江西省科技支撑计划项目(20121BBF60031)
- 作品数：4 被引量：17H指数：2
- 相关作者：张文波吴松松邓舜洲更多>>
- 相关机构：江西农业大学黔西南民族职业技术学院更多>>
- 发文基金：江西省科技支撑计划项目国家现代农业产业技术体系建设项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 一种新型仔猪先天性震颤及其病原的初步研究被引量：11
- 2017年
- 为了解国内猪群是否存在新型仔猪先天性震颤及其病原,本试验对临床疑似仔猪先天性震颤病例进行剖检,观察组织脏器的病理变化;根据GenBank上登录的瘟病毒基因组序列设计2对引物,以典型震颤仔猪的病料RNA为模板,进行RT-PCR,并对阳性产物进行测序;用DNAStar和Mega 7.0软件对所测序列进行分析,绘制系统进化树。结果表明,疑似仔猪先天性震颤病猪的组织脏器病理变化与猪瘟的病理变化相似,但无明显的脾脏梗死和淋巴结周边出血;从采集的病料中均扩增到与预期大小基本一致的条带;所测序列经BLAST比对,均为仔猪先天性震颤瘟病毒(APPV)的相应基因序列片段;系统进化树结果显示,哺乳动物瘟病毒可分为两大进化分支,APPV为单独一分支,其他瘟病毒为另一分支,两分支的同源性低于70%;所测的NS2-3和NS5B基因序列与GenBank上登录的APPV相应序列同源性在76.9%~98.8%之间,表明本研究所测定的序列是APPV的基因组序列;测定的7条NS2-3基因序列之间的同源性在89.7%~94.8%之间,12条NS5B基因序列的同源性在82.2%~100.0%之间。本试验首次证实国内猪群中存在新型仔猪先天性震颤病及其病原(APPV)。
- 张文波吴松松邓舜洲周荷田张志庆杨丹凤曹亮亮
- 关键词：仔猪先天性震颤瘟病毒
- 波尔山羊肠外致病性大肠杆菌的分离鉴定及药敏试验被引量：2
- 2022年
- 目的:确定某养羊场病死羊的病原和筛选有效的治疗药物。方法:通过常规的细菌分离方法,对病死羊进行细菌分离,并对分离菌进行培养特性、生化试验、特异性毒力基因的PCR检测、小白鼠致病性试验和药物敏感性试验。结果:从病死羊的心、肝、肺和脾脏中分离到7株细菌,均为革兰氏阴性短杆菌、发酵糖产酸产气、液化明胶,符合大肠杆菌的特征;分离菌均可在12h内致死试验小白鼠,具有强致病性;7株分离菌中均扩增到肠外致病性大肠杆菌的特异性毒力基因,序列测定与比对分析结果,分离菌的毒力基因序列与GenBank上登录的肠外致病性大肠杆菌相应序列的相似性在98~100%,可确定分离的大肠杆菌为肠外致病性大肠杆菌;分离的羊肠外致病性大肠杆菌的耐药性较强,仅对阿米卡星、壮观霉素和痢菌净较敏感,而对左氧氟沙星等10种药物低敏或不敏感。结论:分离菌为的羊肠外致病性大肠杆且耐药性较强。
- 唐云云韩瑞张文波杨行陈佳玲
- 关键词：波尔山羊PCR药敏试验
- 3株猪源大肠埃希氏菌耐药基因的初步定位被引量：3
- 2019年
- 本试验旨在对临床分离的猪源大肠埃希氏菌耐药基因进行初步定位。采用常规细菌分离培养、16S rRNA PCR扩增和序列测定方法从江西省3个规模化猪场送检的子宫脓液中分离鉴定病原菌,并通过质粒提取、转化大肠埃希氏菌DH5α感受态细胞及药敏试验对临床分离株的耐药基因进行初步定位。结果显示,分离鉴定到3株大肠埃希氏菌,其中JX-22分离株仅对氧氟沙星、大观霉素敏感,JX-26分离株仅对链霉素、氧氟沙星等4种药物敏感,JX-28分离株仅对氧氟沙星等3种药物敏感,均为多重耐药菌;3株大肠埃希氏菌均可纯化到分子质量大小不一的质粒。分离株、质粒转化菌及大肠埃希氏菌DH5α感受态细胞药敏试验对比结果显示,3株大肠埃希氏菌的耐链霉素、林可霉素、甲硝唑、氨苄西林、阿莫西林、大观霉素、丁胺卡那基因,JX-22和JX-26分离株的耐多西环素、氟苯尼考和复方新诺明基因,JX-22分离株的耐头孢曲松基因,JX-28分离株的耐头孢曲松、头孢噻肟、诺氟沙星基因均定位于细菌质粒上;JX-28分离株的耐多西环素、氟苯尼考和复方新诺明基因,JX-22分离株的耐诺氟沙星基因和JX-26分离株的耐头孢曲松、头孢噻肟基因均定位于其染色体上;3株分离株均无氧氟沙星耐药基因。本试验初步确定3株多重耐药猪源大肠埃希氏菌的大部分耐药基因定位于质粒上,为进一步研究猪源大肠埃希氏菌的耐药机理和有效控制措施奠定基础。
- 杨行殷贵虎张文波唐云云
- 关键词：大肠埃希氏菌多重耐药耐药基因药敏试验
- 仔猪先天性震颤瘟病毒RT-PCR检测方法的建立被引量：1
- 2019年
- 旨在建立检测仔猪先天性震颤瘟病毒(APPV)的逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法。根据GenBank上登录的APPV基因组序列,设计1对引物,以临床上表现典型震颤仔猪的淋巴结为材料,提取RNA,建立了RT-PCR方法,并进行敏感性、重复性和特异性试验,对其扩增产物测序比对分析;利用该方法,对临床病料进行检测。结果显示,从典型震颤仔猪的淋巴结中均扩增到与预期大小有一致的片段,经测序比对,扩增片段序列与APPV相应片段的核苷酸同源性在89%以上;该方法只能扩增出APPV片段,而其他几种常见猪病毒均为阴性,3次重复检测结果基本一致,可检测最低cDNA浓度为184.11ng/μL;对临床病料检测,典型病例的检出率达100%。试验结果表明,建立的RT-PCR方法具有良好的特异性、重复性、敏感性等优点,可用于临床APPV引起的仔猪先天性震颤早期检测、病毒鉴定和分子流行病学调查。
- 吴松松周荷田张文波邓舜洲张志庆杨丹凤
- 关键词：仔猪先天性震颤瘟病毒逆转录-聚合酶链反应
