广西壮族自治区自然科学基金(2010GXNSFA013254)
- 作品数：5 被引量：11H指数：2
- 相关作者：黄健李红艳梁斌陈志婷李帅更多>>
- 相关机构：桂林医学院桂林医学院附属医院更多>>
- 发文基金：广西壮族自治区自然科学基金广西教育厅科研项目广西高校百名中青年学科带头人计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 不同剂量柚皮素对CNE2细胞生长的双向调节作用及其机制研究被引量：4
- 2013年
- 目的探讨不同剂量柚皮素(naringenin)对人鼻咽癌CNE2细胞生长的影响及其相关作用机制。方法以不同剂量(0、5、10、20、40、60、80、100、200、400、800μg·mL^(-1))柚皮素处理CNE2细胞,作用不同时间(24、48、72 h)后,四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞生长率的变化;以较高剂量(0、200、400μg·mL^(-1))柚皮素处理CNE2细胞48 h,进行Hochest33258荧光染色观察细胞凋亡形态变化及细胞周期流式检测;以不同剂量(0,40,200μg·mL^(-1))柚皮素处理CNE2细胞,作用不同时间(24、48 h)后,通过流式细胞仪对其活性氧含量(R0S)进行测定,并对其增殖凋亡调控相关基因P53及C-fos进行mRNA表达水平的检测。结果不同剂量柚皮素对CNE2细胞的生长具有双向调节作用,较低剂量能使CNE2细胞内活性氧含量低水平升高,从而激活细胞增殖信号途径,通过诱导C-fos(p<0.01)及抑制P53(P<0.01)基因的表达体现为促进癌细胞增殖的活性;较高剂量能引发CNE2细胞内活性氧大量产生,从而激活细胞凋亡信号途径,通过诱导P53(P<0.01)及抑制C-fos(P<0.01)基因的表达,对细胞周期产生阻滞(p<0.01)并诱导细胞凋亡,有效抑制癌细胞的增殖。结论不同剂量柚皮素对CNE2细胞生长具有双向调节作用,较低剂量体现为促癌活性,较高剂量则体现为强烈的抑癌活性。
- 李红艳梁斌陈志婷胡春萍黄健
- 关键词：柚皮素CNE2促癌抑癌
- NO/PKG对THP-1巨噬细胞ABCA1基因mRNA表达和胆固醇含量的影响被引量：5
- 2011年
- 目的:探讨THP-1巨噬细胞泡沫化过程中NO/PKG的变化,以及NO/PKG对THP-1巨噬细胞ATP结合盒转运体A1(ABCA1)基因mRNA表达和胆固醇含量的影响。方法:THP-1细胞诱导分化为巨噬细胞,用氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)处理,油红"O"染色观察巨噬细胞脂滴,酶标仪测定一氧化氮(NO)的释放;用一氧化氮供体L-精氨酸和硝普钠(SNP)、乙二醇二乙醚二胺四乙酸(EGTA)、PKG激动剂处理巨噬细胞,RT-PCR法测定细胞ABCA1基因mRNA的表达,高效液相色谱法(HPLC)测定细胞内胆固醇的含量变化。结果:ox-LDL可导致THP-1巨噬细胞脂质的蓄积和NO释放的增加,实验组NO释放量较对照组显著升高(P<0.05),实验组中50mg/L组、100mg/L组、200mg/L组与25mg/L组相比显著升高(P<0.05)。用PKG激动剂处理巨噬细胞后促进ABCA1基因mRNA表达上调(P<0.05);用PKG激动剂、L-精氨酸、SNP处理后的巨噬细胞内胆固醇较对照组显著减少(P<0.05)。EGTA能显著增加细胞内胆固醇含量(P<0.05)。结论:NO/PKG能降低细胞内胆固醇,其机制可能是PKG激活后通过上调ABCA1的表达,减少细胞内胆固醇的蓄积。
- 李帅黄健李红艳莫新玲左晓娜
- 关键词：PKGABCA1
- ABCAl介导胆固醇转运的机制及其信号传导通路研究进展被引量：1
- 2011年
- 胆固醇的逆向转运（reverse cholesterol transport,RCT）被认为是对抗动脉粥样硬化（atherosclerosis,AS）的一个主要机制之一。在外周组织细胞当中,血管中膜平滑肌细胞、血管内皮细胞、巨噬细胞的胆固醇外流是RCT第一步中最有意义的事件。目前有多种分子可以转运细胞内胆固醇,ATP结合盒转运子A1（ATP-binding cassette transporter A1。
- 李帅黄健
- 关键词：ABCA1胆固醇逆向转运信号通路
