湖北省科技攻关计划(AA301C43)
- 作品数：5 被引量：24H指数：3
- 相关作者：易继林刘恩宇李兴睿周旭陈晚平更多>>
- 相关机构：华中科技大学江苏省寄生虫病防治研究所更多>>
- 发文基金：湖北省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 去唾液酸糖蛋白受体特异性单链抗体的优化表达及亲和常数的测定被引量：5
- 2006年
- 目的:表达及纯化抗去唾液酸糖蛋白受体(ASG-PR)的单链抗体的可溶性,并测定其亲和常数。方法:用噬菌体C1克隆感染E.coliHB2151,挑取单个菌落接种于2×TY培养基中,于37℃震荡培养过夜。将培养物作1∶100稀释并转种后,用终浓度为0.25、0.5、1.0mmol/L的IPTG,分别在37℃、25℃和20℃下诱导表达过夜。取其培养上清,用饱和硫酸铵沉淀后,以120g/LSDS-PAGE分析。另外,将饱和硫酸铵沉淀物用30mLPBS重新溶解、透析除盐后,用Ni2+螯合柱进行纯化,再以120g/LSDS-PAGE鉴定纯化scFvC1的纯度。用非竞争酶免疫法测定scFv的亲和常数。结果:用0.5mmol/LIPTG在25℃诱导过夜,表达的scFvC1的量较多,其相对分子质量(Mr)约为28000,以可溶性的形式存在于培养基中。通过Ni2+亲和柱纯化后scFvC1的纯度在95%以上,产量约为0.8mg/L。scFv的亲和常数为(2.31±0.36)×10-7mol/L。结论:以筛选的C1噬菌体感染E.coliHB2151后可表达低亲和力的可溶性scFv,对肝癌的基因治疗具有潜在的应用价值。
- 王炜煜易继林邓云华司进王从俊李翔曹利民
- 关键词：去唾液酸糖蛋白受体单链抗体
- 肝癌组织中PTEN蛋白及hTERT表达相关性研究被引量：3
- 2004年
- 目的 探讨肝癌组织及癌旁肝组织中 10号染色体上缺失与张力蛋白同源的磷酸酯酶 (PTEN)蛋白的表达与人端粒酶逆转录酶 (hTERT)的相关性。方法 采用免疫组织化学法检测 76例肝细胞癌 (HCC)及癌旁肝组织中PTEN蛋白和hTERT的表达。结果 ①HCC中PTEN蛋白的阳性率 (38 2 % )和阳性强度明显低于癌旁肝组织(96 1% ) (P <0 0 1) ,且阳性信号强度与HCC分化程度相关 (P <0 0 1) ,即HCC分化愈差 ,PTEN蛋白表达愈弱。②HCC中hTERT的阳性率 (89 5 % )和表达强度明显高于癌旁肝组织 (7 9% ) (P <0 0 1) ,且阳性信号强度与HCC分化程度有关 (P <0 0 1)。③相关性分析表明 ,HCC及癌旁肝组织中PTEN蛋白表达强度和hTERT呈明显负相关 (P <0 0 1)。结论 提示在HCC发生中 ,可能由于PTEN蛋白表达降低或缺失 ,不能有效地抑制由致癌因子异常激活的hTERT ,从而使肝细胞异常增殖和发生恶性转化。
- 刘恩宇王德楚易继林李兴睿周旭杨志芳陈晚平蒋进发
- 关键词：PTEN蛋白癌旁肝组织肝癌组织磷酸酯酶人端粒酶逆转录酶
- 抑癌基因PTEN与pAkt在肝细胞肝癌中表达及其意义被引量：3
- 2005年
- 目的研究肝细胞癌(HCC)中抑癌基因第10号染色体上缺失与张力蛋白同源的磷酸酯酶基因(PTEN)与磷酸化丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶B(pAkt)表达及其意义。方法采用免疫组化S-P法检测65例HCC及癌旁组织中PTEN与pAkt表达并分析两者与肝癌患者年龄、临床分期、病理类型及侵袭转移性之间关系。结果HCC中PTEN蛋白阳性率明显低于癌旁肝组织,且随HCC恶性程度、侵袭转移性升高而显著下降(P<0.05);pAkt在HCC中表达率明显高于癌旁肝组织,且其表达率随HCC恶性程度、侵袭转移性升高而增加(P<0.05);肝癌及癌旁组织中,PTEN与pAkt表达均呈负相关(P<0.01)。结论PTEN与pAkt表达与肝癌组织恶性程度相关,联合检测PTEN与pAkt在癌组织中表达情况,可作为肿瘤预后评估指标之一。
- 刘恩宇易继林宋炜李兴睿周旭陈晚平
- 关键词：抑癌基因肝细胞肝癌基因表达染色体
- 抑癌基因PTEN与MMP-9在肝癌组织中表达与侵袭关系研究
- 2005年
- 目的探讨抑癌基因PTEN与MMP-9在肝细胞性肝癌(HCC)中表达意义及两者与肝癌侵袭性的关系。方法采用免疫组化(SP法)检测67例HCC及癌旁组织中PTEN与MMP-9表达,并分析两者与肝癌临床病理特征、侵袭性的关系。结果HCC中PTEN表达强度明显弱于癌旁组织,而MMP-9阳性表达强度明显高于癌旁组织,且两者间呈负相关;肝癌组织分化程度、侵袭性与PTEN表达呈负相关,而与MMP-9表达呈正相关。结论PTEN、MMP-9的表达一定程度上反映HCC分化和侵袭性强弱;PTEN缺失可引起MMP-9表达增加,在HCC侵袭、转移中发挥作用。
- 刘恩宇易继林宋炜米登海李兴睿周旭陈晚平蒋进发
- 关键词：基质金属蛋白酶-9免疫组化
- 肝细胞癌组织中抑癌基因PTEN与pAkt的表达及其相关性研究被引量：13
- 2006年
- 目的:研究第10号染色体上缺失的抑癌基因与张力蛋白同源的磷酸酯酶基因(phosphataseandtensinhomlogdeletedonchromosometenprotein,PTEN)与磷酸化丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶B(phosphoserine/threonineproteinkinaseB,pAkt)在肝细胞癌(hepatocellularcarcinoma,HCC)中蛋白的表达、意义及两者相关性。方法:采用免疫组织化学法检测71例HCC及癌旁组织中PTEN和pAkt的表达。结果:1)HCC中PTEN蛋白阳性率(36.6%,26/71)明显低于癌旁肝组织(93.0%,66/71),P=0.000,且随HCC恶性程度升高而显著下降;2)pAkt在HCC中表达率(80.3%,57/71)明显高于癌旁肝组织(29.6%,21/71),P=0.000,且其表达率随HCC恶性程度升高而增加;3)HCC中PTEN与pAkt表达呈负相关,r=-0.307,P=0.009。结论:PTEN蛋白低表达不能有效抑制pAkt异常激活,从而对HCC发生、发展起重要作用。
- 刘恩宇易继林宋炜周旭李兴睿陈晚平
