国家自然科学基金(30471297)
- 作品数：10 被引量：47H指数：4
- 相关作者：汪铭书程安春陈孝跃郭宇飞贾仁勇更多>>
- 相关机构：四川农业大学动物疫病与人类健康四川省重点实验室大理学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金四川省重点科学建设项目教育部“新世纪优秀人才支持计划”更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生更多>>
- 疱疹病毒TK基因的研究进展被引量：10
- 2008年
- 简述了疱疹病毒具有表达外源基因的优势,介绍了TK基因作为疱疹病毒化学治疗和构建疱疹病毒基因缺失疫苗的首选靶基因。从TK基因的特点、TK基因的表达调控、TK酶生化特性、TK的功能域等方面做了综合论述,并对其今后的研究和应用前景进行了讨论。
- 葛菡程安春汪铭书朱德康罗启慧贾仁勇郭宇飞陈孝跃
- 关键词：疱疹病毒胸苷激酶基因生化特性功能域
- 鸭病毒性肠炎病毒致鸭胚成纤维细胞发生凋亡作用的研究被引量：1
- 2007年
- 研究通过HE染色镜检发现,鸭病毒性肠炎病毒CH强毒株(DEV-CHv)可致鸭胚成纤维细胞(DEF)出现染色质颗粒化、细胞核变形等显著凋亡特征;TUNEL试验显示,接毒组细胞核内有多量棕黄色DAB显色颗粒,表明细胞出现了凋亡现象;DNALadder检测表明,接毒组细胞具有分子量分别为180～200bp及其整数倍的凋亡梯带电泳图谱特征;电镜观察发现,接毒组细胞具有染色质浓缩、边移,胞浆严重空泡化,细胞核严重变形,形成凋亡小体等典型凋亡特征。上述研究结果表明鸭病毒性肠炎病毒具有显著的致鸭胚成纤维细胞发生凋亡的作用。
- 郭宇飞程安春汪铭书贾仁勇文明周伟光陈孝跃
- 关键词：鸭病毒性肠炎病毒鸭胚成纤维细胞细胞凋亡
- 基于TaqMan-MGB探针实时荧光定量PCR对DPV强毒不同途径感染鸭实质器官增殖分布规律研究
- 鸭瘟病毒(DPV)CHv强毒株经皮下注射、滴鼻和口服三种途径分别感染20日龄天府肉鸭, 于10、30、60、90min以及4h、12h、48h、72h、9d、15d分别剖杀两只鸭,采集心、肝、脾、肺、肾、脑、胸腺、法氏囊...
- 杨晓燕程安春汪铭书齐雪峰郭宇飞葛忠源黄永成张素辉胡骑于波周登春陈孝跃
- 关键词：TAQMAN-MGB探针实时荧光定量PCR
- 文献传递
- 鸭病毒性肠炎病毒的提纯及其结构蛋白SDS-PAGE分析被引量：14
- 2006年
- 将鸭病毒性肠炎病毒（DEV）分离株SC-1经鸭胚成纤维细胞培养增殖后，采用差速离心结合蔗糖不连续密度梯度离心法进行提纯，获得多量、纯净的完整病毒粒子。病毒粒子主要位于40％～50％蔗糖层交界处，电镜下可观察到DEV具有典型的疱疹病毒特征，完整病毒粒子由囊膜、衣壳和核芯3个部分组成，直径为170～190nm。将纯化的DEV粒子经SDS—PAGE分析，发现其结构蛋白由11种多肽组成，即VP1（190000）、VP2（136000）、VP3（106000）、VP4（88000）、VP5（75000）、VP6（68000）、VP7（56000）、VP8（48000）、VP9（42000）、VP10（38000）和VP11（32000）．其中VP1、VP2、VP3、VP6、VP8和VP9等6条蛋白区带的相对百分含量较高，约占病毒结构蛋白总量的89．04％，为DEV的主要结构多肽。
- 文明程安春汪铭书周毅刘菲袁桂萍郭宇飞贾仁勇周伟光陈孝跃
- 关键词：提纯
- 鸭瘟病毒强毒株在感染鸭实质器官内的增殖与分布被引量：9
- 2008年
- 鸭瘟病毒(DPV)CHv强毒株经皮下注射、滴鼻和口服3种途径分别感染20日龄天府肉鸭,于攻毒后10、30、60、90min以及4、12、48、72h和9、15d每组分别剖杀2只鸭,采集心、肝、脾、肺、肾、脑、胸腺、法氏囊、哈德氏腺等实质器官,应用TaqMan-MGB探针实时荧光定量PCR对DPV在这些器官的分布和增殖进行检测。结果表明,DPV分布到具体器官的速度与感染的途径、鸭的解剖结构密切相关,其中皮下注射是DPV分布到各实质器官速度最快的途径。30min于皮下感染鸭的肝、脾、胸腺、法氏囊、哈德氏腺、肺、脑、肾,口服感染鸭的肺和法氏囊,滴鼻感染鸭的心脏和哈德氏腺均检测到DPV-DNA;90min所有受检样品中检测到DPV-DNA。鸭抗DPV感染的免疫器官的重要性依次是脾、胸腺、法氏囊和哈德氏腺,30min内DPV-DNA分布到脾、胸腺、法氏囊的速度和数量决定了DPV感染的潜伏期和疾病的严重程度。不同途经感染鸭的相同器官在同一时间内的DPV-DNA拷贝数大多以皮下感染鸭为最高。DPV致死鸭的法氏囊和肾是DPV-DNA含量最高的实质器官。
- 杨晓燕程安春汪铭书齐雪峰郭宇飞葛忠源黄永成张素辉胡骑于波周登春陈孝跃
- 关键词：实时荧光定量PCR
- 疱疹病毒UL35基因及其编码蛋白的研究进展
- 疱疹病毒为一类具有相同形态学且有较大囊膜的双链 DNA 病毒,其基因组由特定长区(UL) 和特定短区(US)两个共价结合的片段组成,两端为末端重复序列(TR),UL 和 US 连接处有内部重复序列(IR)。UL35是位于...
