安徽省自然科学基金(090413118)
- 作品数：8 被引量：34H指数：5
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- miR-24和miR-22在胃癌中的表达及其临床意义被引量：8
- 2013年
- 目的探讨miR-24和miR-22在胃癌细胞与组织中的表达及其与胃癌临床病理特征之间的关系。方法应用实时荧光定量PCR(qPCR)检测miR-24和miR-22在人正常胃黏膜细胞株(GES-1)、4株人胃癌细胞株以及胃癌组织和相应的癌旁胃黏膜组织中的表达,分析miR-24和miR-22在胃癌中的表达及其与胃癌临床病理特征之间的关系。结果与GES-1比较,miR-24在人胃癌细胞株SGC-7901和BGC-823中表达明显升高(P=0.003、P=0.007),而在MGC-803和AGS中表达差异无统计学意义(P=0.304、P=0.120);与GES-1比较,miR-22在SGC-7901中表达明显升高(P=0.000),在MGC-803中表达显著降低(P=0.000),而在AGS和BGC-823中表达差异无统计学意义(P=0.151、P=0.307);胃癌组织中miR-24的表达明显高于其相应的癌旁胃黏膜组织(P=0.005);miR-22在胃癌组织及其相应的癌旁胃黏膜组织中的表达差异无统计学意义(P=0.501);胃癌组织中除miR-24的表达与性别具有显著相关性外(P=0.029),miR-24、miR-22与其他临床病理特征,如年龄、肿块大小、浸润深度、分化程度、Borrmann分型以及淋巴结转移、TNM分期等均无明显相关性。结论 miR-24在人胃癌细胞株SGC-7901和BGC-803以及胃癌组织中表达是上调的,可能在胃癌的发生发展中发挥重要作用。
- 陈宗科秦蓉储婧王娜娜
- 关键词：胃肿瘤实时荧光定量PCR
- CDX2基因高表达对胃癌细胞生物学行为的影响
- 2013年
- 目的探讨尾侧型同源转录因子-2(CDX2)基因过表达对胃癌BGC-823细胞增殖、迁移、凋亡等生物学特征的影响。方法采用脂质体转染法建立CDX2基因过表达的胃癌BGC-823稳定细胞株,分别采用RT-PCR、Western blotting和免疫细胞化学等方法检测转染重组表达载体pEGFP-C1/CDX2后,BGC-823细胞中CDX2基因及其蛋白的表达。MTT法检测CDX2基因过表达对细胞的增殖能力的影响;划痕实验检测CDX2过表达对细胞迁移能力的影响;流式细胞术检测CDX2过表达对细胞的凋亡的影响;应用基因芯片技术检测转染前后相关基因的差异表达。结果 RT-PCR及Western blotting检测结果显示,与对照组相比,转染pEGFP-C1/CDX2后,BGC-823细胞中CDX2基因和蛋白均呈高表达;CDX2过表达能明显降低转然组BGC-823细胞增殖能力和迁移能力;但对细胞凋亡影响不明显;基因芯片结果提示CDX2基因高表达能影响某些基因的表达。结论 CDX2过表达能明显抑制胃癌细胞增殖、降低迁移能力,提示CDX2在胃癌中可能发挥抑癌基因的作用。
- 秦蓉储婧陈宗科陈晓双王娜娜
- 关键词：胃肿瘤基因转染
- IgA肾病组织中巨噬细胞浸润与肾间质纤维化、EMT的关系及临床意义被引量：5
- 2015年
- 目的探讨IgA肾病组织中巨噬细胞与肾小管间质纤维化(Tubulointerstitial fibrosis,TIF)及上皮细胞间充质转化(Epithelial-Mesenchymal Transition,EMT)的关系及其临床意义。方法采用HE、PAS、PASM、Masson染色评估56例IgA肾病肾穿刺组织肾小管间质病理变化,根据肾小管萎缩及间质纤维化程度分为轻度、中度、重度三组,另设对照组5例,来自正常肾脏组织。采用免疫组织化学方法检测CD68、CD206及EMT相关蛋白TGF-β1、Vimentin、SMA、E-Cadherin的水平,并收集患者详细临床资料。结果 CD68、CD206蛋白在TIF重度组中的水平高于中度组,在TIF中度组中的水平高于TIF轻度组;CD68阳性巨噬细胞、CD206阳性巨噬细胞计数与TGF-β1、Vimentin及SMA蛋白的水平正相关;与E-Cadherin蛋白的水平呈负相关;与肾功能指标血肌酐、尿素氮及尿蛋白呈正相关。TGF-β1、Vimentin及SMA的水平与肾小管间质纤维化程度及肾功能指标血肌酐、尿素氮及尿蛋白正相关;E-Cadherin蛋白的表达与肾小管间质纤维化程度及肾功能指标血肌酐、尿素氮及尿蛋白呈负相关。结论巨噬细胞可能参与了IgA肾病的肾小管间质损伤,尤其是TGF-β1诱导的肾小管EMT过程。
