国家自然科学基金(30370877)
- 作品数：29 被引量：102H指数：7
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- 发文基金：国家自然科学基金河南省杰出青年科学基金国家转基因植物研究与产业化专项更多>>
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- 转反义trxs基因对小麦种子α-淀粉酶活性的影响被引量：3
- 2004年
- 通过PCR检测,转基因小麦植株均出现474 bp的目的带,说明反义trxs基因已整合到小麦基因组上。经 测定在种子萌动过程中转基因种子的α-淀粉酶活性低于未转基因种子,证明该基因能够正常表达,从而使转基因品 种具有抗穗发芽的能力。
- 卫丽任江萍孔威维尹钧
- 关键词：反义TRXS基因转基因小麦种子酶活性
- 小麦TaWASI2基因克隆和表达
- 2009年
- 为了探讨小麦中wasi基因的结构与功能,以大麦basi基因的EST为基础,通过电子克隆结合RT-PCR方法分离克隆获得了608 bp的小麦α-淀粉酶/枯草杆菌蛋白酶抑制剂基因TaWASI2。序列分析显示,所克隆的基因片段包含513 bp的开放阅读框,编码一个含有170个氨基酸的多肽,具有保守的STI结构域。通过半定量PCR对TaWASI2基因的表达特性分析表明:TaWASI2基因在种子发育过程中表达量逐渐增加;在胚乳中表达高于其他组织。
- 郭建军任江萍牛洪斌李永春尹钧王娜
- 关键词：小麦
- 转反义硫氧还蛋白基因小麦萌发种子中蛋白质的变化(英文)被引量：6
- 2007年
- 硫氧还蛋白h(thioredoxin h,Trxh)是一类广泛存在于生物体内的多功能活性蛋白,分子量约为12kD,它通过还原靶蛋白中的二硫键参与酶活性调节、抗胁迫、信号传导等许多重要的生命活动。硫氧还蛋白h能促进谷物类种子萌发过程,主要表现在以下2个方面:(1)在籽粒萌发期间,硫氧还蛋白可通过还原储存蛋白的分子内二硫键使其更易于被降解;(2)硫氧还蛋白也可以直接地通过将酶还原或者间接地通过使酶抑制蛋白失活而激活酶。源于Phalaris coerulescens的trxs基因(thioredoxin s,trxs)与小麦硫氧还蛋白h基因(thioredoxin h,trxh)同属于硫氧还蛋白基因家族,它们的cDNA有94%的同源性,表达产物也有相似的生物功能。我们采用基因枪法将反义trxs基因导入小麦,获得了可稳定遗传的小麦,并检测出转基因种子中硫氧还蛋白h表达量、水溶蛋白和醇溶蛋白的还原状态以及a-淀粉酶活性均低于对照小麦;另外,通过模拟降雨抗穗发芽试验证实转基因株系具有很强的抗穗发芽能力。以转反义trxs基因抗穗发芽小麦为材料,检测反义trxs基因小麦籽粒萌发过程中蛋白质的变化,探讨转反义trxs基因小麦的抗穗发芽机理。研究表明反义trxs基因能够减缓KCl可溶性蛋白中Chloroform-methanol(CM)蛋白向代谢类蛋白的转化进程,在萌发初期降低籽粒代谢类蛋白的含量,使籽粒代谢速度下降,而CM蛋白主要包含一些分子量小于20kD的蛋白质。在籽粒成熟过程中,硫氧还蛋白能够阻止麦谷蛋白亚基形成谷蛋白聚合体的过程,在转基因小麦中麦谷蛋白更易于形成大分子量的谷蛋白大聚合体,使得转基因小麦中的谷蛋白在萌发初期更难于被水解,因此转基因小麦籽粒会因谷蛋白难于降解而萌发较慢。另外,反义trxs基因减慢了麦胚中10kD蛋白的降解过程。
- 郭红祥尹钧任江萍王振云陈焕丽
- 关键词：萌发小麦
- 反义trxs基因导入对小麦籽粒脱支酶活性的影响被引量：2
- 2007年
- 以转反义硫氧还蛋白基因株系01TY34-73-9及其对照品种‘豫麦34’为材料,运用PCR检测和酶活性测定的方法,对转基因株系遗传稳定性以及转基因与对照种子中脱支酶活性进行测定。结果显示:(1)外源基因已经稳定遗传至后代;(2)转基因种子在不同成熟时期和不同萌发过程中的脱支酶活性与对照相比均有不同程度的降低平均降低10.3%,但仅花后25 d到收获后5 d脱支酶活性显著低于对照,其中最低值出现在花后30 d,平均比对照下降了12.0%;(3)在花后30 d和后熟5 d萌发过程中,转基因种子脱支酶活性始终低于对照,平均下降6.2%和22.2%。表明反义trxs基因的导入干扰了小麦trxh基因的表达,使trxh转录量减少,小麦籽粒中脱支酶的活性受抑。
- 任江萍王振云王新国尹钧
- 关键词：小麦反义TRXS基因
