国家自然科学基金(30471190)
- 作品数：4 被引量：11H指数：3
- 相关作者：朱利泉王小佳宋明牛义高启国更多>>
- 相关机构：西南大学中国农业科学院农产品加工研究所更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金重庆市自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 大豆耐热β-淀粉酶基因在大肠杆菌中的表达被引量：3
- 2006年
- 以含耐热β-淀粉酶的大豆品种中黄20为材料,从未成熟大豆子叶组织中提取总RNA,利用RT-PCR扩增出预计大小的cDNA片段。将该片段克隆至pGEM-T载体,经酶切分析和测序,克隆的β-淀粉酶的基因的cDNA片段长1 491 bp,与已报道序列只存在个别的碱基差异,同源性达到99％,编码497个氨基酸残基的多肽,预计相对分子质量56 KD。酶切片段与经相同酶酶切的表达载体pET-43．1(a)连接,转入大肠杆菌中,并使其高效表达。SDS-PAGE表明,大肠杆菌表达的大豆β-淀粉酶的相对分子质量约为50 KD。
- 夏巧玉江均平朱利泉王小佳
- 关键词：耐热大豆Β-淀粉酶CDNA克隆
- 甘蓝自交不亲和细胞信号转导的功能基因研究进展
- 2006年
- 自交不亲和性是开花植物防止近亲繁殖而广泛存在的一种遗传屏障,在育种工作中意义重大,它在遗传上受一个带有复等位基因的多态性S基因座所控制。本文综述了近年来在甘蓝自交不亲和信号转导途径中相关功能基因的研究进展。SRK基因和SP11/SCR基因是控制甘蓝自交不亲和性的两个关键因子。SRK基因是雌蕊柱头中自交不亲和反应的专一决定因子,编码SP11/SCR基因的蛋白在花药壁和花粉中特异表达。编码SLG基因的蛋白在自交不亲和反应中起增强SRK活性的作用。另外也对信号传导途径中下游蛋白质的作用模式作了展望。
- 牛义王志敏汤青林宋明朱利泉王小佳
- 关键词：甘蓝自交不亲和性信号转导功能基因
- 甘蓝自交不亲和信号传导中THL1和SRK相互作用的体外检测被引量：5
- 2008年
- 在甘蓝自交不亲和信号传导中SRK和THL1之间可能存在相互作用。为进一步证实该相互作用,以甘蓝E1为材料,采用RT-PCR技术扩增了THL1和SRK激酶结构域(记为SRKE1)编码序列,构建了THL1原核表达质粒pET43.1-THL1,SRKE1原核表达质粒pET431-SRKE1和真核表达质粒pPIC9K-SRKE1,分别在宿主菌大肠杆菌BL21和毕赤酵母GS115中进行表达。THL1融合蛋白经胰岛素检测,表明表达的THL1有氧化还原活性。建立了体外检测蛋白质相互作用的新方法,并用该方法对THL1与SRKE1的相互作用进行了检测,结果表明THL1可与SRKE1相互作用并形成稳定的复合体,这为深入分析THL1与SRK相互作用机理提供了理论和技术基础。
- 高启国宋明牛义杨昆朱利泉王小佳
- 甘蓝自交不亲和信号传导元件ARC1的体外表达及其与SRK相互作用验证被引量：3
- 2009年
- 在甘蓝自交不亲和信号传导中ARC1和上游因子SRK之间可能存在相互作用。为进一步证实该相互作用,以甘蓝E1为材料,采用RT-PCR技术扩增ARC1的编码序列,构建ARC1原核表达质粒pET43.1a-ARC1,转化宿主菌大肠杆菌BL21,通过SDS-PAGE检测该蛋白的表达。利用免疫共沉淀原理及pET43.1a-ARC1融合蛋白序列中的6×His标签与Ni+结合的特点建立了体外检测蛋白质相互作用的新方法,并用该方法对ARC1与SRK的相互作用进行了检测。结果表明,在体外ARC1能与SRK相互作用并形成复合体,这为深入分析ARC1与SRK相互作用机理以及探讨ARC1与下游传导元件的相互作用提供了理论和技术基础。
- 牛义王志敏高启国宋明王小佳朱利泉
- 关键词：甘蓝信号传导
