山东省优秀中青年科学家科研奖励基金(2006BS03023)
- 作品数：11 被引量：17H指数：3
- 相关作者：管英俊杜红梅袁丽丽张皓云于丽更多>>
- 相关机构：潍坊医学院济宁医学院泰山医学院更多>>
- 发文基金：山东省优秀中青年科学家科研奖励基金国家自然科学基金山东省高等学校优秀青年教师国内访问学者项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 维甲酸、音猬因子对大鼠脊髓神经干细胞向运动神经元样细胞分化的影响被引量：2
- 2010年
- 目的：分离大鼠胚胎的脊髓神经干细胞进行体外培养，探讨维甲酸（RA）、音猬因子（Shh）诱导其向运动神经元样细胞分化。方法：应用无血清培养技术分离培养脊髓神经干细胞，通过5-溴-2-脱氧尿苷标记、免疫荧光显色检测细胞增殖、分化情况；培养液分组添加Shh、RA或shh＋RA，观察神经干细胞向运动神经元样细胞的分化情况。结果：大鼠胚胎脊髓可成功分离神经干细胞，分化后可表达神经元、星形胶质细胞的特异性抗原；诱导分化后结果显示Shh组未检测到胆碱乙酰转移酶阳性细胞，RA组为20．63％，shh＋RA组为66．84％，其差异具统计学意义。结论：从大鼠胚胎脊髓可成功分离神经干细胞，Shh、RA可不同程度地诱导脊髓神经干细胞分化为运动神经元样细胞。
- 杜红梅管英俊袁丽丽张皓云
- 关键词：神经干细胞脊髓运动神经元
- 大鼠脊髓神经干细胞的鉴定及光镜和电镜观察被引量：4
- 2009年
- 本研究应用无血清培养技术对分离的大鼠胚胎脊髓神经干细胞进行体外培养,在倒置显微镜和电镜下观察细胞形态,应用BrdU标记、免疫荧光染色检测细胞增殖、分化情况。免疫荧光显示nestin、MAP2、GFAP以及BrdU/nestin、BrdU/MAP2、Br-dU/GFAP均有阳性表达,说明从大鼠胚胎脊髓可成功分离出神经干细胞,它们分化后可以表达神经元、星形胶质细胞的特异性抗原。脊髓神经干细胞具有自我更新能力,能分化为神经元和星型胶质细胞。
- 杜红梅管英俊袁丽丽张皓云
- 关键词：神经干细胞脊髓细胞培养
- 成年肌萎缩脊髓侧索硬化症转基因鼠脊髓细胞增殖的研究被引量：1
- 2008年
- 目的观察成年肌萎缩脊髓侧索硬化症(ALS)转基因模型鼠脊髓内源性细胞的增殖和存活情况。方法对ALS转基因鼠进行BrdU注射,分别于不同时间点取材,冷冻切片,应用免疫荧光染色技术检测脊髓内细胞的增殖、分布和存活情况。结果成年ALS鼠脊髓的中央管、灰质、白质均可检测到BrdU阳性细胞,经常可检测到形状相似、成对出现的细胞。在灰质内,BrdU阳性细胞主要分布于脊髓前角。在白质内,BrdU阳性细胞散在分布。前角ALS鼠脊髓内BrdU阳性细胞数量较野生型鼠多。BrdU末次注射后1d、14d均可检测到BrdU阳性细胞,但细胞数量逐渐减少,28d ALS鼠脊髓内仍可检测到少量BrdU阳性细胞,主要分布于中央管部位。增殖细胞核抗原(PCNA)阳性细胞的分布和变化规律与BrdU阳性细胞一致。在95d龄ALS鼠(BrdU末次注射1d后),脊髓中Nestin阳性细胞较野生型鼠多,多数Nestin阳性细胞分布于脊髓前角,某些细胞呈BrdU/Nestin双标阳性。在BrdU注射后14d、28d脊髓中,未检测到BrdU/Nestin双标阳性细胞。结论神经退行性病变可激活ALS转基因鼠脊髓的细胞增殖,且细胞存活可达28d。
- 管英俊于丽岳炳德高海玲陈燕春张皓云
- 关键词：脊髓细胞增殖BRDU标记免疫荧光染色转基因鼠
- β-catenin在高温致金黄地鼠神经管畸形神经上皮细胞中的表达变化
- 2010年
- 目的探讨高温致神经管畸形(neural tube defects,NTDs)的分子机制。方法在高温致金黄地鼠NTDs模型的基础上,研究NTDs神经上皮细胞中的表达变化。将孕鼠随机分为实验组和对照组,分别于水浴处理后16、40、64 h(相当于胚龄第8.5、9.5、10.5 d)处死孕鼠,剖腹取鼠胚,应用免疫组织化学染色技术和Western-blot法检测NTDs发生过程中β-catenin在神经上皮细胞中的表达变化。结果免疫组化结果显示:β-catenin在各个时间点实验组和对照组的神经上皮细胞以及周围间充质细胞都有表达,高温处理后16 h和40 hβ-catenin与对照组相比表达减弱(P<0.05)。Western-blot结果显示:高温处理后16和40 h,β-catenin在实验组神经上皮细胞内的表达均比对照组明显减弱;高温处理64 h,实验组与对照组表达无明显差异。结论β-catenin的表达变化与神经管的发育密切相关,其表达降低是高温致神经管畸形发生的重要途径之一。