- REC法鉴定黄淮麦区15个小麦品种的耐热性被引量：6
- 2009年
- 以生长10 d的小麦幼苗为材料,通过测定热胁迫处理前后叶片相对电导率(REC)的变化鉴定其耐热性。结果表明,15个供试小麦品种中,周麦16、豫麦49-198等6个品种为耐热品种,豫麦70、周麦19等8个品种为热敏感品种。
- 陈小霞景晓东梁小娜尹钧牛洪斌
- 关键词：小麦耐热性相对电导率
- 反义trxs基因的导入对小麦种子发芽的影响被引量：30
- 2004年
- 用基因枪将反义trxs基因导入小麦幼胚 ,经组织培养获得了抗性再生植株。PCR及限制酶切检测显示 ,反义trxs基因在转基因植株中基本完整。生化指标测定及发芽特性试验表明 ,与对照相比 ,转基因籽粒中Trxh活性明显降低 ;水溶蛋白和醇溶蛋白中巯基含量比率以及α 淀粉酶活性都有所下降 ;转基因种子的发芽势明显降低 ,但种子最终发芽率变化不大。
- 刘雷尹钧任江萍韩锦峰
- 关键词：反义TRXS基因小麦种子发芽率转基因
- 反义Trx s基因对小麦种子萌发中α-淀粉酶的影响被引量：3
- 2009年
- 为进一步明确转反义Trx s基因小麦抗穗发芽的生理机制,以转反义Trx s基因小麦为研究材料,采用电泳等生化技术分析了小麦种子萌发过程中α-淀粉酶活性及其同工酶的变化。实验结果表明,反义Trx s基因转入小麦后,明显降低了种子萌发过程中α-淀粉酶的活性。这种影响作用主要表现在三个方面:(1)影响酶蛋白的合成或降解速度;(2)影响酶存在的状态(抑制态和活性态);(3)影响淀粉酶由麦胚向胚乳的转运。
- 郭红祥尹钧
- 关键词：小麦S基因Α-淀粉酶萌发
- 小麦AQPs蛋白TaPIP1基因cDNA克隆及其表达分析被引量：1
- 2010年
- 为探索小麦水通道蛋白在氮素处理过程中的生物学功能,以0.1%尿素处理6.0 h的周麦19幼根为材料,利用RT-PCR方法克隆了小麦PIPs类型的水通道蛋白基因TaPIP1,并分析了该基因的组织表达特性及其在尿素处理过程中的表达特征。TaPIP1全长1 062 bp,包括61 bp的5′非翻译区,128 bp的3′非翻译区和一个长度为873 bp、编码290个氨基酸的开放阅读框。序列分析表明,TaPIP1基因与已知小麦（GQ452384和AAM00368）、大麦（BAA23746,CAA54233和BAA23745）、水稻（BAA24016）和玉米（AAK26754,ACG39699,ACG37183,CAA57955和AAK26756）等单子叶植物来源的同类基因同源性较高,相似性为85.9%-99.3%。半定量RT-PCR表达谱分析显示,TaPIP1在抽穗期小麦的根、茎和旗叶中均能表达。氮素处理下该基因表达分析结果显示,TaPIP1在萌发期小麦根系中的表达受尿素的诱导。
- 牛洪斌吕军朋邓德芝景晓东李巧云王翔任江萍李永春尹钧
- 关键词：小麦
- 反义TrxS基因在小麦中的表达及对小麦种子蛋白酶活性和蛋白组分的影响被引量：3
- 2008年
- 为了揭示反义硫氧还蛋白基因(anti-TrxS)在抗穗发芽小麦中的作用机制,探讨转基因小麦中蛋白酶活性和蛋白组分的变化规律,以转反义TrxS基因小麦株系为材料,用荧光定量RT-PCR、SDS-PAGE和生理指标测定的方法,对转基因株系和对照种子萌发过程中反义TrxS基因表达、蛋白酶活性和蛋白组分进行了检测。结果表明,反义TrxS基因在RNA水平上能够表达;转基因小麦籽粒蛋白酶活性明显下降,种子吸涨12、24、48、729、6和120 h后,转基因小麦种子蛋白酶活性比对照分别降低27.3%、30.7%、19.1%、19.4%、23.7%和13.5%;转基因小麦籽粒谷蛋白、醇溶蛋白的SDS-PAGE分析表明,反义TrxS基因的导入抑制了转基因小麦籽粒谷蛋白和醇溶蛋白大分子亚基二硫键(S-S)向巯基(-SH)的转化,从而使蛋白质的降解延缓。
- 任江萍李磊王新国牛洪斌李永春孟凡荣尹钧
- 关键词：小麦反义TRXS基因蛋白酶蛋白组分
- 转TRXS基因啤酒大麦种子中硫氧还蛋白H与淀粉酶活性变化被引量：8
- 2006年
- 导入TRXS基因后,转基因大麦籽粒的硫氧还蛋白H活性明显提高;淀粉酶活性也明显提高,其中Α-淀粉酶活性在开花后30D提高了3倍以上,随着籽粒的发育,转基因对Α-淀粉酶活性影响作用减少,对Β-淀粉酶活性的影响有同样的趋势;转基因大麦种子发芽势明显提高。说明TRXS基因有望改善啤酒大麦的制麦特性和品质特性。
- 尹钧卫丽姜玉梅孔维威任江萍李磊
- 关键词：淀粉酶活性
