广西省自然科学基金(0640004)
- 作品数：7 被引量：21H指数：3
- 相关作者：石德顺陆凤花成俊萍韦英明范闽光更多>>
- 相关机构：广西大学中国科学院过程工程研究所更多>>
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- 相关领域：农业科学生物学化学工程医药卫生更多>>
- 水牛体细胞核移植相关影响因素的研究
- 2008年
- 主要是探讨水牛卵母细胞的体外成熟与供体的年龄和性别对其核移植效果的影响。体外成熟培养22～24h的水牛卵母细胞，在含有5μg／mL细胞松弛素的操作液中进行去核，然后将经0．1μg／mL蚜栖菌素（Aphidicolin，APD）培养处理24h，再用0．5％胎牛血清（FBS）培养2d的水牛耳皮成纤维细胞注射到去核的卵母细胞卵周隙中，再经电融合形成重构胚。重构胚经5μmol／L离子霉素激活处理5min并在2mmol／L的二甲氨基嘌呤（6-DMAP）中培养3h后，在含有颗粒细胞单层细胞的微滴中（30μL）培养7d，观察其卵裂和胚胎发育情况。结果显示：在添加有10ng／mL上皮生长因子（EGF）成熟液中培养的受体水牛卵母细胞的融合率和重组胚卵裂率与对照组无显著差异（P〉0．05），但其囊胚发育率明显高于对照组（18．53％vs．7．56％，P〈0．05）。来自胎儿（3个月）或成年（一头5～6岁，另一头22岁）水牛的耳皮成纤维细胞核移植后重组胚的卵裂率差异不显著（P〉0．05），但水牛胎儿体细胞构建的重组胚囊胚率显著高于成年体细胞（22．55％vs．10．77％和8．09％，P〈0．05）。雌性水牛成纤维细胞构建的重组胚的囊胚发育率（20．23％）显著高于雄性水牛体细胞的囊胚率（10．16％，P〈0．05）。以上结果表明：（1）成熟液中添加EGF能提高受体卵母细胞核移植后的胚胎发育率；（2）水牛体细胞核移植效果受供体的个体年龄和性别的影响：胎儿成纤维细胞的核移植效果优于成年的成纤维细胞，而且以雌性的效果较好。
- 陆凤花石德顺韦英明潘红平黄凤玲谭世俭王晓丽黄雅琼
- 关键词：水牛核移植成纤维细胞卵母细胞胚胎
- 镧改性的CuHY分子筛中铜离子的分布及其对吸附脱硫性能的影响被引量：3
- 2009年
- 在氮气气氛下采用等体积浸渍法制备了载Cu的HY和LaHY分子筛.用X射线衍射(XRD)、N2吸附、氨程序升温脱附和X射线光电子能谱对分子筛进行了表征.通过多晶XRD确定了Cu2+离子在Y型分子筛笼内的结构与分布,并测定了分子筛在含二苯并噻吩(DBT)的模拟柴油中的吸附脱硫性能.结果表明,前驱体CuCl2中的大部分Cu物种与HY和LaHY分子筛进行了离子交换.对于La3+改性的CuHY分子筛(CuLaHY),进入分子筛超笼中的Cu2+离子与骨架氧和水分子配位,牢固地定位于Y型分子筛超笼的SII及SIII位;对于CuHY分子筛,超笼中的Cu2+离子只接近于SII及SIII位.极少部分CuCl分子高度分散在分子筛笼内,没有定位.处于超笼中SII及SIII位的Cu2+离子对模拟柴油中的DBT分子具有吸附作用,是吸附脱硫的活性中心.CuLaHY分子筛的吸附脱硫性能优于CuHY分子筛.当模拟柴油中含有萘时,萘与DBT分子会产生竞争吸附.
- 范闽光李斌张飞跃方金龙李望良邢建民刘自力
- 关键词：HY分子筛镧二苯并噻吩吸附脱硫
- 细胞松弛素B对水牛体细胞核移植效果的影响
- 2009年
- 以水牛耳皮成纤维细胞为供体细胞，采用电融合方法，探讨细胞松弛素B（CB）对水牛体细胞核移植效果的影响。体外成熟培养22～24h的水牛卵母细胞去核后，将经0．1mg／L Aphidicolin（APD）＋0．5％FBS培养2～9d的水牛耳皮成纤维细胞注射到卵周隙中再经电融合（100V／mm，15μs，电脉冲3次）构建核移植重构胚。重构胚经化学激活后（5μmol／L）离子霉素5min，2mmol／L 6-DMAP3h）培养，7～9d评定其胚胎发育能力。结果显示，在含CB（3mg／L）的融合液中进行电融合后，核移植的融合率、重组胚的存活率、卵裂率和囊胚率与对照组（不合CB）相比均无显著差异（P〉0．05）；核移植重组胚激活前用含CB（6mg／L）的培养液培养1h，其激活后的存活率（97．52％）和体外囊胚发育率（22．09％）均显著地高于未经CB处理的重组胚的存活率（93．87％）和囊胚率（13．25％，P〈0．05）；重组胚经离子霉素激活5min后，在6-DMAP＋CB中培养3h的分裂率明显低于放在6-DMAP中培养3h的分裂率（65．37％vs78．92％，P〈0．05），但囊胚发育率无显著差异（11．19％vs10．96％，P〉0．05）。这表明水牛体细胞核移植电融合时，融合液中不添加CB，而核移植重组胚激活前经CB培养处理后，有利于胚胎的进一步发育，但激活后用CB培养处理会降低胚胎的发育率。
- 陆凤花覃琦丽黄华罗婵成俊萍石德顺韦英明
- 关键词：水牛体细胞核移植电融合细胞松弛素B
- 金属改性P/HZSM-5分子筛催化乙醇芳构化被引量：8
- 2011年
- 以P/HZSM-5分子筛为基础,通过浸渍法制备了Cr、Co、Cu、Zn等金属改性的M-P/HZSM-5分子筛.采用X射线衍射(XRD),比表面积(BET)和氨气程序升温(NH3-TPD)等方法对其进行了表征,并考察了其催化乙醇芳构化的活性.结果表明,改性后的ZSM-5分子筛保持原有的骨架结构,但比表面积降低,酸性分布发生变化;Cu-P/HZSM-5分子筛有较高催化活性.P和Cu的负载量分别为3%和5%,先浸渍P再浸渍Cu,反应温度400°C,质量空速(WHSV)为1.0h-1时轻质芳烃(BTX)收率可达到57.6%.
