中央高校基本科研业务费专项资金(XDJK2013A004)
- 作品数：5 被引量：27H指数：3
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- 蜡梅胚胎晚期丰富蛋白基因CpLEA的克隆及表达分析被引量：4
- 2014年
- 从蜡梅(Chimonanthus praecox)花cDNA文库中获得了1个胚胎晚期丰富蛋白(LEA)基因的cDNA全长序列,命名为CpLEA(GenBank登录号:JF412788),该基因cDNA含有一个273 bp编码91个氨基酸的开放阅读框,从蜡梅基因组DNA中扩增该基因发现,该基因含有两个大小分别为35 bp和707 bp的内含子。生物信息学分析显示,CpLEA的编码蛋白含有4个胚胎晚期丰富蛋白第3族LEA蛋白特有的11个氨基酸的基元重复序列,进化树分析表明该编码蛋白与榛子的LEA蛋白亲缘关系最近。通过原核表达获得了与预期大小一致的融合蛋白。实时荧光定量PCR分析表明,该基因在蜡梅成熟种子中表达量最高,在根中几乎不表达;在盛开期花的各个部位中又以雌蕊中的表达量最高;在花发育早期表达量较高,随后下降并保持相对稳定,在衰败期突增并达到最高;检测该基因在脱落酸(ABA 50μmol·L-1)、低温(4℃)、高温(42℃)、干旱(30%PEG6000)和高盐(NaCl 1 mol·L-1)5种外源非生物胁迫因子作用下的表达特性。结果表明,该基因能够被ABA、低温、高温、PEG和NaCl诱导表达,并在随后的时间内呈现出不同的表达模式。表明CpLEA可能在蜡梅花发育和多种非生物胁迫响应中发挥作用。
- 马婧孙文婷王晶眭顺照李名扬
- 关键词：蜡梅原核表达基因表达分析
- 不同脱落力下蜡梅花梗CpEXP1基因的表达与扩张蛋白活性被引量：2
- 2013年
- 为了研究不同脱落力下蜡梅花梗中CpEXP1基因的表达水平以及扩张蛋白活性,采用real-time PCR技术检测不同脱落力下蜡梅花梗组织CpEXP1基因的表达水平;同时采用蛋白质体外重组法以及培养基添加法对花梗组织扩张蛋白活性进行测定。结果表明:CpEXP1基因的表达与扩张蛋白活性变化趋势相同,并在蜡梅花蕾脱落过程中具有阶段特异性。CpEXP1基因在自然脱落组的表达量显著高于其他组(P<0.05)。此时扩张蛋白活性也最强。扩张蛋白对麻点百合愈伤组织的分化无明显影响,对增殖以及生根有明显促进作用。
- 李政马婧眭顺照李名扬
- 关键词：蜡梅扩张蛋白
- 蜡梅快速碱化因子基因CpRALF的克隆及表达分析被引量：1
- 2012年
- 通过随机克隆测序的方法从蜡梅花cDNA文库中获得快速碱化因子基因,命名为CpRALF(GenBank登录号为:JQ217379)。扩增获得的DNA序列与cDNA序列一致,表明该基因不具有内含子,包含一个384bp的最大开放阅读框,编码一个长127个氨基酸的蛋白质。蛋白质序列同源比对发现其含有快速碱化因子特有的YIXY、YXRGC和4个保守的半胱氨酸以及双精氨酸结构。实时荧光定量PCR分析表明该基因在蜡梅茎、根和盛开的全花中表达量较高;在花发育过程中,蕾期和衰败期表达丰度高。在对蜡梅幼苗进行高温、低温、高盐、重金属4种非生物胁迫处理后,通过实时荧光定量PCR对CpRALF在幼叶中的表达量进行分析,结果表明高温、高盐和重金属能够促进该基因表达,而低温则抑制该基因的表达,且CpRALF对高盐与重金属胁迫的响应比对高温和低温胁迫的响应更为显著和迅速,表明该基因可能在蜡梅花发育以及非生物胁迫反应响应方面发挥作用。
- 王斌杨汶源孙晶晶马婧李名扬眭顺照
- 关键词：蜡梅基因克隆
- 蜡梅异戊烯基焦磷酸异构酶基因CpIPI的克隆及表达分析被引量：5
- 2016年
- 从蜡梅花cDNA文库中克隆得到1个蜡梅异戊烯基焦磷酸异构酶基因,命名为CpIPI.CpIPI基因的cDNA全长为1 297bp,其中最大ORF框长为879bp,编码292个氨基酸残基.CpIPI蛋白质的相对分子量为33.4kDa,理论等电点为6.86.生物信息学分析表明,蜡梅CpIPI蛋白属于典型的IPI蛋白,CpIPI基因是调控蜡梅萜类物质合成的关键基因.荧光定量分析结果表明,CpIPI基因在蜡梅的根中不表达,但是在茎、叶和花中都有表达,且在外瓣中的表达量最高.CpIPI基因在蜡梅不同花期的表达量具有不规律差异性.由此推测,蜡梅CpIPI基因可能参与与花器官形成发育相关的萜类物质的合成.
- 李瑞张杰马婧李名扬
- 关键词：蜡梅基因克隆
- 乙烯对蜡梅切花开放衰老及乙烯受体基因表达的影响被引量：15
- 2015年
- 为探索乙烯是否参与蜡梅花朵开放衰老进程的调控,利用气相色谱法测定分析不同发育阶段花朵的乙烯释放情况,同时分析乙烯、1-甲基环丙烯(1-MCP)处理对切花开放衰老进程和乙烯受体基因表达的影响。结果表明:蜡梅花朵开放衰老过程中有微量乙烯的产生,在盛开期出现峰值;外源乙烯显著加快了花朵开放衰老进程,缩短切花瓶插寿命1.9 d,而1-MCP处理则延长瓶插寿命2.4 d;存在受乙烯和1-MCP影响其在蜡梅花朵中表达的乙烯受体基因成员CpETR-1、CpETR-2、CpETR-3,且3个基因的转录水平变化与开放衰老进程关联较为紧密。说明蜡梅乙烯释放量虽然很低,但乙烯参与了蜡梅花朵开放和衰老的调控,影响其进程和相关乙烯受体基因的表达。
- 罗江会马婧刘道凤杨建峰门维婷万超眭顺照李名扬
- 关键词：蜡梅切花乙烯1-MCP乙烯受体基因
