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基于微孔板的高通量筛选6-羟基烟酸转化菌方法的建立被引量：4: 2008年; 建立了一种基于96孔板-酶标仪的双波长紫外分光光度法高通量筛选6-羟基烟酸转化菌的方法。实验以251nm为测定波长、231nm为参比波长测定转化样品的6-羟基烟酸含量,6-羟基烟酸与ΔA251-231在0.5～11μg/mL浓度范围内有良好的线性关系,服从朗伯-比尔定律,平均回收率为99.11%～100.81%。利用96孔板-酶标仪,每天筛选量可达到2000～5000个反应,达到高通量筛选要求。; 杨瑶袁生戴亦军尚广东; 关键词：微孔板高通量筛选烟酸 6-羟基烟酸

嗜麦芽寡养单胞菌菌株间羟基化烟碱类杀虫剂吡虫啉的机制差异被引量：2: 2008年; 嗜麦芽寡养单胞菌Stenotropho monas maltophilia CGMCC1.1788,R551-3和K279a菌株均具有羟基化烟碱类杀虫剂吡虫啉IMI的能力,其中CGMCC1.1788菌株的羟基化能力明显高于其他两个菌株.细胞色素P450酶抑制剂胡椒基丁醚抑制CGMCC1.1788菌株的IMI羟基化活性,但不抑制R551-3和K279a菌株的IMI羟基化活性;黄素单加氧酶抑制剂甲硫咪唑均抑制3个菌株的IMI羟基化活性.上述结果表明在S.maltophila CGMCC1.1788中存在细胞色素P450和黄素单加氧酶催化的两种IMI羟基化机制.R551-3和K279a蛋白组比较分析表明,K279a菌株中没有细胞色素P450酶,其催化的IMI羟基化只有黄素单加氧酶参与.由此可见,不同S.malto-philia菌株中具有不同的IMI羟基化机制.该研究对于了解IMI的羟基化机制有一定的理论意义.; 杨顺瑛姬微微戴亦军袁生; 关键词：嗜麦芽寡养单胞菌细胞色素P450酶吡虫啉羟基化

睾酮丛毛单胞菌JA1菌株羟基化烟酸产生6-羟基烟酸的发酵产酶条件研究被引量：1: 2007年; 睾酮丛毛单胞菌Comamonas testosteroni JA1是一株具有氰基吡啶羟基化酶活性的菌株,研究表明它还具有很高的烟酸羟基化酶的活性,是未报道过的具有烟酸羟基化酶活性的新菌种。该菌最适生长和产酶的碳源为1%葡萄糖、氮源为1%蛋白胨、诱导物为1%烟酸,此外,它的发酵条件优越,在温度25~37℃、初始pH6.5~7.0、装液量(100mL锥形瓶)10mL^40mL范围内,产酶能力均保持很高水平,很具有工业化生产应用的前景。; 杨瑶袁生戴亦军; 关键词：烟酸 6-羟基烟酸羟基化生物转化

烟酸羟基化菌株睾酮丛毛单胞菌JA1抗性质粒的消除被引量：1: 2007年; 睾酮丛毛单胞菌JA1可羟基化烟酸产生6-羟基烟酸,并且对多种抗生素具有抗性.碱变性法提取JA1细胞内的质粒,检测到一个约19 kb大小的质粒.用0.002 5%SDS进行质粒消除实验,结果表明,质粒消除后菌株对卡那霉素敏感,但仍对氨苄青霉素、安普霉素和链霉素具有抗性,推测质粒携带卡那霉素的抗性基因.同时,质粒消除后,JA1菌株烟酸脱氢酶酶活性没有变化,推测烟酸脱氢酶的基因并不在质粒上.; 杨瑶袁生尚广东戴亦军; 关键词：质粒消除抗生素抗性

嗜麦芽寡养单胞菌(Stenotrophomonas maltophilia)R551．3四环素抗性消除的研究: 2010年; 嗜麦芽寡养单胞菌可共代谢降解烟碱类农药吡虫啉,并且对多种抗生素具有抗性.本文通过电穿孔法消除了该菌的四环素抗性,获得了四环素敏感型菌株R551-3Tcr-,可以用作遗传转化系统的受体菌,能被转化吸收遗传载体质粒pJB866H::ndhSL,构成一对很好的嗜麦芽寡养单胞菌遗传转化系统.同时HPLC结果表明所获得的四环素敏感型菌株羟基化吡虫啉的活性并未发生改变,为进一步开展敲除和回补共代谢途径关键酶的研究工作奠定了基础.; 马鹏娟刘中华戴亦军袁生; 关键词：嗜麦芽寡养单胞菌吡虫啉电穿孔四环素

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江苏省高校自然科学研究项目(06KJA21016)