深圳市科技计划项目(201103165)
- 作品数：2 被引量：0H指数：0
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- pIRES-IL-24-TRAIL基因载体的构建及其对肝癌细胞迁移和凋亡的影响
- 2014年
- 目的构建真核表达载体pIRES-IL-24-TRAIL,探讨其对肝癌细胞迁移和凋亡的影响。方法以人胎盘组织总RNA为模板,采用RT-PCR二步法,扩增TRAIL的cDNA序列,将其克隆入pIRES载体,扩增IL-24的cDNA序列,将其克隆入pIRES-TRAIL载体,构建其真核瞬时表达载体pIRES-IL-24-TRAIL,以Lipofectamine2000转染技术,将TRAIL、IL-24基因导入肝癌细胞Bel-7402和PLC,流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况,划痕实验比较不同组间细胞迁移情况。结果①克隆到TRAIL、IL-24基因的cDNA序列,成功构建其真核表达载体;②流式细胞仪发现,实验组比对照组凋亡率高(P<0.05);③细胞划痕实验显示实验组细胞迁移能力明显低于对照组(P<0.05)。结论 pIRES-IL-24-TRAIL构建成功,并能诱导肝癌细胞凋亡、降低其迁移能力。
- 魏杨辉黄耀刘娟张卫星吴爱国
- 关键词：凋亡
- IL-24-TRAIL基因载体的构建及其对乳腺癌干细胞迁移和凋亡的影响
- 2013年
- 目的构建真核表达载体pIRES-IL-24-TRAIL,探讨其对乳腺癌干细胞迁移和凋亡的影响。方法以人胎盘组织总RNA为模板,采用RT-PCR二步法,扩增TRAIL的cDNA序列,将其克隆入pIRES载体,扩增IL-24的cDNA序列,将其克隆入pIRES-TRAIL载体,构建重组真核表达载体pIRESIL-24-TRAIL,以Lipofectamine2000转染技术,将质粒pIRES-IL-24-TRAIL导入乳腺癌干细胞MCF-7和MDA-MB-231,流式细胞仪检测各组细胞凋亡情况,划痕实验比较不同组间细胞迁移情况。结果(1)克隆到TRAIL、IL-24基因的cDNA序列,成功构建其真核表达载体。(2)流式细胞仪发现,实验组比对照组细胞凋亡率高(P<0.05)。(3)细胞划痕实验显示实验组细胞迁移能力明显低于对照组(P<0.05)。结论 pIRES-IL-24-TRAIL构建成功,并能诱导乳腺癌干细胞凋亡、降低其迁移能力。
- 魏杨辉张宗明黄耀刘娟张卫星吴爱国
- 关键词：乳腺癌干细胞迁移凋亡