- 高慧敏王弦李静秦蓉
- 关键词：巨噬细胞IGA肾病EMTCD68
- 应用基因芯片技术筛选转染CDX2基因后胃癌细胞差异表达基因被引量：1
- 2014年
- 目的观察转染CDX2基因后人胃癌细胞系BGC-823基因表达谱的变化。方法通过脂质体介导法转染pEGFP-C1-CDX2和空载体pEGFP-C1至人胃癌细胞系BGC-823中,经G418筛选后获得稳定转染细胞,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测CDX2基因的表达。应用人类表达谱芯片Affymetrix 2.0对两组细胞同时进行基因芯片分析,筛选出差异表达基因(以表达差异≥2.0或≤0.5倍为限),选择部分差异表达基因进行实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(Real-time PCR)验证。结果基因芯片筛选出CDX2转染人胃癌细胞BGC-823差异表达基因599个,其中上调基因275个,下调基因324个,这些基因主要涉及细胞增殖、分化、凋亡、信号转导、蛋白酶活性、肿瘤侵袭和转移等方面;Real-time PCR检测部分差异表达基因DKK3、FOXP1、TWIST1、GATA6、RUNX3和BMP2,其结果与芯片结果一致,确定芯片结果可靠。结论应用人类表达谱芯片成功筛选出CDX2转染人胃癌细胞BGC-823后差异表达基因,为深入探讨CDX2在胃癌中的作用机制提供线索。
- 陈晓双秦蓉储婧陈宗科
- 关键词：基因芯片实时荧光定量PCR
- 过表达CDX2对胃癌细胞生物学行为影响的初步研究
- 2012年
- 目的构建人同源基因CDX2真核表达载体,转染人胃癌细胞BGC-823,研究过表达CDX2基因对胃癌细胞生物学行为的影响。方法从pcD-NA4/TO/Myc-HisA-CDX2载体质粒中扩增目的基因CDX2,克隆至pEGFP-C1中,得到pEGFP-C1-CDX2;脂质体介导法瞬时转染pEGFP-C1和pEGFP-C1-CDX2至人胃癌细胞BGC-823中,G418筛选出阳性克隆后扩大培养,RT-PCR和Western blot技术检测各组胃癌细胞中CDX2基因mRNA和蛋白的表达情况,将挑选出的稳定株命名为BGC-823/CDX2细胞;流式细胞仪检测BGC-823细胞(未转染组)、BGC-823/EV细胞(空载体组)和BGC-823/CDX2(转染组)细胞的凋亡情况,MTT法观测各组细胞的增殖情况,细胞划痕试验检测各组细胞迁移能力,透射电镜观察转染细胞形态学的改变。结果①成功构建真核表达载体pEGFP-C1-CDX2;②成功筛选出稳定过表达CDX2基因的BGC-823胃癌细胞,即BGC-823/CDX2细胞;③与BGC-823细胞和BGC-823/EV细胞比较,BGC-823/CDX2细胞中CDX2基因mRNA和蛋白表达明显上调;④与BGC-823细胞和BGC-823/EV细胞比较,BGC-823/CDX2组细胞在转染72 h后出现了明显的生长抑制;⑤划痕实验显示:与BGC-823细胞和BGC-823/EV细胞比较,BGC-823/CDX2组细胞的迁移能力降低;⑥与BGC-823细胞和BGC-823/EV细胞比较,BGC-823/CDX2组细胞凋亡率并无明显增加。⑦电镜结果显示:与BGC-823组细胞相比,BGC-823/CDX2组细胞死亡较多,部分细胞可见核膜皱缩、染色质边集等早期凋亡现象。结论成功构建了稳定过表达CDX2基因的胃癌细胞株,而且CDX2过表达明显抑制胃癌细胞增殖,降低迁移能力,提示CDX2在胃癌中可能发挥抑癌基因的作用。
- 储婧秦蓉
- 关键词：胃癌细胞转染CDX2
- HSP90α、HSP90β在人胃癌组织中的表达被引量：7