- 蔡铭升程安春汪铭书
- 关键词：疱疹病毒
- 文献传递
- 鸭瘟病毒强毒感染鸭肠道菌群的分子解析
- 2009年
- 应用ERIC—PCR法对鸭瘟病毒强毒株经皮下和口服感染20日龄鸭的十二指肠、空肠、回肠、盲肠和直肠中细菌菌群的结构多样性和动态变化进行了检测。结果表明：对照鸭肠道内的菌群结构相对稳定，其中十二指肠和空肠的ERIC—PCR条带最少，盲肠最多；皮下感染24h和口服48h前，各肠段ERIC—PCR扩增条带没有明显变化，皮下感染48h的鸭盲肠、口服感染72h的鸭盲肠和回肠条带数量明显增加，随着感染时间的延长，条带数呈逐渐减少的趋势，死亡鸭各肠段的条带最少。对ERIC—PCR扩增条带中主带的测序结果表明，大肠杆菌、志贺菌、沙门杆菌等需氧菌或兼性厌氧菌成为皮下感染鸭的直肠、口服感染鸭的盲肠（回肠和直肠）的优势菌群；口服感染鸭的回肠中一个未知菌成为优势菌群。
- 杨晓燕程安春汪铭书齐雪峰丁轲陈孝跃
- 疱疹病毒U_L34基因及其编码蛋白的研究进展被引量：2
- 2007年
- 论述了疱疹病毒UL34基因的序列特点、编码蛋白结构特点、基本功能以及它与UL31蛋白、Us3蛋白、动力蛋白、核纤层蛋白的相互作用。表明,UL34基因对病毒的早期包装、成熟和出芽以及对UL31蛋白和核纤层蛋白在感染细胞中的正确定位都具有重要作用。
- 钟小容程安春汪铭书陈孝跃
- 关键词：疱疹病毒编码蛋白
- 鸭病毒性肠炎病毒CH强毒株适应在鸭胚成纤维细胞上生长的研究被引量：1
- 2007年
- 对分离自鸭体的鸭病毒性肠炎病毒CH强毒株(DEV-CHv)进行了适应在鸭胚成纤维细胞(DEF)上生长的研究。结果表明,DEV-CHv病死鸭肝脏悬液以绒毛尿囊腔途径经10日龄鸭胚连续传代2次,取尿囊液接种细胞的方法可获得适应DEF生长的DEV-CHv,而肝组织内病毒直接接种在DEF上则不生长。DEV-CHv刚适应DEF时以细胞变圆、折光度增强为病变特征,而适应DEF后以细胞脱落和形成圆形蚀斑为特征。适应DEF的DEV-CHv通常30h左右使细胞脱落,36h左右在细胞单层上形成蚀斑,48h时细胞病变可达80%以上。
- 郭宇飞程安春汪铭书贾仁勇文明周伟光陈孝跃
- 关键词：鸭病毒性肠炎病毒鸭胚成纤维细胞
- 应用TaqMan-MGB探针FQ-PCR探讨鸭瘟弱毒苗在鸭体内的分布及排泄规律被引量：8
- 2008年
- 用鸭瘟病毒(DPV)Cha株弱毒苗皮下注射免疫20日龄樱桃谷鸭,应用TaqMan-MGB探针实时荧光定量PCR(FQ-PCR)对免疫后10、30、609、0 min及12、24 h和6、9、12、21、366、0 d鸭的心、肝、脾、肺、肾、脑、胸腺、法氏囊、哈德氏腺、回盲处、血液、气管、气管分泌液、食管及其分泌液、十二指肠、空肠、回肠、肓肠、直肠及各肠段分泌液中DPV-DNA的拷贝数(以对数值表示)进行了检测。结果显示,免疫后10 min即可在胸腺和血液中检测到DPV-DNA;60 min肾脏中DPV-DNA拷贝数最高(9.349);脾(9.932)、脑(9.791)、胸腺(9.736)、法氏囊(9.598)及哈德氏腺(8.135)中DPV-DNA拷贝数于90 min分别达到最高;12 h后所有受检样品中都能检测到DPV-DNA,其中心脏中DPV-DNA拷贝数最高(9.818);肠道中DPV-DNA拷贝数在免疫后6~12 d明显高于其他组织,其中盲肠是DPV-DNA拷贝数(10.591)最高的受检样品,直肠分泌液中DPV-DNA最早于90 min检测到。研究表明,免疫鸭于免疫早期在包括主要免疫器官在内的各实质...
- 齐雪峰程安春汪铭书杨晓燕郭宇飞陈孝跃
- 关键词：TAQMAN-MGB探针实时荧光定量PCR排泄规律
