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低氧与牙周再生相关细胞被引量：1: 2014年; 牙周炎是成年人常见的口腔疾病之一，可导致牙周组织破坏、牙齿松动，最终导致牙齿丧失。氧是机体进行新陈代谢的关键物质，生理情况下在殆力作用下可使牙周膜的血供降低。炎症情况下可使牙周组织的血供进一步减少、局部缺氧，甚至可能引起有毒物质堆积，从而导致牙周防御能力以及修复功能下降，提高了牙周炎的患病率并减弱了牙周炎治疗的效果。; 董家辰束蓉宋忠臣; 关键词：牙周再生低氧细胞牙周组织牙齿松动口腔疾病

重组全长人釉原蛋白对人成纤维细胞黏附、增殖、迁移的影响被引量：5: 2013年; 目的：比较重组25kDa全长人釉原蛋白（recombinanthumanamelogenin，rhAm）和提取的猪釉基质蛋白（enamelmatrixproteins，EMPs）对人牙周膜成纤维细胞（humanperiodontalligamentfibroblasts．HPDLF）和人包皮成纤维细胞（foreskinfibroblasts，HFF）生物学特性的影响，初步探讨rhAm促进牙周组织再生的可能机制。方法：选择BL21／pET28a—His—SUMO—rhAm表达系统，在适宜的条件下，经诱导表达和酶切纯化．得到25kDa全长rhAm．采用SDS—PAGE和Western印迹鉴定，乙酸法提纯EMPs。体外培养HPDLF和HFF．采用不同浓度的rhAm和EMPs分别刺激HPDLF、HFF，观察并比较2种蛋白对细胞黏附、增殖和迁移能力的影响。采用SAS5．0软件包对数据进行统计学分析。结果：10—20μg／mLrhAm能显著促进人牙周膜成纤维细胞和人包皮成纤维细胞的黏附、增殖和迁移（P〈0．05），其作用效果与200μg／mLEMPs相似（P〉0．05）。结论：25kDarhAm和EMPs对成纤维细胞具有相似的生物学作用。rhAm和EMPs可通过增强牙周膜成纤维细胞的生物学活性．从而促进牙周组织再生。; 林智恺束蓉程岚宋忠臣郭秋曼张秀丽; 关键词：成纤维细胞增殖迁移

重组人釉原蛋白真核表达载体的构建及其在NIH3T3细胞中的稳定表达被引量：2: 2011年; 目的构建含人釉原蛋白(hAm)基因的重组真核表达质粒并转染哺乳动物细胞NIH3T3,建立稳定表达重组hAm的细胞株,为临床应用奠定基础。方法利用限制性内切酶EcoRⅠ和BamHⅠ将hAm基因插入真核表达载体pcDNA3.1/myc-His(-)A,构建含hAm基因的重组质粒pcDNA3.1/myc-His(-)A-hAm,双酶切和测序鉴定。通过LipofectamineTM2000介导重组质粒转染NIH3T3细胞,利用G418筛选出阳性克隆,建立稳定表达人釉原蛋白的细胞株,聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和Western blotting验证蛋白表达。结果重组质粒pcDNA3.1/myc-His(-)A-hAm经双酶切和测序鉴定证实插入序列准确无误。重组质粒转染NIH3T3细胞后建立的稳定转染细胞株经SDS-PAGE电泳及Western blotting检测显示有相对分子质量为28 000的hAm表达,与预测一致。结论成功构建含hAm基因的重组真核表达系统,并获得稳定表达重组hAm的细胞株NIH3T3-hAm细胞株。; 程岚束蓉张秀丽田聆; 关键词：真核表达载体转染

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国家自然科学基金(81070838)