广东省人口和计划生育委员会科研项目(2009227)
- 作品数：1 被引量：0H指数：0
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- 相关机构：中山大学附属第一医院中山大学广东省人民医院更多>>
- 发文基金：广东省人口和计划生育委员会科研项目国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
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- 彗星分析法研究靶向SMPD1的siRNA对小鼠卵母细胞凋亡的保护作用
- 2009年
- 目的建立彗星分析小鼠卵母细胞凋亡的模型,研究靶向酸性鞘磷酯酶1(SMPD1)的siRNA对卵子自发性凋亡的保护作用,为建立新的生殖保护方法奠定基础。方法通过同源性分析并结合siRNA设计软件设计并化学合成靶向SMPD1的3条siRNA,用超排卵技术对雌性BALB/c小鼠进行超排卵并杀鼠取卵,利用显微注射的方法将siRNA分别导入超排获得的小鼠卵子,分别于48h和72h观察卵子形态学变化,通过彗星分析检测卵细胞DNA破坏程度来分析卵子自发性凋亡情况。结果彗星分析法观察到小鼠卵母细胞在体外培养24h可见少量DNA泳出,48h可见大量DNA泳出;通过显微注射导入siRNA48h后的彗星分析结果显示,其中1对siRNA注射组,即siRNA003组的卵母细胞泳出量与其它2个siRNA注射组及对照组相比显著降低(P<0.01),其它2对siRNA注射组与对照组无明显差异。结论靶向SMPD1的siRNA能够有效保护卵子的自发性凋亡,有望成为新的生殖保护方法。
- 张仁礼孟锦绣闻安民黄跃深周灿权王凯贾磊刘彩霞邓新燕陈系古
- 关键词：卵母细胞RNA干扰彗星分析法
