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地鳖虫纤溶成分的分离纯化和活性测定被引量：19: 2006年; 本文通过硫酸铵分级分离、DEAE-纤维素柱和非变性PAGE制备电泳等方法从雌性地鳖虫EupolyphagesinensisW alker活体内分离纯化得到三种纤溶活性成分:EFF-1、EFF-2和EFF-3,分子量分别为41 kd、32.9 kd和30.6 kd,比活力分别为171.3 U/mgpr、234.0 U/mgpr和148.5 U/mgpr,其中EFF-2和EFF-3兼有纤溶酶激活物和纤溶酶活性。; 韩雅莉李张伟; 关键词：地鳖虫纤溶酶制备电泳

地鳖虫纤溶活性蛋白组分抑制血管的生成被引量：13: 2007年; 从地鳖虫(Eupolyphaga sinesisWalke)中分离纯化出纤溶活性蛋白组分———地鳖虫纤溶活性蛋白(Fibrinolyric protein ofEupolyphage sinesis,EFP),研究其对血管生成的抑制作用。以新鲜地鳖虫为原料,采用硫酸铵分段盐析,经DEAE-纤维素和SephadexG-75柱等方法分离纯化EFP,用不同浓度的EFP作用于人微血管内皮细胞(MVEC),用MTT法测定EFP对MVEC增殖的影响,用单细胞凝胶电泳和AnnexinV-FITC/PI双荧光染色观察细胞凋亡情况,采用流式细胞术检测EFP对MVEC细胞周期的影响,并采用鸡胚绒毛尿囊膜的新生血管模拟肿瘤的新生血管,检测EFP对鸡胚尿囊膜(CAM)血管生成的作用。结果表明:1)MTT法测得EFP可抑制MVEC细胞增殖,增殖抑制率达46%;2)EFP可诱导MVEC细胞凋亡,且成剂量依赖关系,用单细胞凝胶电泳法检测细胞凋亡,随着EFP浓度的增大,拖尾细胞增多;用AnnexinV-FITC/PI进行双荧光染色发现,当EFP处理浓度达2μg/ml时,出现了大量凋亡晚期细胞;3)EFP可干扰MVEC的细胞周期,出现S期和G2/M期阻滞;4)用鸡胚尿囊膜实验观察到EFP剂量为0.06mg/egg即可抑制鸡胚尿囊膜血管生成,最高抑制率可达35.8%。提示地鳖虫纤溶活性蛋白组分具有抑制血管生成的作用。; 李兴暖韩雅莉; 关键词：血管生成细胞凋亡

交联壳聚糖微球纯化抑肽酶研究: 2007年; 采用反相悬浮法制备交联壳聚糖微球,共价偶联胰蛋白酶,制成抑肽酶亲和吸附剂,将其直接亲和层析牛肺粗提液,制备高比活抑肽酶。结果表明,制备的亲和吸附剂单位活力1270KIU·g-1,蛋白质偶联率52.4%,酶活性回收率50.8%。制备的抑肽酶比活力达5650KIU·mg-1,并且该吸附剂具有非特异性吸附小、能反复使用、机械强度高、活化简单、价格低廉等优点。; 沈明才谭竹钧林延填张锋胡华平; 关键词：胰蛋白酶抑肽酶

地鳖纤溶活性蛋白的纯化及性质研究被引量：34: 2006年; 通过硫酸铵分段沉淀、DEAE-纤维素柱和SephadexG-75柱层析从雌地鳖(Eupolyphagesinensiswalker)体内分离纯化到一种相对分子质量约为41.3kD的纤溶活性蛋白,纤维蛋白平板测定表明,该蛋白具有纤溶作用,经SDS-PAGE电泳显示为一条带,含糖量为10.5%。其水解纤维蛋白的比活力为547.86u/mg。该成分受蛋白抑制剂和丝氨酸蛋白酶抑制剂PMSF的抑制,但EDTA对其影响不大,提示该成分属于丝氨酸蛋白酶类。该成分在40℃下基本稳定,最适温度40℃,最适pH为8.0,其激活纤维蛋白溶解酶(PLG)的机制与尿激酶(UK)有一定区别。推测其可能是一种新的地鳖纤溶酶组分。; 韩雅莉李张伟; 关键词：分离纯化

胰蛋白酶抑制剂的研究进展被引量：4: 2007年; 胰蛋白酶抑制剂是对胰蛋白酶具有抑制作用的一类物质.综述了近几年来,用不同原料制备胰蛋白酶抑制剂的研究进展及临床应用.; 谭竹钧沈明才张峰胡华平; 关键词：胰蛋白酶抑制剂基因工程治疗疾病

