安徽省自然科学基金(090413094)
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
- 相关作者：王海萍任振华李光武徐金勇王法财更多>>
- 相关机构：安徽医科大学更多>>
- 发文基金：安徽省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- GFP-ATZ在HEK 293T中的表达及其细胞毒作用被引量：1
- 2010年
- 目的构建具有绿色荧光蛋白(GFP)标签的α1抗胰蛋白酶Z突变型(ATZ)的真核表达载体,在人胚胎肾细胞(HEK293T)中验证表达情况及检测其对细胞的影响。方法以pcDNA3.1-zeo+-ATZ质粒为模版,设计引物,PCR扩增出ATZ的cDNA序列,插入真核表达载体pEGFP-C1中,构建带有GFP标签的ATZ真核表达载体pEGFP-C1-ATZ,脂质体转染体外培养的HEK293T细胞,Western blot、荧光显微镜和激光共聚焦显微镜检测GFP-ATZ在细胞中的表达、分布情况及其对细胞形态和分裂的影响。结果 ATZ片段成功插入pEGFP-C1表达质粒,在表达GFP的HEK293T细胞内,绿色荧光呈弥散的全细胞分布,而表达GFP-ATZ的细胞绿色荧光分布于细胞质内;Western blot结果显示特异性条带,分子量大小与GFP-ATZ预期相符;GFP-ATZ的过度表达引起细胞出现不同程度的形态改变、分裂障碍、聚集体出现甚至死亡。结论成功构建了具有绿色荧光标记的ATZ真核表达载体,GFP-ATZ的表达具有细胞毒性。
- 王海萍王法财沈玉先
- 关键词：转染
- 医学神经生物学教学素材收集体会被引量：2
- 2010年
- 神经科学自20世纪以来受到各国科学界的普遍重视,医学神经生物学是随着神经科学的发展而兴起的新兴学科,是一门高度综合的医学基础科学。国内很多医学高校为了顺应这一发展,也相继开始了医学神经生物学课程。本文根据笔者近几年的教学经验,介绍医学神经生物学教学素材的收集体会。
- 王海萍徐金勇任振华李光武
- 关键词：神经生物学素材
