国家自然科学基金(31260222)
- 作品数：6 被引量：8H指数：1
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- 相关机构：新疆农业大学新疆畜牧科学院更多>>
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- 相关领域：农业科学更多>>
- 牛乳源金黄色葡萄球菌EsxA蛋白的表达及免疫原性分析被引量：6
- 2018年
- 为分析牛乳源金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)EsxA蛋白的免疫原性,构建EsxA-p ET-28a重组表达质粒,重组质粒经诱导表达后进行SDS-PAGE和Western blotting鉴定。用纯化后重组EsxA蛋白免疫小鼠,用间接ELISA检测免疫小鼠血清中的IgG、IgG1和IgG2a水平;免疫小鼠经S.aureus菌株攻击后,检测小鼠肝、脾、肾组织荷菌数和免疫保护率,观察S.aureus菌株攻击后小鼠肝、脾、肾病理组织学变化。结果表明,成功诱导表达了EsxA重组蛋白,该重组蛋白免疫小鼠后血清抗体效价可达1∶900,与对照相比,重组蛋白免疫后可减少小鼠肝、脾、肾组织的荷菌数,减轻这些脏器的病理损伤,对免疫小鼠保护率达75%。上述结果表明,该重组Esx A蛋白具有良好的免疫原性。
- 易鸳鸯赵亚南马鹏睿李斌苏艳
- 关键词：原核表达免疫原性
- 黏附素ClfA、EfB及FnBPA的抗体对金黄色葡萄球菌黏附牛乳腺上皮细胞的抑制及分泌蛋白EsxA的小鼠免疫效果研究
- 金黄色葡萄球菌(Staphylococcusaureus,S.aureus)引起的奶牛乳房炎是牛场发病最频繁的传染病之一，防治最为困难且易复发，给奶牛养殖业造成巨额损失，还对人类的健康存在巨大威胁。黏附素分子ClfA、E...
- 马鹏睿
- 关键词：金黄色葡萄球菌乳腺上皮细胞
- 文献传递
- 北疆地区部分牛场牛源MRSA耐药性及分子遗传分析
- 金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus，S.aureus)是导致奶牛乳房炎最常见也是最主要的病原菌。近几年耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicilin-resistant Staphylococcu...
- 李善春
- 关键词：金黄色葡萄球菌耐药性检测耐药性分子遗传
- 金黄色葡萄球菌与停乳链球菌二联灭活疫苗免疫对牛奶中体细胞数及乳成分的影响被引量：1
- 2018年
- 为探索金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)和停乳链球菌(Streptococcus dysgalactiae)二联灭活疫苗免疫与奶牛隐性乳房炎阳性率、体细胞数、乳成分之间的关系,本研究对泌乳期荷斯坦奶牛在接种该二联灭活菌苗后,检测其免疫后120d内隐性乳房炎阳性率、牛奶中体细胞数及乳成分的变化。结果表明,首次免疫后第30天,二联灭活菌苗免疫组体细胞数、乳脂含量和乳蛋白含量与对照组相比差异显著(P <0.05),首次免疫后第60天,二联灭活菌苗免疫组同对照组相比,隐性乳房炎阳性率显著下降(P <0.05);首次免疫后第90天,免疫组乳糖含量与对照组相比差异显著(P <0.05)。该二联灭活疫苗免疫可降低奶牛隐性乳房炎的阳性率,有效降低牛乳中体细胞数,显著提高乳蛋白含量、乳脂率、乳糖含量,对牛乳质量有显著的改善。
- 马晓慧王浩周婷婷冯凯苏艳
- 关键词：隐性乳腺炎乳成分
- 金黄色葡萄球菌黏附素ClfA等抗体抑制该菌黏附牛乳腺上皮细胞效果的比较
- 2018年
