北京市自然科学基金(7042020)
- 作品数：19 被引量：35H指数：4
- 相关作者：李根林刘月月王津津张娟美张诚玥更多>>
- 相关机构：首都医科大学北京市神经外科科研究所北京大学更多>>
- 发文基金：北京市自然科学基金国家自然科学基金教育部科学技术研究重大项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 枸杞对虹膜色素上皮细胞增殖活性干预作用的研究
- 2005年
- 目的寻找能够促进虹膜色素上皮细胞(irispigmentepithelium,IPE)增殖活性的相关因素。方法以激光共聚焦显微镜为研究手段,分析枸杞水煎液作用下,IPE线粒体膜电位(mitochondrialmembranepotential,MMP)的变化。通过MTT检测方法了解枸杞对IPE增殖的影响。结果枸杞水煎液在3.125mg/ml到50mg/ml范围内对IPE具有明显的促增殖作用,与剂量呈现相关性。枸杞使IPE细胞线粒体膜电位明显上升,浓度达到22mg/ml时细胞线粒体膜电位明显升高,后逐渐稳定。浓度达到54mg/ml时曲线再次上升。结论枸杞水煎液具有较好的IPE活性保护作用,对体外培养的IPE具有良好的促增殖作用。
- 王红李根林刘月月林丁王津津
- 关键词：虹膜色素上皮细胞枸杞细胞增殖药物干预
- 快速退变性视网膜变性感光细胞超微结构变化分析被引量：1
- 2007年
- 目的了解快速退变性遗传性视网膜变性的感光细胞在出生后早期发生的形态学变化,为临床治疗提供依据。方法取出生后不同时间的rd小鼠及正常对照小鼠各6只的视网膜,经光镜、扫描电镜和透射电镜观察感光细胞的形态发生发育和结构变化过程,比较二者的动态变化和形态学差异。结果rd鼠生后1周开始出现感光细胞节段变短,内节段内线粒体变性改变多见;偶见感光细胞核旁胞浆内出现肿胀变形的线粒体。2周时节段层变薄,内节段结构已不完整,外节膜盘少见,变形且排列不整齐;外核层细胞层数明显减少,可见核固缩及染色质凝聚,偶见外丛状层部分神经突起内出现变性的线粒体。3周时节段层近消失,外核层只剩一层细胞,胞浆内可见髓样结构;外丛状层变薄。4周时内节段高度变形,视网膜色素上皮层与外核层之间出现大量不成形结构。外核层仅残存少许胞体,胞浆内出现多量不成形结构。外丛状层极薄,部分区域已消失。结论rd鼠在出生后早期就发生感光细胞的变性改变,细胞内线粒体改变明显。其感光细胞变性发生早,进展快,呈快速退变特点。
- 段欣荣李根林李辽青
- 关键词：感光细胞视网膜变性RD小鼠
- MHC-Ⅱ分子在视网膜不同时期表达特点的实验研究
- 2008年
- 白大勇李根林刘月月王津津
- 关键词：分子C57BL/6小鼠视网膜移植免疫排斥反应
- 不同剂量脑源性神经营养因子作用下视网膜色素变性组织中bcl-2蛋白的动态表达特征被引量：3
- 2012年
- 目的探讨不同剂量脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)作用下,出生后不同时间视网膜色素变性(retinitis pigmentosa,RP)小鼠视网膜组织内bcl-2蛋白表达的动态变化特征。方法分别取生后(postnatal,PN)2周龄、3周龄的rd小鼠各16只,其中各8只玻璃体内注射浓度分别为100μg·L-1和200μg·L-1BDNF,另各8只中4只玻璃体内注射相同体积磷酸盐缓冲液(PBS)作为治疗对照组,另4只玻璃体内不注射任何物质作为空白对照组。取PN-2周龄、3周龄C57BL/6小鼠(各4只)作为正常对照组。在注射后2周时即分别为PN-4周龄和PN-5周龄时将小鼠处死。在小鼠处死后30s内取出眼球,进行冰冻切片的制作和免疫荧光染色(按常规荧光染色程序进行)。Leica DM4000B荧光显微镜观察并照相,Im-age Pro Plus6.0图像分析软件对图像进行半定量分析,选用平均荧光强度为分析指标。结果 100μg·L-1和200μg·L-1BD-NF作用2周后即PN-4周龄rd小鼠视网膜组织内bcl-2的表达:正常对照组视网膜外核层(outer nuclear layer,ONL)外侧面、外丛状层(outer plexiform layer,OPL)、内丛状层(inner plexiform layer,IPL)及神经纤维层(nerve fiber layer,NFL)均有bcl-2蛋白(25.30±2.07)表达;而空白对照组(20.20±5.40)、治疗对照组(15.00±3.70)和BDNF治疗组(102.35±29.89、162.25±30.21)在OPL、IPL和NFL均有表达,其中治疗对照组低于空白对照组,BDNF治疗组高于空白对照组和治疗对照组。