国家自然科学基金(30671165)
- 作品数：4 被引量：3H指数：1
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- 甘蓝型油菜FAD2基因调控序列的克隆及瞬时表达分析被引量：1
- 2009年
- 油酸去饱和酶FAD2(fatty acid desaturase2)是广泛存在于植物中的一种能催化油酸脱氢生成亚油酸的还原酶。根据GenBank上已知的甘蓝型油菜FAD2基因设计引物,以甘蓝型油菜(Brassica napusL.)叶片总DNA为模板,进行TAIL-PCR扩增,获得约1.4kb片段并测序。序列比对结果说明该片段为已知的FAD2基因编码区上游序列。将该片段进行不同长度的5′端缺失,并用缺失后的序列替换pBI221-LUC质粒上的CaMV35S启动子,构建了甘蓝型油菜瞬时表达载体,进行油菜原生质体瞬时表达的初步研究,结果表明该序列5′端-669bp至-1019bp对报告基因表达水平有较大的影响。结合启动子预测分析结果,此片段中可能存在的赤霉素应答元件、光调控元件等顺式作用元件对FAD2基因的表达调控具有重要作用。
- 王茂华刘绵学李德款杨毅李旭锋
- 关键词：甘蓝型油菜
- 对细菌中2-氧化戊二酸依赖型加氧酶系存在性的分析
- 2010年
- 2-酮戊二酸,铁离子和维生素C是氧化戊二酸依赖型加氧酶辅助因子.有的细菌缺少维生素C,因此可能不含维生素C独立体酶,为了确定细菌中是否含有这种酶系,本文首先利用生物学软件ClustalX,PHYLIP,MEME/MAST和HMMER在植物和动物体内验证这个酶系的系统发育关系和保守序列,然后利用那些保守序列可以用来检测细菌是否含有这种酶.分析表明细菌中确实含有2-氧化戊二酸依赖型加氧酶酶系.
- 刘守寒唐天元刘忠于杨毅
- 关键词：进化树保守序列细菌
- 一个与ABA信号通路相关未知基因AB的亚细胞定位研究
- 2010年
- 本研究通过构建一个与脱落酸(ABA)信号传导途径相关的未知基因AB和绿色荧光蛋白(GFP)编码基因的重组质粒,利用基因枪技术将该重组质粒成功转入洋葱表皮细胞,观察并确定了该基因编码蛋白细胞核和细胞质的亚细胞定位,为进一步研究该未知基因的生物学功能及其分子机制提供了思路.
- 张亮李燕杨笑瑒吴明杰蔡黎杨毅
- 关键词：绿色荧光蛋白基因枪转化亚细胞定位
- 诸葛菜植物防御素基因克隆与原核表达研究被引量：2
- 2009年
- 以从正在萌发的诸葛菜种子中提取总RNA反转录成的cDNA作为模板,进行PCR扩增,获得了160 bp的植物防御素cDNA片段。然后将该片段克隆到pMD18-T栽体。经测序后将片段酶切回收,再克隆到GTK原核表达载体中。经0.1 mmol/L IPTG诱导表达,获得了与理论值相符的32 kD的融合蛋白质条带。用GST单克隆抗体做第一抗体进行Western-Blot检测,获得阳性结果。这为诸葛菜植物防御素基因功能的研究提供了基础。
- 钱磊卢永波王洪斌刘施佳严碧云张亮李旭锋杨毅吴俊
- 关键词：诸葛菜植物防御素融合蛋白原核表达