- 【目的】为从免疫的角度比较和分析黏附素分子细胞外纤维蛋白原结合蛋白(Extracellular fibrinogen-binding protein,EfB)和纤维连接蛋白结合蛋A(Fibronection binding protein,FnBP)对聚集因子A(Clumping factor A,ClfA)抑制牛源金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,SA)黏附牛乳腺原代上皮细胞作用的增强效果。【方法】本试验分离培养牛乳腺上皮细胞并鉴定;将真核重组质粒EfB和FnBPA分别与ClfA组合免疫新西兰大白兔,并利用免疫后抗体体外抑制2株SA分离株侵染牛乳腺上皮细胞,采用平板计数法定量检测与比较不同免疫组合诱导抗体对黏附的抑制作用;对SA和乳腺上皮细胞分别进行荧光染色,观察不同免疫组合诱导的抗体对黏附抑制效果的差异。【结果】成功分离培养了牛乳腺原代上皮细胞;证明了构建的ClfA、FnBPA和EfB真核重组表达质粒均可在细胞中表达,且在免疫实验兔后可诱导特异性抗体的产生;细菌平板计数和荧光染色观察的结果表明,黏附素分子单独和组合免疫的抗体对该菌不同菌株(GY278和GY309)的黏附抑制能力不同,ClfA抗体的黏附抑制能力最强,FnBPA分子A区的黏附抑制能力优于D区。FnBPA、EfB分别与ClfA联合免疫抗体对黏附的抑制程度高于黏附素分子单独免疫组,FnBPA分子A区对ClfA黏附抑制的增强作用优于D区,FnBPA-A区与Efb相比对ClfA的黏附抑制增强差异不显著。【结论】FnBPA-A、FnBPA-D和EfB分别与ClfA联合免疫可不同程度地影响ClfA的黏附抑制效果,该结果为以黏附素分子为靶点的牛乳腺炎疫苗的研究提供了实验数据。
- 马鹏睿王彩蝶张宝江苏艳
- 关键词：金黄色葡萄球菌抗体牛乳腺上皮细胞
- 牛源金黄色葡萄球菌不同遗传多态性FnBPA-A重组质粒的免疫生物学活性分析
- 2016年
- 为了解FnBPA-A分子遗传多态性重组质粒免疫后细胞免疫与体液免疫特点,以新疆不同地区分离的牛源金黄色葡萄球菌FnBPA-A真核重组质粒免疫小鼠,检测免疫后抗血清对不同金黄色葡萄球菌的识别能力,免疫小鼠脾脏淋巴细胞增殖能力,免疫血清中细胞因子IFN-γ与IL-4水平。结果表明,各免疫组抗血清对GY309菌株的识别能力较其他菌株弱。重组质粒pV-20-2、pV-801、pV-819、pV-856与pV-288刺激小鼠淋巴细胞增殖的能力及诱导IFN-γ水平明显高于其他各组。FnBPA-A分子的遗传多态性可以影响免疫小鼠免疫后抗体对菌体的识别及细胞免疫水平。
- 王彩蝶苏艳马鹏睿
- 关键词：金黄色葡萄球菌遗传多态性体液免疫
- FnBPA-A遗传多态性对牛源金黄色葡萄球菌与牛乳腺上皮细胞相互作用的影响被引量：1
- 2016年
- 为研究FnBPA-A不同遗传多态性重组质粒抗血清对牛源金黄色葡萄球菌与牛原代乳腺上皮细胞粘附作用的影响。采集奶牛乳腺组织样品,用组织块种植法和胰酶消化法进行纯化和传代培养,并利用对乳腺上皮细胞特异性角蛋白18进行鉴定。将4株不同金黄色葡萄球菌分离株作用于纯化的乳腺上皮细胞,分析不同菌株粘附牛乳腺上皮细胞的能力。进而比较研究FnBPA-A不同遗传多态性重组质粒免疫后的抗血清对4株不同金黄色葡萄球菌分离株与牛乳腺上皮细胞粘附的抑制作用。结果表明,分离纯化获得了牛原代乳腺上皮细胞,分析了该乳腺上皮细胞的培养特性,不同金黄色葡萄球菌分离株对该细胞粘附的检测结果表明,4株不同分离株粘附牛乳腺上皮细胞的能力明显不同(P<0.05),其中GY278菌株粘附乳腺细胞的能力最强。FnBPA-A不同遗传多态重组质粒免疫后的抗血清抑制不同菌株粘附牛乳腺上皮细胞的能力也表现出明显的差异性,pV-819、pV-309、pV-20-2免疫组的抗血清对4株牛源金黄色葡萄球菌分离株的抑制作用高于其他免疫组。
- 王彩蝶苏艳王世民韦海娜苏玲玲
- 关键词：金黄色葡萄球菌牛乳腺上皮细胞粘附
- 牛源金黄色葡萄球菌FnBPA-A分子不同遗传多态性重组质粒的免疫生物学特性的比较
- 2016年
- 【目的】为了解Fn BPA-A分子遗传多态性对新疆部分地区牛源金黄色葡萄球菌免疫生物学特性的影响。【方法】对采自新疆不同地区的牛源金黄色葡萄球菌Fn BPA-A氨基酸序列进行分析,构建了Fn BPA-A 8个不同遗传多态性的真核重组质粒,分别免疫C57BL/6小鼠,收集免疫后的抗血清。对不同重组质粒免疫小鼠后免疫保护力进行比较分析。【结果】进化树显示GS801、GS819、GS856属于同一分支,GW10-1、GW20-2、GY288、GY309为同一分支,GY278为一分支。免疫小鼠并进行攻击保护检测,GW20-2、GS801、GS819、GS856与GY288免疫组对小鼠的免疫保护率较高,GY278免疫组免疫保护率最低。【结论】Fn BPA-A分子的遗传多态性可以影响免疫小鼠的免疫水平和攻毒保护力。
- 王彩蝶苏艳苏玲玲韦海娜张宝江
- 关键词：金黄色葡萄球菌遗传多态性