100μg·L-1和200μg·L-1BDNF作用2周后即PN-5周龄rd小鼠视网膜组织内bcl-2的表达:正常对照组ONL外侧面、OPL、IPL及NFL均有bcl-2蛋白(28.18±8.64)表达;而空白对照组(15.77±2.05)、治疗对照组(16.76±5.66)和100μg·L-1及200μg·L-1BDNF治疗组(76.00±30.14、136.62±23.52)在OPL、IPL和NFL均有表达,其中空白对照组与治疗对照组相比差异无统计学意义,BDNF治疗组高于空白对照组和治疗对照组。结论 BDNF对不同病变时期RP组织内抗凋亡�
- 殷晓贝陈蕊李根林
- 关键词：脑源性神经营养因子BCL-2RD小鼠免疫荧光染色
- 复方中药制剂抑制成纤维化增生作用的实验研究△被引量：3
- 2006年
- 目的观察复方中药制剂对结膜成纤维细胞增生的抑制作用,为临床防治增生性玻璃体视网膜病变提供新的治疗方法。方法以体外培养的兔结膜成纤维细胞作为研究对象,对照组用地塞米松、5-氟尿嘧啶、氢化可的松处理,实验组用丹苓(颗粒)冲剂及其君药(丹参、石决明)处理。48h后,用MTT法观察成纤维细胞增生情况及其细胞形态变化特点。结果丹苓(颗粒)冲剂和丹参在一定浓度范围内可抑制成纤维细胞增生,且成剂量依赖关系;石决明对成纤维细胞增生未见明显抑制作用。5-氟尿嘧啶、氢化可的松在一定浓度范围内可明显抑制成纤维细胞增生;地塞米松在低浓度时轻度刺激成纤维细胞增生,但在高浓度时抑制成纤维细胞的增生。丹苓(颗粒)冲剂和丹参作用48h后,部分成纤维细胞未能贴壁且收缩成圆形。结论丹苓(颗粒)冲剂可有效抑制成纤维细胞增生,有望成为防治增生性玻璃体视网膜病变的新药物。
- 张诚玥李根林刘月月
- 关键词：中药石决明MTT
- 人胚胎7个月视网膜超微结构特点
- 2009年
- 目的探讨胚胎7个月时人视网膜组织结构和视网膜感光细胞、内核层细胞和神经节细胞的发育特征。方法以胚胎7个月(27～28孕周)因外伤自愿终止妊娠的流产人胚胎2例(4只眼球)为研究对象,每只眼球于后极部定位取视网膜组织片4个,常规电镜标本处理程序后分别行扫描电镜和透射电镜观察。结果人胚胎7个月视网膜分两层。外层为感光细胞层,内含大量线粒体,胞浆远端可见不完整外界膜,偶见纤毛结构,但未见感光细胞外节段。感光细胞层外侧面多见"棘突样"和"圆形"结构,散在"蘑菇状"形结构。部分感光细胞核呈分叶状,多数胞核以常染色质为主,核仁多偏心分布。外网状层疏松成网状,突触联系少见。内核层内可见胞核各异的多种细胞,部分胞核常/异染色质比例接近,核仁偏心分布。内网状层内可见细胞间电子致密带,但数量较少,未见典型的"突触结构"。神经节细胞数量稀少,部分核内异染色质多见,常染色质密度均匀,核膜清晰。神经纤维层内可见成束神经丝和较紧密排列的神经纤维。内界膜菲薄,部分结构呈节段样外观,其间散在直径为2～3μm的微孔。结论胚胎7个月时,人视网膜神经细胞结构幼稚于正常成熟期视网膜,神经细胞间功能联系不完善,提示此期人视网膜处于发育重塑的关键时期。
- 李根林刘月月张湘雷祥王津津
- 关键词：视网膜胚胎超微结构形态学
- 人胚胎九个月视网膜组织超微形态学观察
- 2009年
- 目的观察人胚胎9个月时视网膜组织结构，探讨出生前期视网膜内神经元发育特征及意义。方法取因外伤自愿终止妊娠的9个月人胚胎2例4个眼球，1例孕周为35周，1例为36周。胎龄根据孕妇的末次月经及测量胚胎坐高而确定。每只眼球于后极部定位取材视网膜组织片4个，常规电子显微镜标本处理程序后进行观察。扫描电子显微镜（SEM）和透射电子显微镜（TEM）共观察视网膜样本8个。结果胚胎9个月时，外核层内含有5～6层感光细胞，外界膜外侧散在分布直径为2～3μm的球形膜性结构。感光细胞内节段排列紧密，其间可见含粘连小带的外界膜，内含线粒体，其外侧可见纤毛。外节段较小，其内可见少量排列欠整的盘膜结构。感光细胞为多形核，常和（或）异染色质比例接近。感光细胞轴突分支少而细，与内核层细胞间联系较少，未见典型的“突触”结构。视网膜内核层含4～5层胞体，多种胞核常和（或）异染色质密度不均，部分为分叶核，核膜清晰。内网状层内各神经细胞分枝细小，神经突起间联系较少，少见典型的“突触”结构。视网膜神经节细胞（RGC）数量较少，胞膜完整，胞浆内可见大的细胞核和粗面内质网，核膜为连续的双层膜性结构，核内以常染色质为主。视网膜内界膜为双层膜性结构，其内侧可见排列整齐的神经纤维层，表面分布直径2～3μm的微孔，其间散在4～5μm的较大孔隙。结论胚胎9个月时，人视网膜组织各层结构已经形成，但部分细胞结构和细胞联系尚未成熟，提示此期人视网膜发育仍处于发育重塑的重要时期。
