂交检测hlf的插入位点。结果表明:电穿孔转化法的转化率可达到9.25×106个/μg质粒DNA;抗性筛选的阳性转基因菌株中均能扩增出与预期大小相符的hlf、GUS和Tnos序列,且GUS基因在转基因菌株中均有表达。Southern杂交结果表明,不同转基因菌株hlf的插入位点不同,有些菌株插入了2个或更多的拷贝。RT-PCR结果表明,外源基因在银耳中能正常转录成RNA。
朱坚饶永斌谢宝贵刘新锐孙淑静郑域茹陈东兴
关键词：人乳铁蛋白基因银耳电穿孔
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