- 张少龙李斌张飞跃马丽韩艳华范闽光
- 关键词：乙醇芳构化
- 供体细胞处理方法对水牛核移植效果的影响被引量：4
- 2006年
- 本研究探讨了水牛供体细胞不同培养处理方法对细胞周期及其核移植效果的影响。流式细胞仪分析供体细胞周期的结果显示,水牛胎儿耳皮成纤维细胞或颗粒细胞,在增长期、汇合长满期或经血清饥饿培养或0.1μg/mL蚜栖菌素(APD)+0.5%胎牛血清(FBS)培养处理后,G0+G1期细胞比率差异显著(P<0.05),其中以0.1μg/mL APD+0.5%FBS培养处理的G0+G1期细胞比率最高(87.89%和89.04%);而增长期的G 2+M期的细胞比率以及汇合长满期的S期细胞比率明显高于其他三组,但经血清饥饿处理后,DNA碎片明显高于其他三组(P<0.05)。当分别以0.1μg/mL APD+0.5%FBS培养处理后的水牛胎儿耳皮成纤维细胞或颗粒细胞作供核时,重组胚的卵裂率及囊胚发育率,均显著高于血清饥饿处理或汇合长满期的同种供体细胞(成纤维细胞:70.14%vs 58.29%和55.90%,21.33%vs 10.55%和8.72%;颗粒细胞:74.35%vs 60.51%和57.61%,22.17%vs10.26%和9.78%,P<0.05),但汇合长满期或血清饥饿处理的供体细胞构建的重组胚,其卵裂率和囊胚率均没有显著差异(P>0.05)。将经APD处理后的供体细胞构建核移植胚胎,移植给受体水牛后有1头受体水牛妊娠并成功的产下后代。以上结果表明:0.1μg/mL APD+0.5%FBS预培养处理供体细胞,能有效的抑制细胞停留在G0/G1期,并能提高其核移植胚胎的发育率,而且已成功的获得后代。但在本培养系统中,血清饥饿处理供核细胞是没有必要的。
- 陆凤花石德顺韦英明成俊萍韦精卫潘红平
- 关键词：水牛体细胞核移植细胞周期胚胎
- 不同病因对卵母细胞透明带、胚胎发育和妊娠结局的影响被引量：4
- 2011年
- 目的:探讨女性不同病因对卵母细胞透明带、胚胎发育和妊娠结局等的影响。方法:回顾性分析因单因素不孕体外受精治疗的197个周期,以输卵管因素为对照组(n=145),比较多囊卵巢综合征(polycystic ovarian syndrome,PCOS)(n=25)、子宫内膜异位症(endometriosis,EMs)(n=19)和不明原因不孕症(n=8)等各组的受精率、种植率、妊娠率以及透明带双折射性和透明带厚度。结果:平均获卵数PCOS组(17.9±1.9枚)显著高于其它各组(对照组:11.3±0.6枚,EMs组:9.4±1.2枚和不明原因组:13.1±2.9)(P<0.01),其它各组无统计学差异(P>0.05);PCOS组、EMs组和不明原因组受精率(83.66%、75.40%、77.12%)、优质胚胎率(57.26%、51.14%、59.30%)、种植率(25.53%、17.39%、29.40%)和妊娠率(52.38%、41.18%、42.86%)与对照组(80.13%、58.99%、28.76%、43.70%)间无统计学差异(P>0.05),但EMs组各项指标均低于对照组。透明带双折射值各组间差异极显著(对照组:7.13±0.28,PCOS组:4.97±0.55,EMs组:3.67±0.75,不明原因组:14.19±1.41)(P<0.01),其中EMs组透明带双折射值最低。受精当日透明带厚度EMs组显著高于其它各组(对照组:18.84±0.07,PCOS组:18.48±0.17,EMs组:19.75±0.24,不明原因组:18.98±0.26)。结论:EMs对受精率、妊娠率和透明带双折射值等的影响最明显,透明带的双折射值和厚度可在一定程度上反映不同病因对卵母细胞发育潜力的影响。
- 成俊萍何冰黄莉谭卫红薛林涛王世凯覃捷陆凤花石德顺
- 关键词：体外受精病因卵母细胞
- 哺乳动物克隆电融合技术的影响因素被引量：2
- 2007年
- 电融合技术是目前动物核移植的最佳融合方法。核移植的融合率直接影响着核移植的效率,是核移植技术的关键环节之一。本文将对哺乳动物细胞核移植中影响电融合效果的相关因素的研究作一综述,以便人们进一步了解电融合的影响因素,从而提高动物克隆的效率。
- 陆凤花舒金辉黎江罗婵覃绮丽黄华成俊萍韦精卫石德顺谭世俭
- 关键词：哺乳动物克隆卵母细胞电融合
