国家自然科学基金(30801379)
- 作品数:5 被引量:4H指数:1
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- 肝癌细胞系中SP及CD133+细胞的特性分析被引量:4
- 2011年
- 近年的研究表明体外培养的肝癌细胞系中存在着少量具有肝癌干细胞功能的细胞群。有研究指出肝癌干细胞存在于侧群细胞(sidepopulation,SP)中,另有研究则发现CD133+细胞是肝癌干细胞的特征。本研究以三种肝癌细胞系(Hep3B、Huh-7和PLC/PRF/5)为对象,利用流式细胞术对其中的SP细胞与CD133+细胞进行了分析,并进一步检测了它们的增殖能力、表型及耐药性等特性。结果显示,肝癌细胞系中存在不同比例的SP细胞和CD133+细胞,且大部分SP细胞呈CD133阳性表达。表型特征分析显示SP细胞表达CK7和CK19,不表达AFP,而CD133+细胞则表达AFP和CK19,却不表达CK7。SP与CD133+细胞都具有较强的增殖能力。另外,相比于其它细胞,SP细胞具有最强的化疗药物抗性。结果表明,肝癌细胞系中SP细胞与CD133+细胞整体特征有一定的区别,提示了它们不同的分化途径。
- 陈侃田雪君陈兴华贾晓渊钱程李恭楚
- 关键词:肝癌干细胞SP细胞CD133肿瘤耐药
- 蛋白酶体抑制剂MG132诱导KG-1细胞凋亡的机制研究
- 2011年
- 研究蛋白酶体抑制剂MG132对人急性髓性白血病细胞株KG-1的致凋亡作用及其对细胞内信号传导因子NF-κB与凋亡蛋白PARP表达的影响。采用CCK-8法检测MG132对KG-1细胞增殖的抑制作用;利用Hoechst33342染色法,从形态学上观察凋亡的KG-1细胞;Western blot检测NF-κB活性及与凋亡相关的蛋白变化情况。CCK-8法检测结果表明,MG132能明显抑制KG-1细胞生长,并呈现时间依赖性和浓度依赖性;Hoechst染色和Western blot检测实验证明,MG132诱导KG-1细胞发生凋亡的同时,NF-κB活性明显降低,细胞凋亡蛋白PARP降解为P89蛋白。以上结果显示,MG132能诱导KG-1细胞凋亡,其机制可能与MG132抑制NF-κB信号转导通路,下调NF-κB表达继而增加凋亡蛋白PARP剪切有关。
- 陈磊范丽李新谢国良何国清路巧然吴欣欣李恭楚
- 关键词:蛋白酶体抑制剂细胞凋亡NF-ΚBPARP
- 卵巢癌病人腹水细胞的培养及其分化研究
- 2011年
- 肿瘤干细胞是指能分化出不同表型、自我更新和不断分化的肿瘤细胞群,具有与干细胞相似的特征。文章通过流式细胞术分析从人卵巢癌腹水分离所得的细胞表面蛋白的分化特征,发现这些腹水细胞具有部分干细胞表面标志(CD44+,CD90+,β2M+)蛋白,但却不表达CD133和CD34,且体外培养2周后,腹水细胞表面标志发生了变化,这些结果为卵巢癌干细胞研究提出了新的启示。
- 路巧然吴欣欣贾晓渊陈磊陈侃
- 关键词:肿瘤干细胞
- 融合蛋白sCAR-TSP-1原核表达纯化及诱导白血病细胞K562凋亡的研究
- 2012年
- 根据thrombospondin-1(TSP-1)氨基酸序列(RFYVVMWK),以已有的腺病毒受体sCAR为模板,将8个氨基酸对应基因核苷酸通过PCR扩增于sCAR之后,得到sCAR-TSP-1,连接到表达载体pQE30上,转化大肠杆菌M15后获得工程茵。该菌株经IPTG诱导后,高效表达出带有组氨酸标签以包涵体形式存在的融合蛋白sCAR-TSP-1。包涵体经过尿素变性溶解、PBS稀释复性、Ni离子亲和层析柱纯化,获得目的蛋白。SDS-PAGE分析表明,有一条明显的特异性蛋白条带。同时细胞实验结果表明融合蛋白sCAR-TSP-1对白血病细胞K562有明显凋亡作用。
- 梁天祥谌贺宽子陈磊武虎唐斌
- 关键词:TSP-1原核表达白血病细胞
- 丁酸钠逆转H460/5-FU肺癌细胞耐药性的研究
- 2012年
- 肺癌耐药是化疗成功的主要障碍,因此肺癌细胞的耐药逆转研究具重要意义。实验通过流式细胞术检测到对5-氟脲嘧啶(5-Fluorouracil,5-FU)耐受的细胞系H460/5-FU中的SP细胞含量较亲本细胞H460明显升高,经丁酸钠诱导分化后,H460/5-FU对5-FU的敏感性增加,表现为细胞存活率降低,细胞凋亡率提高,而且这种改变随着丁酸钠浓度的增加而增强。结果提示丁酸钠具备逆转肺癌耐药细胞系H460/5-FU耐药的能力。
- 吴欣欣李晓艳武虎刘海燕陈侃
- 关键词:肺癌丁酸钠SP细胞耐药逆转