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旋毛虫感染小鼠后TNF-α诱导肺细胞凋亡的观察被引量：1: 2013年; 为探究TNF-α在旋毛虫致小鼠肺损伤发生过程中的致病作用及信号传导途径,应用半定量RT-PCR法检测感染前、后不同时期小鼠肺组织中TNF-α及细胞凋亡与抗凋亡基因mRNA的表达量,并应用TUNEL法对肺细胞凋亡形态进行观察。结果显示,旋毛虫感染后第4天,TNF-αmRNA的相对表达量由感染前的0.74上升到1.19,肺细胞凋亡增加,凋亡指数为2.57%;第14天出现峰值1.33,此时凋亡指数为21.42%,肺细胞凋亡明显(P<0.05),35d后表达量逐渐下降至1.11,此时凋亡指数为14.74%。TNFR1、FADD、Caspase8、Caspase3、TRAF2、RIP和NF-κB的相对表达量与TNF-α变化趋势相似。结果表明,TNF-α诱导肺细胞凋亡严重程度与旋毛虫生活史的不同阶段相关。; 李兴超李巍徐佳刘畅俞昭阳李晓云宋铭忻张唯哲; 关键词：旋毛虫 TNF-Α 肺损伤

弓形虫组织蛋白酶B缺失株构建及部分生物学特性研究: 本研究以基因敲除技术为基础,来研究TgCPB基因的部分生物学特性.利用PCR扩增技术,从弓形虫基因组上扩增TgCPB基因5'非编码区(CPB5'-UTR/1709bp)和3'非编码区(CPB3&#...; 宋铭忻路义鑫韩彩霞李巍李晓云孙洪超

旋毛虫感染小鼠后TNF-α诱导心肌细胞凋亡的试验观察: 2012年; 为探讨旋毛虫致小鼠心肌损伤发生的主要致病因子及其信号传导途径,分别取感染前后不同时期小鼠心肌,应用半定量RT-PCR法检测心肌中炎性细胞因子TNF-α及细胞凋亡与抗凋亡基因mRNA表达量,并应用TUNEL法对心肌细胞凋亡形态进行了检测。结果显示,旋毛虫感染后第9天,TNF-αmRNA的相对表达量由感染前的0.02迅速增加到0.88,心肌细胞凋亡增加,凋亡指数为10.70%;TNF-α表达量约于感染后第19～24天达到峰值,此时凋亡指数达29.79%,细胞凋亡明显(P<0.05);第42天TNF-α表达量逐渐下降至0.29,细胞凋亡逐渐减少,凋亡指数降至10.46%。TNFR 1、FADD、Caspase 8和Caspase 3mRNA的相对表达量的变化趋势与TNF-α相似。; 韩彩霞路义鑫李晓云张子群赵风强宋铭忻; 关键词：旋毛虫 TNF-Α 细胞凋亡心肌损伤

旋毛虫28S rRNA基因片段的克隆及其在分类学上的应用被引量：1: 2011年; 为了探讨所采集旋毛虫的分类,利用PCR方法克隆了猪旋毛虫黑龙江隔离种核糖体28S rRNA序列的基因片段。序列分析结果表明,猪旋毛虫黑龙江隔离种与旋毛形线虫(Trichinella spiralis,T1)的进化关系较近,确定为旋毛形线虫(Trichinella spiralis)。结果与传统的分类结果基本一致,为传统的分类学方法提供了新的理论依据。; 李成魏颖袁金钱宋铭忻; 关键词：旋毛虫 RRNA 隔离种

旋毛虫ES抗原对DC2.4细胞TLR4、NF-κB和AP-1 mRNA表达的影响被引量：1: 2014年; 目的探讨旋毛虫ES抗原对小鼠DC2.4细胞TLR4、NF-κB和AP-1表达的影响。方法以实时荧光定量PCR(Real-time FQ-PCR)技术对空白对照组、LPS组、ES抗原组、ES抗原+LPS/ES抗原组和LPS+LPS/ES抗原组,检测TLR4、NF-κB和AP-1基因mRNA表达水平变化。结果 ES抗原和LPS单作用组的TLR4、NF-κB和AP-1mRNA相对表达量分别是6.14/4.09/3.63和4.68/4.71/4.11,是ES抗原和LPS预作用组的各基因相对表达量的2倍以上,差异有统计学意义(P<0.05)。结论实验证实,DC2.4细胞受ES抗原和LPS持续作用或者双重作用均可诱导小鼠DC2.4细胞TLR4、NF-κB和AP-1表达的降低,可能诱致DC2.4细胞免疫耐受。; 刘畅韩彩霞李巍李晓云路义鑫王泽唐颖宋铭忻; 关键词：转录因子实时荧光定量PCR

