南京市医学科技发展项目(ZKX08017)
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
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- 相关机构：江苏省人民医院南京大学南京市口腔医院更多>>
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- 分泌性hrCEMP1在NIH3T3细胞中的表达
- 2011年
- 目的:通过转基因技术建立稳定表达hrCEMP1的成纤维细胞株。方法:利用高效率的阳离子聚合物,将含有hrCEMP1编码序列的真核表达质粒pcDNA3.1-hrCEMP1转染入NIH3T3细胞中,用G418筛选获得稳定转染细胞株,以RT-PCR检测hrCEMP1基因转录,以酶联免疫吸附试验(ELISA)检测hrCEMP1蛋白表达。结果:转染细胞株内有hrCEMP mRNA的转录,并可检测到hrCEMP1蛋白的表达。结论:通过转基因手段,可以将外源性hrCEMP1基因成功导入成纤维细胞内,为进一步研究hrCEMP1对成纤维细胞的诱导作用建立基础。
- 刘玉杨洁孙卫斌
- 关键词：基因转染
- 微小RNA与肿瘤耐药被引量：1
- 2010年
- 微小RNA（miRNA）对靶基因的异常调控可能参与肿瘤耐药机制，是肿瘤耐药性分子遗传学研究的重要进展及补充。研究表明，miRNA可能是肿瘤耐药网络性调控的重要组成部分，而且对多基因表达进行调控的能力使其具有高效性。因此，有望成为重要的肿瘤耐药相关分子标记物及治疗靶点。
- 杨劲松德伟陈锦飞
- 关键词：微RNAS基因表达调控肿瘤抗药性
- hrCEMP1真核表达载体的构建及其在成纤维细胞株中的表达被引量：1
- 2010年
- 目的:构建含hrCEMP-1基因真核表达质粒。方法:采用PCR方法扩增hrCEMP1基因,并在两端添加合适的酶切位点;利用定向克隆技术将hrCEMP1基因插入到载体pcDNA3.1中,重组的pcDNA3.1-CEMP1在大肠杆菌DH5α内扩增后,通过酶切电泳鉴定和DNA测序证明质粒构建成功;利用高效率的阳离子聚合物,将经过鉴定的pcDNA3.1-CEMP1转染入NIH3T3细胞中,并以RT-PCR检测hrCEMP1基因的转录。结果:通过对重组质粒pcDNA3.1-CEMP1进行酶切鉴定以及DNA序列测定分析,证明真核表达重组质粒pcDNA3.1-CEMP1构建成功,开放阅读框架正确;转染细胞株的RT-PCR结果中观察到特异性242bp片段。结论:成功构建含hrCEMP-1基因真核表达质粒pcDNA3.1-CEMP1,并可在NIH3T3细胞株中mRNA水平表达。
- 刘玉孙卫斌
- 关键词：真核表达载体
