国家科技重大专项(2011ZX08006-001)
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
- 相关作者：王铁东逄大欣戴祯王侃侃欧阳红生更多>>
- 相关机构：军事医学科学院吉林大学河北科技师范学院更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家农业科技成果转化资金项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- FMDV P1基因DNA疫苗构建及免疫实验(英文)
- 2013年
- [目的]构建口蹄疫DNA疫苗。[方法]构建以PRV为载体的表达FMDV P1基因的质粒pIESZP1和pUTK3CP1,免疫小鼠并检测了免疫后小鼠的抗体水平。将构建的2个真核表达质粒分别转染Vero细胞,通过PCR、IFA、Western-blot等方法检测目的基因的转录和表达。将正确表达目的基因的DNA质粒肌肉接种3周龄的Balb/C小鼠,采用ELISA和SN方法检测了免疫小鼠体内的抗体水平。[结果]携带有FMDV衣壳蛋白P1基因的DNA质粒能引起小鼠产生特异性的体液免疫反应,两重组质粒诱导小鼠产生抗FMDV的抗体水平无差异。[结论]该研究为含有FMDV P1基因重组PRV以及重组病毒的动物免疫试验以评价基因工程疫苗的免疫效果奠定了基础。
- 史秋梅高桂生张艳英高光平张东林
- 关键词：FMDVP1基因DNA质粒
- 高效抗猪瘟病毒shRNA的筛选被引量：1
- 2014年
- 为降低RNAi技术的毒副作用,筛选高效抑制猪瘟病毒复制的shRNA序列,根据有关报道构建了荧光报告系统shRNA筛选平台。该平台以9种抑制效率分别为强、中、弱的shRNA筛选载体作为参照,结合荧光报告系统进一步量化shRNA的抑制效率。根据2种已知体外有效抑制猪瘟病毒复制的siRNA-N2、siRNA-NS5B,分别设计得到shRNA-N2、shRNA-NS5B表达载体,继而采用高效、高灵敏度的shRNA筛选平台对这2种shRNA进行了检测,结果显示单拷贝情况下,shRNA-N2抑制靶序列效率较强,shRNA-NS5B抑制效率弱。本试验通过新策略大大提高了shRNA干扰效率检测的灵敏度,为采用shRNA转基因克隆动物进行抗病育种的研究提供了保障。
- 戴祯王铁东王侃侃欧阳红生涂长春逄大欣
- 关键词：猪瘟病毒