- 蛋白激酶G对THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞炎症因子分泌的影响被引量：1
- 2014年
- 目的:探讨蛋白激酶G(PKG)对THP-1巨噬细胞源性泡沫细胞中炎症因子[白介素-6(IL-6)、白介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)]分泌的影响。方法:THP-1单核细胞用160 nmol/L的佛波酯诱导分化成巨噬细胞,再以50 mg/L氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)处理形成泡沫细胞,油红"O"染色,镜下观察细胞形态。以PKG激动剂100μmol/L 8-Br-cGMP和抑制剂2μmol/L KT-5823分别处理巨噬细胞和泡沫细胞,同时设立巨噬细胞正常对照组和泡沫细胞模型对照组,24 h后收集细胞上清液,ELISA检测各组细胞IL-6、IL-10、TNF-α的分泌。结果 :ox-LDL处理巨噬细胞48 h后,成功构建为泡沫细胞。泡沫细胞中IL-6、TNF-α分泌显著增加(P<0.05)。8-Br-cGMP处理巨噬细胞后,IL-6分泌显著减少(P<0.05),IL-10分泌显著增加(P<0.05);KT-5823处理巨噬细胞后,IL-10分泌显著减少(P<0.05)。8-Br-cGMP处理泡沫细胞后,IL-6和TNF-α分泌显著减少(P<0.05),IL-10分泌显著增加(P<0.05);KT-5823处理泡沫细胞后,IL-6和TNF-α分泌显著减少(P<0.05)。结论:PKG可能通过上调抗炎因子IL-10的表达、下调促炎因子IL-6和TNF-α的表达,抑制炎症的发生发展;PKG可作为潜在的抗动脉粥样硬化的新思路和新靶点。
- 李红艳诸葛祥真张弭黄健
- 关键词：蛋白激酶类蛋白激酶G白介素-6白介素-10肿瘤坏死因子-Α
- 不同剂量柚皮素介导的促氧化作用及其对CNE2细胞生长的调控被引量：2
- 2014年
- 目的：柚皮素重要的生理活性使其具有广泛的开发应用前景。文中探讨不同剂量柚皮素对人鼻咽癌CNE2细胞生长的影响及其相关作用机制。方法 MTT法检测不同剂量柚皮素（0、0．005、0．01、0．02、0．04、0．06、0．08、0．1、0．2、0．4、0．8 mg/mL）作用CNE2细胞不同时间（24、48、72 h）对其细胞生长率的影响；流式细胞仪检测不同剂量柚皮素（0、0．02、0．04 mg/mL ）作用 CNE2细胞48 h 对其细胞周期的影响；采用 Hochest 33258荧光染色观察不同剂量柚皮素（0、0．2、0．4 mg/mL）作用CNE2细胞48 h对其细胞凋亡形态的变化；采用Annexin V-FITC流式细胞术检测不同剂量柚皮素（0、0．2、0．4 mg/mL）作用CNE2细胞48 h对其细胞凋亡率的影响；采用2，7-二氯乙酰乙酸（2，7-dichloro fluorescein diacetate ， DCFH-DA）荧光探针检测不同剂量柚皮素（0、0．02、0．04、0．2、0．4 mg/mL）作用CNE2细胞48h对其细胞内活性氧簇（reactive oxygen spe-cies， ROS）的变化；采用实时荧光定量PCR法（ real-tmie fluorescence quantitative PCR ， qPCR）检测不同剂量柚皮素（0、0．02、0．04、0．2、0．4 mg/mL）作用CNE2细胞48 h对C-fos、Bax及Bcl-2基因mRNA表达水平的变化。结果与对照组相比，0．02、0．04 mg/mL柚皮素能引发CNE2细胞内ROS含量低水平升高，ROS的MFI分别为5186±183．50、5508±155．37，差异有统计学意义（P＜0．05），由此诱导细胞增殖调控基因C-fos表达，差异有统计学意义（P＜0．05或P＜0．01），加速细胞周期运转，促进CNE2细胞分裂增殖；而0．2、0．4 mg/mL柚皮素则能引发ROS大量产生，ROS的MFI分别为10758±179．82、11241±114．45，差异有统计学意义（P＜0．01），由此诱导促凋亡基因Bax及抑制抗凋亡基因Bcl-2表达，促进CNE2细胞凋亡，差异有统计学意义（P＜0．01），有效抑制CNE2细胞增殖。结论在0．005～0．8 mg/mL剂量范围
- 李红艳黄健梁斌陈志婷黄一淳
- 关键词：柚皮素CNE2