地鳖虫纤溶活性蛋白组分的提取及对肿瘤细胞的抑制作用被引量：17: 2007年; 目的探讨地鳖虫纤溶活性蛋白组分的提取及对肿瘤细胞的抑制作用。方法使用硫酸铵沉淀、DEAE离子交换层析和SephadexG75凝胶层析的方法，从地鳖虫体内提取出纤溶活性蛋白并检测其活性，研究其体外抗肿瘤的作用；并通过噻唑蓝（MTT）法和流式细胞术检测地鳖虫纤溶活性蛋白对2种肿瘤细胞（人食管癌细胞株Eca109和人宫颈癌细胞株HeLa）的增殖抑制及周期的影响。结果（1）地鳖虫体内存在具有纤溶活性的纤溶活性蛋白；（2）地鳖虫纤溶活性蛋白对肿瘤细胞的增殖抑制率与剂量和时间密切相关；（3）随着地鳖虫纤溶活性蛋白浓度的增加，G1期细胞数量明显减少，G2／M期的细胞数量有所增加。结论地鳖虫纤溶活性蛋白具有体外抑制肿瘤细胞的作用。; 林静华吴映娥蔡应木李兴暖韩雅莉; 关键词：蜚蠊目蛋白质类抗肿瘤药

地鳖虫蛋白提取物对小鼠S180肉瘤及鸡胚尿囊膜血管生成的抑制作用被引量：12: 2007年; 用不同浓度的地鳖虫蛋白粗提物（0．2～0.8g／ml）作用于S180肉瘤荷瘤小鼠，观察各组的抑瘤效果及重要生理指标的差异；同时分别用地鳖虫蛋白粗提物以及经过盐析、离子交换层析、分子筛由地鳖虫蛋白粗提物分离纯化得到的活性蛋白，作用于鸡胚尿囊膜，观察它们对新生血管生成的抑制作用。结果显示，地鳖虫蛋白粗提物对S180肉瘤荷瘤小鼠有显著的抑瘤作用；蛋白质粗提物以及纯化得到的活性蛋白对鸡胚尿囊膜新生血管的生成有明显的抑制作用，纯化品的抑制活性高于粗品，且二者对鸡胚生长发育的影响较阳性对照（地塞米松组）小，差异显著。因此，地鳖虫蛋白提取物有良好的体内抑瘤作用及血管生成抑制活性。; 郭桅韩雅莉陈少鹏李兴暖; 关键词：地鳖虫血管生成抗肿瘤

少棘蜈蚣纤溶活性蛋白的抗血栓作用被引量：50: 2007年; 目的研究少棘蜈蚣(Scolopendra subspinipes mutilans L.Koch)纤溶活性蛋白的抗血栓作用。方法采用离子交换层析和分子筛等制备法从少棘蜈蚣中纯化到蜈蚣纤溶酶(Scolopendra subspinipes mutilans L.Koch fibrinolyti cenzyme,SSFE),用纤维蛋白平板检测酶活力,常规方法检测了SSFE溶血性和出血性,进行了SSFE体外溶栓和体内溶栓实验,并检测了凝血酶原时间(PT)、活化部分凝血酶时间(APTT)和凝血酶时间(TT)3个标准化指标。结果PAGE显示SSFE为单一组分,具有纤溶活性;证明SSFE无致出血性且无致溶血活性,低、中、高剂量SSFE使小鼠APTT和TT均明显延长,中剂量SSFE对PT有延长作用,而高剂量作用不明显。结论蜈蚣纤溶酶具有抗血栓作用。; 陈少鹏韩雅莉郭桅李兴暖; 关键词：蜈蚣抗血栓作用

交联壳聚糖微球偶联胰蛋白酶研究被引量：3: 2008年; 采用反相悬浮交联法,制备交联壳聚糖微球(CCTS),再以戊二醛为偶联剂,偶联胰蛋白酶.研究了胰蛋白酶偶联的最佳条件和偶联后酶的理化性质。结果表明:用终浓度为0.6%的戊二醛,在50℃下,先处理CCTS 6 h,再置冰浴加酶为12 mg/g,搅拌24 h,固定化酶活性回收率达63.4%。胰蛋白酶与壳聚糖微球偶联的最适温度为80℃、最适pH值为7、表观米氏常数(Km)为3.16 mmol/L。与壳聚糖载体相比,CCTS具有机械强度好、粒度均匀、耐酸性能好、对牛血清白蛋白非特异性吸附较弱的优点。; 沈明才谭竹钧李宇光; 关键词：交联壳聚糖胰蛋白酶固定化酶

利用罗非鱼头与骨制备鱼香风味物的研究被引量：7: 2008年; 以罗非鱼头与骨为原料,在一定条件下酶解得到鱼香蛋白水解物,并添加适量的酵母抽提物,脱苦、去腥,改善蛋白酶解物风味。研究表明,最佳风味物的条件为添加复合蛋白酶0.06g、风味酶0.08g、蒸馏水20mL、调体系pH值8.0,在50℃振荡水浴锅中水解4h后,添加0.25g/10mL酵母抽提物。; 张锋谭竹钧胡华平李穗金陈明军; 关键词：酵母抽提物

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