国家高技术研究发展计划(2003AA24112002)
- 作品数：5 被引量：8H指数：2
- 相关作者：王春凤从彦龙叶丽萍沈明浩郝凤奇更多>>
- 相关机构：吉林农业大学中国农业大学北京市农林科学院畜牧兽医研究所更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划中国博士后科学基金吉林省杰出青年科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 表达传染性法氏囊vp2基因的重组马立克病疫苗对SPF鸡和商品鸡的免疫保护试验被引量：1
- 2007年
- 国内外很多学者都在进行着传染性法氏囊(Infectious bursal disease,IBD)各种基因工程疫苗的研制,IBDV-vp2基因在多种载体中得到表达并取得了较好的保护效力。本实验室已构建了表达IBDV-vp2基因的重组马立克氏病病毒。本研究对该重组马立克氏病病毒疫苗的遗传稳定性以及对SPF鸡和含有母源抗体的商品鸡的免疫保护作用进行了评价。结果表明,103 PFU和104 PFU剂量的重组病毒免疫后对SPF鸡抗传染性法氏囊标准强毒的保护率分别为53%和73%。104 PFU剂量的重组病毒免疫后对含有母源抗体的商品鸡抗传染性法氏囊标准强毒的保护率为87%,结果显示重组疫苗具有一定的应用前景。
- 周雪媚李永清佘锐萍章振华王宏俊王德成熊金茂彭开松
- 关键词：VP2基因重组马立克氏病病毒免疫保护
- 猪A组轮状病毒VP4全基因在大肠杆菌中的表达与检测被引量：2
- 2005年
- 以猪轮状病毒mRNA为模板,应用反转录聚合酶链式反应(RT_PCR)技术,扩增了2331bp的VP4全基因,通过T_A克隆技术,将PCR产物克隆至pGEM_T Vector中,成功地构建出克隆质粒pGEM_T_VP4。以BamHI和SalI双酶切pGEM_T_VP4和pGEX_6P_1,并将纯化的VP4基因亚克隆至融合型表达载体pGEX_6P_1中,构建出原核表达质粒pGEX_6P_VP4。将pGEX_6P_VP4转化至感受态E.coliBL21(DE3)中,经IPTG诱导和SDS_PAGE分析,可见约111.47 ku融合蛋白带。Western blot分析发现,该蛋白具有轮状病毒抗原性,从而为进一步研究轮状病毒的亚单位疫苗及DNA疫苗奠定基础。
- 王春凤沈明浩王会岩刘尚高
- 关键词：轮状病毒VP4基因克隆与原核表达
- A组轮状病毒VP6基因在乳酸菌表达载体中的克隆与序列分析
- 用反转录聚合酶链式反应(RT PCR)技术,从A组猪轮状病毒的总RNA中扩增了1356bp的VP6基因。用T4 DNA连接酶将其与乳酸菌的表达载体pW425t连接,并转化至胸苷酸合成酶基因(thymidylate syn...
- 王春凤刘兴友丛彦龙刘尚高何昭阳
- 关键词：轮状病毒VP6基因
- 文献传递
- 轮状病毒感染的免疫保护机制被引量：2
- 2005年
- 王春凤从彦龙
- 关键词：轮状病毒感染免疫急性腹泻肠道感染病原体RV
- 猪A组轮状病毒Vp7基因与双标记表达载体pW425et的重组及在大肠杆菌中的表达被引量：1
- 2008年
- 以猪A组轮状病毒mRNA为模板,应用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术,扩增了981 bp的Vp7基因,通过T-A克隆技术,将PCR产物克隆至pGEM-T载体中,构建出克隆质粒pGEM-T-Vp7。以SacⅠ和KpnⅠ双酶切pGEM-T-Vp7及双标记表达载体pW425et,并将纯化的Vp7基因亚克隆至双标记表达载体pW425et中,构建出可以在乳酸菌与大肠杆菌之间穿梭表达的原核表达重组质粒pW425et-Vp7。将pW425et-Vp7转化至thyA基因缺陷型的大肠杆菌感受态Escherichia coliX13中,经生长功能弥补筛选阳性克隆和SDS-PAGE分析,可见约40 kD的融合蛋白。Western blot分析表明该蛋白具有与猪轮状病毒多克隆抗体的反应原性。
- 胡静涛宁军肖冲王春凤
- 关键词：轮状病毒VP7基因大肠杆菌
- 猪A组轮状病毒Vp4基因与乳酸菌双标记表达载体的重组及其原核表达被引量：2
- 2009年
- 用SalⅠ和KpnⅠ双酶切克隆质粒pGEM-T-Vp4和（以胸苷酸合成酶基因（thymidylate synthase，thyA）及红霉素基因（Erythromycin）为选择压力的双标记的可以在乳酸菌与大肠杆菌之间穿梭表达的）质粒载体pW425et，并将纯化回收的Vp4基因亚克隆至表达载体pW425et中，构建出可以在乳酸菌与大肠杆菌之间穿梭表达的原核表达重组质粒pW425et-Vp4，并将pW425et-Vp4分别转化至thyA基因缺陷型的大肠杆菌感受态E-coliX13和乳酸杆菌感受态中，经生长功能弥补筛选阳性克隆，SDS-PAGE分析，可见约87ku的融合蛋白。Western-blot分析结果表明，该蛋白具有与轮状病毒多克隆抗体的反应原性。
- 叶丽萍郝凤奇王春凤
- 关键词：原核表达
