广东省科技计划工业攻关项目(2008B011000005)
- 作品数：3 被引量：7H指数：1
- 相关作者：林俊芳郭丽琼庞漫宇黄循柳黄仕杰更多>>
- 相关机构：华南农业大学更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目国家自然科学基金更多>>
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- 棘孢木霉木聚糖酶Ⅱ结构基因和上游调控区的克隆及分析
- 2011年
- 作者克隆及分析了棘孢木霉木聚糖酶Ⅱ结构基因和上游调控区,并获得了内源启动子。根据木霉属木聚糖酶Ⅱ结构基因及上游调控区的保守性,以棘孢木霉基因组DNA为模板,进行简并PCR扩增,产物纯化并克隆至T载体,经酶切鉴定后进行序列分析。扩增获得片段长1 875 bp,由795 bp的木聚糖酶II结构基因和1 080 bp的上游调控区组成。结构基因编码223个氨基酸,具有糖基水解酶第11家族的典型保守区域。上游调控区具备核心启动子和转录起始点,有CAAT-Box,TATA-Box等启动子特征元件,分析其还有CreI,AreA,XlnR,Ace1,AlcR等转录因子结合位点。综上表明,克隆的1 080 bp上游调控区是典型的丝状真菌基因启动子,可作为内源启动子用于构建棘孢木霉高效外源基因表达系统。
- 庞漫宇郭丽琼林俊芳
- 关键词：基因克隆启动子
- 宏基因组漆酶基因片段的克隆与分析被引量：7
- 2009年
- 黄循柳黄仕杰郭丽琼林俊芳
- 关键词：宏基因组DNA提取方法
- 棘孢木霉木聚糖酶Ⅰ基因和启动子克隆与分析
- 2010年
- 目的:克隆及分析棘孢木霉木聚糖酶Ⅰ结构基因和上游调控区,以获得内源启动子。方法:根据木霉属木聚糖酶Ⅰ结构基因及上游调控区的保守性,以棘孢木霉基因组DNA为模板,进行简并PCR扩增。产物纯化并克隆至T载体,经酶切鉴定后进行序列分析。结果:扩增获得1.2 kb的片段,酶切鉴定及序列分析表明,该片段长1 265 bp,由753 bp的木聚糖酶Ⅰ结构基因和512 bp的上游调控区组成。结构基因编码230个氨基酸,具有糖基水解酶第11家族的典型保守区域。上游调控区具备核心启动子和转录起始点,有CAAT-Box、TATA-Box等启动子特征元件,分析其还有CreⅠ、XlnR、Ace1、AreA等多个转录因子结合位点。结论:克隆的512 bp上游调控区是典型的丝状真菌基因启动子,可作为内源启动子用于构建棘孢木霉高效外源基因表达系统。
- 庞漫宇郭丽琼项凡林俊芳
- 关键词：基因克隆启动子
