江苏省“科教兴卫工程”医学重点人才基金(RC2007010)
- 作品数：5 被引量：5H指数：1
- 相关作者：高下陈杰张道行丁秀勇马登滨更多>>
- 相关机构：南京大学医学院附属鼓楼医院首都医科大学附属北京友谊医院南京医科大学附属鼓楼医院更多>>
- 发文基金：江苏省“科教兴卫工程”医学重点人才基金南京市医学科技发展项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 新生小鼠耳蜗基底膜体外培养的实验研究
- 2013年
- 目的建立可靠的新生小鼠离体耳蜗基底膜的培养方法，为内耳的研究提供新的条件和模型。方法在显微镜下完整分离出新生1～5 d小鼠的耳蜗基底膜组织，采用组织贴壁法在无血清培养基中进行培养，免疫荧光法检测新生小鼠离体耳蜗基底膜培养组织中毛细胞及螺旋神经元的生长状态。结果新生小鼠耳蜗基底膜离体培养24 h后，显微镜下观察可见基底膜贴壁生长良好，外周有新生上皮细胞和成纤维细胞长出；高倍显微镜下可见耳蜗内外毛细胞和支持细胞等结构；免疫荧光法检测可见毛细胞和螺旋神经元生长良好，并能保持较长一段时间。结论组织贴壁法无血清培养新生小鼠离体耳蜗基底膜是一种理想的耳科实验造模方法。
- 陈杰高下
- 关键词：小鼠耳蜗毛细胞螺旋神经元
- Hath1基因的重组腺病毒转染新生小鼠耳蜗成纤维细胞的初步研究
- 2014年
- 目的检测含有人Hath1基因的重组腺病毒Ad-DsRed2-Hath1对新生小鼠耳蜗成纤维细胞的转染情况及Hath1基因在新生小鼠耳蜗成纤维细胞中的表达情况。方法培养新生小鼠耳蜗成纤维细胞,用含有目的基因Hath1的重组腺病毒Ad-DsRed2-Hath1对其进行转染,转染后24 h通过荧光显微镜观察新生小鼠耳蜗成纤维细胞的转染情况,并通过免疫荧光的方法检测Hath1基因在新生小鼠耳蜗成纤维细胞中的表达情况。结果含有人Hath1基因的重组腺病毒Ad-DsRed2-Hath1能高效转染新生小鼠耳蜗成纤维细胞,Hath1基因在新生小鼠耳蜗成纤维细胞中能有效表达。结论含有人Hath1基因的重组腺病毒Ad-DsRed2-Hath1对新生小鼠耳蜗成纤维细胞的高效转染和有效表达为研究Hath1基因转染对正常及致聋小鼠耳蜗效应的实验奠定了基础。
- 陈杰高下
- 关键词：腺病毒基因转染耳蜗成纤维细胞小鼠
- 重组腺病毒Ad-GFP转染新生小鼠离体耳蜗基底膜的实验分析
- 2013年
- 目的观察重组腺病毒Ad-GFP转染新生小鼠离体耳蜗基底膜培养组织的情况。方法取新生1～5 d小鼠的耳蜗基底膜,离体培养1 d后,加入重组腺病毒Ad-GFP继续培养1 d,在荧光显微镜及Confocal显微镜下观察病毒对离体耳蜗基底膜的转染情况。结果耳蜗基底膜离体培养1 d后,在显微镜下观察,可见基底膜贴壁生长良好,外周有新生上皮细胞和成纤维细胞长出;高倍显微镜下可见耳蜗内外毛细胞和支持细胞等结构。离体耳蜗基底膜培养组织加入重组腺病毒Ad-GFP继续培养1 d后,可见重组腺病毒Ad-GFP能高效转染新生小鼠离体耳蜗基底膜及其外周长出的新生上皮细胞和成纤维细胞;在新生小鼠离体耳蜗基底膜上,不仅大上皮嵴细胞区域、小上皮嵴细胞区域的细胞能被高效转染,毛细胞也能被高效转染。结论重组腺病毒Ad-GFP能高效转染新生小鼠离体耳蜗基底膜培养组织。
- 马登滨陈杰高下
- 关键词：基因转染重组腺病毒耳蜗基底膜小鼠
- Lipofectamine^TM 2000介导pIRES2-EGFP-NT3转染小鼠耳蜗成纤维细胞的实验研究
- 2014年
- 目的检测真核表达质粒载体pIRES2-EGFP-NT3在阳离子脂质体介导下对新生小鼠耳蜗成纤维细胞的转染情况。方法培养新生小鼠耳蜗成纤维细胞，用阳离子脂质体Lipofectamine^TM 2000介导的方法，将含有目的基因NT3的真核表达质粒载体pIRES2-EGFP．NT3对其进行转染，转染后24h，通过Confocal显微镜观察新生小鼠耳蜗成纤维细胞的转染情况。结果通过阳离子脂质体Lipofectamine^TM 2000介导，真核表达质粒载体plRES2-EGFP-NT3能有效转染新生小鼠耳蜗成纤维细胞。结论含有目的基因NT3的真核表达质粒载体plRES2-EGFP-NT3在阳离子脂质体介导下对新生小鼠耳蜗成纤维细胞的有效转染为研究NT3基因转染对正常及致聋小鼠耳蜗效应的实验奠定了基础。
- 陈杰高下麻晓峰
- 关键词：转染耳蜗成纤维细胞小鼠
- 伴有分泌性中耳炎的人工耳蜗植入适应证与手术时机被引量：5
- 2009年
- 目的探讨伴有分泌性中耳炎的人工耳蜗植入手术适应证与手术时机。方法对26例伴有分泌性中耳炎的重度或极重度耳聋患儿行人工耳蜗植入手术，术前对分泌性中耳炎进行必要的非手术治疗，选择手术适应证和手术时机。人工耳蜗植入术中清理分泌性中耳炎病变、通畅引流，术后定期随访，同步进行人工耳蜗植入效果的评估。结果26例伴有分泌性中耳炎的人工耳蜗植入者均进行单侧耳手术，手术一次成功，其中左耳5例，右耳21例。术后1个月开机调试，26例均有主观电听觉。术后随访13个月～4．3年，分泌性中耳炎痊愈19例，鼓膜形态正常、声导抗检查为A型鼓室压曲线；分泌性中耳炎好转7例，鼓膜轻度浑浊内陷，声导抗呈C型鼓室压曲线；无鼓膜穿孔、中耳粘连或分泌性中耳炎急性发作病例。结论伴有分泌性中耳炎的人工耳蜗植入手术在严格掌握手术适应证的前提下，应及早手术，以争取术后听觉言语康复的最佳时期；通过术前必要的药物治疗、术中的病变处理与术后的治疗以及密切随访，都可以避免并发症的发生，达到人工耳蜗植入的预期效果。
- 高下张道行陈杰丁秀勇
- 关键词：耳蜗植入术伴渗出液
