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随机扩增多态性法分析西藏牦牛奶酪中乳酸菌的遗传多样性被引量：1: 2014年; 目的:利用随机扩增多态性(randomly amplified polymorphic DNA,RAPD)法对西藏地区牦牛奶酪中27株乳酸菌基因型进行同源性分析。方法:利用5个随机引物对Mg2+浓度、d NTP用量、退火温度、模版用量/引物用量(ng/pmol)4个条件做单因素梯度试验,建立最佳反应条件,筛选最佳引物,然后对27株乳酸菌和4株乳酸菌标准菌株进行随机扩增,用NTsys 2.10e软件对扩增条带进行聚类和遗传相似性系数分析,分析结果与16S r RNA测序得到的菌种鉴定结果进行对比。结果:31株菌遗传相似系数在0.72~1.00之间,当相似性系数在0.82时,菌株被分成了8组,菌株按照不同种属聚类,聚类结果同16S r RNA测序结果基本一致,同时成功将Lactobacillus casei和Lactobacillus paracasei两个亚种区分开。结论:RAPD技术可以较好地应用于西藏地区牦牛奶酪中乳酸菌亲缘性关系分析。; 蒋厚阳赵国华杨吉霞; 关键词：乳酸菌随机扩增多态性聚类分析

牦牛奶酪中产细菌素乳酸菌菌株的筛选被引量：6: 2015年; 本研究用分离自西藏、新疆、云南地区牦牛奶酪的39株乳酸菌作为供试菌株,制备细菌素粗提液,用琼脂井法分析粗提液对9株致病菌(蜡样芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、埃希氏大肠杆菌O157:H7、单增李斯特菌、费氏柠檬酸杆菌、鼠伤寒沙门氏菌、阴沟肠杆菌、产气荚膜梭菌、宋内志贺菌)和2株非致病菌(无害李斯特菌、嗜热链球菌)指示菌株的抑菌作用。测定结果表明有30株菌的细菌素粗提液对指示菌株有抑菌作用,筛选出Y13、X29和X30这3株抑菌谱较宽的细菌素产生菌。; 杨吉霞贺稚非陈宗道; 关键词：乳酸菌细菌素致病菌

牦牛奶酪中乳酸菌的随机扩增多态性研究被引量：1: 2013年; 目的:探讨随机扩增多态性(RAPD)技术在牦牛奶酪中乳酸菌基因型研究方面的应用价值。方法:采用M13引物,对退火温度、Mg2+浓度、引物用量、Taq酶用量、模板量进行单因素梯度试验,建立最佳反应条件,然后对分离自牦牛奶酪的39株乳酸菌进行扩增,用NTsys 2.10e软件分析扩增图谱,计算遗传相似系数,进行聚类分析,并与16S rRNA测序得到的菌种鉴定结果进行对比。结果:39株乳酸菌相互间的遗传相似系数在0.47～0.98之间,当相似系数为0.78时,菌株被分成10个组,除X23、Y36和Y37之外,其余菌株均按照不同的菌种聚类,与16S rRNA测序结果基本一致,聚类有较强的地域相关性。结论:RAPD技术可用于牦牛奶酪中乳酸菌的基因型研究,可用于菌种鉴定和遗传亲缘关系分析。; 杨吉霞陈芝兰杨海燕黄艾祥陈宗道; 关键词：乳酸菌随机扩增多态性聚类分析基因型鉴定遗传相似系数

PCR-DGGE法分析西藏传统发酵乳制品中乳酸菌的多样性被引量：20: 2014年; 目的:运用聚合酶链式反应和变性梯度凝胶电泳(polymerase chain reaction-denatured gradient gel electrophoresis,PCR-DGGE)技术分析西藏传统发酵乳制品中乳酸菌的生物多样性。方法:从西藏8个牧区采集19份样品,提取样品总DNA,用巢式和降落PCR扩增16S rRNA的V3区段,对扩增产物做变性梯度凝胶电泳,用NTsys 2.10e软件分析条带的相似性,切胶回收条带并测序,鉴定菌种并构建系统进化树、分析优势菌种。结果:19份样品中的乳酸菌菌群组成包括Lactobacillus paracasei、Lactobacillus helveticus、Lactobacillus fermentum、Lactobacillus crispatus、Lactobacillus delbrueckii、Lactobacillus buchneri、Lactococcus raffinolactis、Leuconostoc mesenteroide、Lactobacillus plantarum、Pediococcus pentosaceus、Lactococcus lactis、Streptococcus thermophilus。综合样品和牧区的乳酸菌分布情况,确定Lactobacillus delbrueckii为优势菌种。结论:PCR-DGGE技术能够有效分析西藏地区发酵乳制品中乳酸菌的多样性。; 蒋厚阳陈芝兰赵国华杨吉霞; 关键词：乳酸菌系统进化树优势菌种

16S rDNA序列分析法快速鉴定西藏地区传统乳制品中的乳酸菌被引量：19: 2013年; 对14株乳酸菌进行菌种鉴定。提取基因组DNA,采用属特异性聚合酶链式反应(PCR)、16S rDNA序列同源性分析、种特异性PCR与NEBcutter分析相结合的方法对乳酸菌进行鉴定。结果表明,14株菌中,除123-2和23-3外,其余12株菌均属于乳杆菌属;11-2、13-3、14-3、16-4、23-3、24-3、26-1、122-1、123-4为干酪乳杆菌或副干酪乳杆菌,17-5、20-2、28-1属于植物乳杆菌,123-2为肠膜状明串株菌,125-2为类布氏乳杆菌,除23-3外均与属特异性PCR结果相匹配;11-2、13-3、14-3、16-4、23-3、24-3、26-1、122-1、123-4均为副干酪乳杆菌。NEBcutter分析结果进一步验证了菌株划分的准确性。该方法快速可靠,且误差较小。; 夏雪娟陈芝兰陈宗道阚建全杨吉霞; 关键词：乳酸菌

牦牛奶酪中乳酸菌的分离鉴定及发酵性能分析被引量：14: 2013年; 为了探讨牦牛奶酪中乳酸菌菌种的多样性和发酵性能,从西藏、云南、新疆采集了17个样品,用MRS培养基菌落计数平均值为(4.08±0.60)(lg(CFU/g)),pH值平均值为4.52±0.29,采用表型和基因型相结合的方法鉴定出39株乳酸菌,其中乳杆菌35株为L.buchneri 2株、L.casei 16株、L.diolivorans 3株、L.fermentum 3株、L.helveticus 3株、L.kefiri 3株和L.plantarum 5株,片球菌4株为P.acidilactici 1株、P.pentosaceus 3株。通过对39株菌产酸活性、利用柠檬酸盐、产蛋白酶和胞外多糖活性等发酵性能分析,筛选出产酸活性强的菌株X24、X38、X29、X25、X21、X22、X30、X35,而菌株T7同时能利用柠檬酸盐、产蛋白酶和胞外多糖,都具有优良的发酵性能。说明牦牛奶酪中乳酸菌菌种具有多样性,有发酵性能优良的菌株。; 杨吉霞陈芝兰杨海燕黄艾祥陈宗道贺稚非; 关键词：乳酸菌菌种鉴定发酵性能

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