- 李根林刘月月张湘雷祥
- 关键词：显微镜检查
- APO A-I与眼部疾病关系的研究进展
- 2013年
- 载脂蛋白A-I(apolipoprotein A-I,APO A-I)作为高密度脂蛋白的重要组成部分,具有维持高密度脂蛋白结构稳定、参与胆固醇逆转运、抗炎和抗氧化的作用。APO A-I水平异常会导致一系列疾病,如:心肌梗死、阿尔茨海默病、遗传性淀粉样变性等。近来研究发现,APO A-I的水平与糖尿病视网膜病变、年龄相关性黄斑变性等眼科疾病密切相关。本文就APO A-I与眼部疾病关系的研究现状进行综述。
- 李孟达李根林
- 关键词：生理功能眼部疾病
- 复方中药制剂诱导成纤维细胞凋亡的实验研究被引量：1
- 2008年
- 目的观察丹苓冲剂及丹参对成纤维细胞凋亡的诱导作用,为临床上防治增生性玻璃体视网膜病变(PVR)提供新药物。方法AnnexinV-FITC和碘化丙锭(PI)双染法,在流式细胞仪下测定不同质量浓度的丹苓冲剂与丹参作用不同时间后,成纤维细胞的早期凋亡率。用末端脱氧核糖核酸酶介导的dUTP末端标记法(TUNEL法)观察丹苓冲剂与丹参作用48h后的细胞凋亡情况。结果50mg/mL、100mg/mL丹苓冲剂和3.47、27.75、111mg/mL丹参作用6h组与24h组及1.56mg/mL丹苓冲剂作用24h组细胞早期凋亡率与正常对照相比差异均有统计学意义(P<0.01)。丹苓冲剂与丹参作用48h后,细胞核出现阳性着色。结论中药丹苓冲剂及其单体成分丹参可以诱导成纤维细胞凋亡,有望成为新的防治PVR的药物。
- 张诚玥李根林范尔钟
- 关键词：中药丹参成纤维细胞流式细胞仪
- 正常和色素变性视网膜组织内神经营养素-3表达的变化被引量：1
- 2006年
- 目的 对视网膜变性动物模型（rd小鼠）和正常对照动物（C57BL小鼠）视网膜内的神经营养素-3（neurotrophin-3，NT-3）在出生后第0～4周龄5个时间点的表达情况进行观察对比，研究视网膜早期的生长发育规律，以及正常和基因型异常视网膜变性组织内NT-3的表达特点和变化规律，进而探讨NT-3在视网膜生长发育以及变性过程中的可能作用。方法 出生后第0～4周龄的rd小鼠（病变组）和C57BL小鼠（正常对照组）在每个时间点上各取8～10只处死后，即刻摘出眼球，行冰冻切片法制备视网膜切片，厚度为4μm，采用免疫组织化学法、光学显微镜联合灰度值半定量分析法，分别对不同时期、不同种类视网膜组织内NT-3含量进行测定。结果 出生后第2周龄时，2组小鼠视网膜的10层结构均基本形成，病变组较对照组差。出生后第3周龄时，病变组视网膜的内外核层（inner and outer nuclear layer，INL and ONL）已迅速退变为1层，对照组视网膜的INL和ONL已明显分出并最终成形。NT-3在对照组视网膜的节细胞层（ganglion cell layer，GCL）、内丛状层（inner plexiform layer，IPL）、INL以及ONL逐渐着染；而在病变组，NT-3仅在视网膜的GCL和IPL出现着染。在出生后第0，1周龄时，病变组视网膜内的NT-3含量均低于同期对照组（P〈0．05）。对照组的NT-3含量升高，而病变组的NT-3含量降低。结论 就生长发育而言，在正常小鼠视网膜组织，出生后第2周龄时初步形成视网膜10层结构，出生后第3周龄时视网膜具备典型的10层结构；在视网膜变性小鼠视网膜组织，出生后第2周龄时也初步形成视网膜10层结构，而出生后第3周龄时视网膜的内外核层迅速退变。就分布而言，正常视网膜组织内的NT-3在ONL、INL、IPL和GCL着染，而变性视网膜组织内的NT-3仅在IPL和GCL着染。就NT-3的表达而言，正常视网膜组织在出�
- 郑浩李根林刘月月
- 关键词：神经营养素-3视网膜变性免疫组织化学半定量分析