- 石娟管英俊张炳强孙丰刚安淑红
- 关键词：Β-CATENIN神经管畸形高温金黄地鼠
- 体外培养大鼠胚胎脊髓神经干细胞的增殖和分化
- 2008年
- 目的探讨大鼠胚胎脊髓神经干细胞的体外培养生长及分化情况,为神经干细胞的临床应用提供实验依据。方法取孕13d SD大鼠胚胎脊髓,在条件培养基中培养获得神经干细胞,应用免疫荧光法鉴定。神经干细胞在含血清的培养基中传代培养,应用免疫细胞化学法检测神经干细胞的分化情况。结果从大鼠胚胎脊髓可获得具有自我增殖分化能力的神经干细胞,培养7d即可获得神经球。用免疫细胞化学和免疫荧光法鉴定干细胞分化,可检测到神经元和星形胶质细胞。结论从大鼠胚胎脊髓能分离获得神经干细胞,并可向神经元和星形胶质细胞方向分化。
- 李秀凤管英俊于丽孙瑜婉李云飞
- 关键词：脊髓神经干细胞细胞培养
- 不同部位来源的神经干细胞的研究进展被引量：4
- 2008年
- 神经干细胞体外分离培养的成功,为神经系统疾病的细胞移植治疗提供了广阔的细胞来源。目前,从脑、脊髓、骨髓、脐血、脂肪组织和脐带等均可分离得到神经干细胞,并可诱导分化为其他细胞。但是,神经干细胞来源部位不同,其分离培养的方法及其特性均不同。本文就近年来不同部位来源的神经干细胞的研究进展作一综述。
- 李秀凤管英俊于丽
- 关键词：同部位体外分离培养神经系统疾病脂肪组织诱导分化
- 大鼠脊髓神经干细胞的体外培养及鉴定被引量：1
- 2009年
- 目的:体外培养大鼠胚胎脊髓神经干细胞,观察其生长、增殖和分化特点。方法:利用倒置显微镜、MTT法、免疫细胞化学等方法检测神经干细胞的增殖、分化情况。结果:分离的脊髓神经干细胞可形成大量悬浮的神经球,并可进行体外扩增传代,神经球内的细胞均呈nestin阳性。在添加10%胎牛血清7d后,神经球细胞可分化为有神经元、星形胶质细胞特异性抗原表达的细胞。结论:体外培养大鼠胚胎脊髓可得到大量神经干细胞,并能分化为神经元和星形胶质细胞。
- 杜红梅管英俊袁丽丽王雪净
- 关键词：脊髓神经干细胞细胞培养
- 缺氧对体外培养的鼠胚皮质神经干细胞增殖、分化及凋亡的影响被引量：4
- 2008年
- 探讨缺氧对体外培养的鼠胚大脑皮质神经干细胞(neural stem cells,NSCs)增殖、分化及凋亡的影响,为NSCs移植治疗缺血缺氧性脑损伤病变提供实验依据。本研究对孕14d(E14)大鼠取鼠胚脑皮质悬浮培养、贴壁诱导分化。取悬浮培养的第三代NSCs分为实验组(10%O2、5%O2)和正常对照组(20%O2),实验组又以缺氧干预的时间不同分为24、72、120h3个组。通过MTT法和BrdU标记法检测缺氧对NSCs增殖的影响,采用caspase-3检测细胞凋亡情况。缺氧培养后再用10%胎牛血清培养基进行诱导分化,用MAP2免疫荧光染色检测缺氧对NSCs向神经元方向分化的影响。结果显示:(1)10%O272h组和5%O272h组均可诱导NSCs增殖,尤以前者最为明显;(2)10%O2120h组和5%O2120h组均可致NSCs凋亡;(3)5%O2组尤以72h组可诱导NSCs向神经元方向分化。本研究结果提示缺氧可影响NSCs的增殖、分化和存活,适度缺氧可诱导离体培养的大鼠脑皮质NSCs增殖,并可向神经元方向分化,而缺氧时间延长可致NSCs凋亡。
- 袁丽丽管英俊杜红梅马登殿
- 关键词：缺氧增殖分化凋亡
- 大鼠骨骼肌植块诱导脊髓神经干细胞向运动神经元样细胞的分化
- 2008年
- 目的:分离大鼠胚胎的脊髓神经干细胞进行体外培养,探讨骨骼肌植块诱导其向运动神经元样细胞分化。方法:应用无血清培养技术分离培养脊髓神经干细胞,通过5-溴-2-脱氧尿苷标记、免疫荧光染色检测细胞增殖、分化情况;通过与骨骼肌植块共培养观察神经干细胞向运动神经元样细胞的分化情况。结果:大鼠胚胎脊髓可成功分离神经干细胞,分化后可表达神经元、星形胶质细胞的特异性抗原;诱导分化后结果显示,骨骼肌植块组有7.87%的细胞呈胆碱乙酰基转移酶阳性,与10%胎牛血清组(0.94%)比较具有统计学意义。结论:从大鼠胚胎脊髓可成功分离神经干细胞,骨骼肌植块可诱导脊髓神经干细胞分化为运动神经元样细胞。
- 杜红梅管英俊袁丽丽张皓云
- 关键词：神经干细胞脊髓细胞培养运动神经元
- 基因差异表达筛选技术在神经干细胞研究中的应用
- 2008年
- 石娟管英俊张炳强
- 关键词：神经干细胞基因差异表达多向分化潜能神经系统疾病NSCS