- 2014年
- 目的探讨HSP90α、HSP90β蛋白与mRNA在人胃癌组织中的表达及其与胃癌生物学行为的关系。方法采用免疫组化SP法检测两者蛋白在胃癌组织及癌旁正常组织的表达。采用RT-PCR法检测两者的mRNA在胃癌组织及癌旁正常组织的表达。结果 HSP90α、HSP90β主要定位于细胞质,其阳性率分别为82.9%和80.0%(P<0.01),与胃癌分化、浸润、分期、转移相关。HSP90α、HSP90βmRNA在胃癌中的表达明显高于癌旁正常组织(P<0.01),并与胃癌的分化、分期、淋巴结的转移相关。结论 HSP90α、HSP90β蛋白在胃癌组织中的阳性表达以及其与胃癌生物学行为的关系提示HSP90α、HSP90β可能作为判断胃癌恶性程度的重要指标。HSP90α、HSP90βmRNA的高表达,且两者均与胃癌的发生、发展关系密切,可能与胃癌组织中的转录调控相关。
- 吴梦婕张红姚元春秦蓉
- 关键词：HSP90Α免疫组织化学逆转录聚合酶链式反应胃肿瘤
- 胃癌及癌旁组织中CDX2和claudin-3的表达及其意义被引量：6
- 2011年
- 目的探讨CDX2和claudin-3在胃癌及癌旁组织中的表达及其与临床病理因素之间的关系。方法采用免疫组化SP法检测CDX2和claudin-3在67例胃癌及32例癌旁组织中的表达。结果 (1)CDX2在癌旁"正常"组织中不表达,癌旁肠化上皮的阳性率(87.5%)明显高于胃癌组织(44.8%,P<0.001)。CDX2在Lauren分型肠型胃癌中的阳性率(62.9%)明显高于弥漫型胃癌(25.0%,P<0.05);CDX2表达与胃癌分化程度呈正相关(P<0.05),而与淋巴结转移和TNM分期呈负相关(P<0.05)。claudin-3在胃癌组织中的阳性率(77.6%)明显高于癌旁"正常"组织(36.7%,P<0.001),胃癌中claudin-3仅与淋巴结转移呈正相关(P<0.05)。(2)5年生存分析显示:CDX2阳性组胃癌5年生存率(76.7%)明显高于阴性组(43.2%,P=0.01)。claudin-3与胃癌患者5年生存率无明显相关性(P>0.05)。根据CDX2和claudin-3在胃癌中联合表达结果进行生存分析,结果显示CDX2+/claudin-3-的胃癌患者,5年生存率最高(P=0.004)。多因素回归分析表明仅CDX2的表达(P=0.006)是影响胃癌预后的独立因素。(3)癌旁肠化黏膜及肠型胃癌中CDX2与claudin-3的表达均呈正相关(r=0.486,P=0.005;r=0.426,P=0.011)。结论胃癌组织中CDX2表达下调及claudin-3表达上调可能在胃癌的发生、发展中起重要作用,CDX2可作为胃癌诊断、胃癌的恶性程度及患者预后评估的有用指标。CDX2可能在肠化胃黏膜及肠型胃癌中调控clau-din-3的表达。
- 储婧秦蓉王娜娜王弦陈满丽张晖年建泽
- 关键词：胃肿瘤CDX2CLAUDIN-3免疫组织化学
- CD44v6和FOXD3在人胃癌组织中的表达及临床意义被引量：7
- 2015年
- 目的研究CD44v6和FOXD3蛋白在人胃癌组织中的表达及其与胃癌生物学行为的关系。方法采用免疫组化Envision二步法检测两种蛋白在100例人胃癌组织及40例癌旁正常胃黏膜组织和110例人胃癌组织芯片中的表达。结果传统病理切片中CD44v6蛋白在胃癌组织和癌旁正常胃黏膜组织的阳性表达率分别为88%、22.5%(P<0.001),与胃癌浸润深度、淋巴结转移、临床分期相关(P<0.001)。FOXD3蛋白在胃癌组织和癌旁正常胃黏膜组织的阳性表达率分别为22%、90%(P<0.001),与胃癌浸润深度、淋巴结转移、临床分期相关(P<0.001)。CD44v6与FOXD3表达呈显著负相关性(rs=-0.276,P<0.01)。CD44v6和FOXD3在110例胃癌组织芯片中的表达结果与以上传统切片中的表达情况相似。结论 FOXD3作为干细胞因子,其与胃癌生物学行为的关系以及与CD44v6的相关性提示FOXD3可能作为胃癌干细胞标记物。
- 陈勇张红吴梦婕姚元春杨春香秦蓉
- 关键词：CD44V6胃癌干细胞免疫组织化学组织芯片