旋毛虫ES抗原及HSP70对树突状细胞免疫调节的研究: 目的探讨旋毛虫HSP70对小鼠DC2.4细胞TLR2、NF-κB和AP-1表达的影响.方法以实时荧光定量PCR(Real-time FQ-PCR)技术对空白对照组、Pam3csk4组、HSP70组、HSP70+ Pa...; 宋铭忻路义鑫韩彩霞李巍李晓云刘畅王泽

旋毛虫HSP70基因的原核表达及其免疫原性: 利用RT-PCR方法扩增旋毛虫HSP70基因,将其扩增产物克隆到pEASY-Blunt Simple载体中,经限制性酶切后与pET-28a(+)载体连接,进一步转化至感受态细胞Transetta(DE3)中,用IPTG诱...; 宋铭忻路义鑫韩彩霞李巍李晓云徐佳王泽

三株不同毒力单增李斯特菌第一毒力岛基因全序列的克隆及遗传变异分析被引量：4: 2013年; 为分析单增李斯特菌重要毒力因子的遗传进化关系,并进一步探讨不同毒力菌株重要毒力因子的分子差异,分段扩增、克隆了3株不同毒力及不同血清型菌株的第1毒力岛(LIPI-1)全基因序列,对3株菌LIPI-1的6个毒力基因分别测序并进行了序列和系统进化分析。对其中毒力差异明显的2株菌,在分析其毒力表型的基础上,对其进行了分子特征和遗传变异分析。结果表明各毒力基因同源性各异,6个毒力基因反映出的进化关系不一致。弱毒株N21与强毒株Lmo0586相比,具有相似的溶血活性以及更强的溶脂活性。2株菌的调控序列prfA无明显差异;2株菌hly序列中的PEST基序有1个氨基酸发生了变化;2株菌的actA序列差异最显著,强毒株Lmo0586比弱毒株N21少105个核苷酸,造成35个氨基酸的缺失,该序列位于ActA蛋白的脯氨酸重复区内。; 伊娜娜李巍张子群吕兴峰刘兵初纯明庞宇宋铭忻; 关键词：单增李斯特菌遗传变异分析

P49重组抗原检测旋毛虫抗体的间接ELISA方法建立被引量：6: 2011年; 以纯化的本地毛形线虫P49排泄分泌(ES)重组蛋白包被微量反应板,建立检测旋毛虫抗体的间接ELISA方法,并确定了最适反应参数:抗原包被浓度4μg/mL;血清稀释度1∶100,作用时间90min;酶标二抗稀释度1∶10 000,作用时间60min;最适封闭液为5g/L聚乙烯醇(PVA);最适稀释液为含20g/L PEG6000的PBS;底物最佳显色时间15min。ELISA体系评价结果表明,该方法重复性好,灵敏度高,且可用于不同种株旋毛虫感染的P49血清抗体检测。; 李晓云路义鑫韩彩霞朱江巍宋铭忻; 关键词：本地毛形线虫间接ELISA

感染旋毛虫小鼠心肌能量代谢变化的检测: 2014年; 本试验旨在对感染旋毛虫后小鼠心肌能量代谢变化进行研究。将小鼠接种旋毛虫1 000条/只后,分别检测小鼠心肌血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）、过氧化物酶体增殖物激活受体（PPARs）和小鼠组织胰岛素。结果显示,旋毛虫感染小鼠后,AngII、PPARα及胰岛素的含量检测结果均呈现相似趋势,至19~24 d出现峰值,随后下降。试验结果为旋毛虫病的早期诊断、治疗提供基础数据。; 许圆圆李巍韩彩霞路义鑫李兴超宋铭忻; 关键词：旋毛虫代谢

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