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贵州省科技厅农业攻关项目(NZ[2012]3023)

作品数：11 被引量：24H指数：3
相关作者：余波周思旋徐景峨杨莉史开志更多>>
相关机构：贵州省畜牧兽医研究所更多>>
发文基金：贵州省科技厅农业攻关项目贵州省科学技术基金贵州省畜禽健康养殖技术创新能力建设项目更多>>
相关领域：农业科学生物学更多>>

文献类型

  • 11篇中文期刊文章

领域

  • 10篇农业科学
  • 2篇生物学

主题

  • 4篇单胞菌
  • 4篇嗜水气单胞菌
  • 4篇气单胞菌
  • 4篇虹彩病毒
  • 3篇诊治
  • 3篇SYBR_G...
  • 2篇养殖
  • 2篇荧光
  • 2篇荧光定量
  • 2篇荧光定量PC...
  • 2篇致病性嗜水气...
  • 2篇人工养殖
  • 2篇耐药
  • 2篇耐药性
  • 2篇基因
  • 2篇贵州分离株
  • 2篇分离株
  • 2篇PCR诊断
  • 2篇PCR诊断方...
  • 1篇药性分析

机构

  • 11篇贵州省畜牧兽...

作者

  • 11篇余波
  • 8篇周思旋
  • 6篇徐景峨
  • 5篇杨莉
  • 3篇史开志
  • 1篇谭诗文
  • 1篇吴玙彤
  • 1篇肖芳萍
  • 1篇周思璇
  • 1篇康超

传媒

  • 3篇黑龙江畜牧兽...
  • 3篇广东农业科学
  • 2篇江苏农业科学
  • 1篇淡水渔业
  • 1篇基因组学与应...
  • 1篇黑龙江畜牧兽...

年份

  • 1篇2017
  • 4篇2016
  • 4篇2014
  • 2篇2013
共 11 条 记 录，以下是 1-10
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排序方式：
大鲵致病性嗜水气单胞菌PCR诊断方法的建立被引量：2
2013年
根据GenBank中致病性嗜水气单胞菌气溶素基因(hlyA)序列,设计1对特异性引物,通过对PCR反应条件进行优化,建立了检测大鲵致病性嗜水气单胞菌的PCR诊断方法。结果表明:扩增的阳性条带约为600 bp,特异性、敏感性结果显示,该PCR方法对致病性嗜水气单胞菌DNA的最低检测量为0.4 ng/L,而非致病性嗜水气单胞菌、大肠杆菌、黄杆菌、弗氏柠檬酸杆菌的扩增结果均为阴性。对123份大鲵病料进行检测,结果建立的PCR方法检测结果与细菌学和生化检验结果符合率为97.6%,表明该PCR方法能够对大鲵致病性嗜水气单胞菌样品进行快捷、灵敏、准确的检测。
余波王芳罗永成徐景峨杨莉史开志
关键词：致病性嗜水气单胞菌PCR
大鲵虹彩病毒贵州分离株MCP基因的克隆与原核表达被引量：3
2017年
根据Gen Bank中大鲵虹彩病毒主衣壳蛋白MCP(major capsid protein,MCP)基因序列(序列号:KF512820),设计一对特异性引物,以大鲵虹彩病毒贵州分离株基因组DNA为模板,PCR扩增大鲵虹彩病毒MCP基因并测序,与Gen Bank中大鲵虹彩病毒MCP基因进行比对,然后将其亚克隆到原核表达载体p ET-32a(+)中,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导后进行Western blot分析。结果显示:PCR扩增出长度为1 392 bp的片段,与Gen Bank中大鲵虹彩病毒MCP基因核苷酸序列相似性为99.7%~99.9%,SDSPAGE电泳显示该重组蛋白的相对分子质量约为67×103。免疫原性检测结果表明,该重组蛋白可与兔抗大鲵虹彩病毒阳性血清特异性反应,具有免疫原性。
余波王芳康超李永霞周思旋
关键词：原核表达免疫原性
微生态制剂在冷水鱼养殖中应用的研究进展被引量：2
2016年
随着冷水鱼养殖业的发展,集约化程度越来越大,冷水鱼的疾病愈发严重,抗生素的大量使用使冷水鱼出现细菌耐药性,同时抗生素残留还会影响水产品品质和出口,给冷水鱼养殖户造成巨大的经济损失。微生态制剂包含益生菌、益生元和合生元三种类型,微生态制剂具有调节肠道生态平衡、提高体内酶活力、降低饵料系数、提高蛋白转化率、增强免疫力、改善水质等功效,并且具有绿色、生态、无不良反应、不产生耐药性等优点,是抗生素最理想的替代品,在冷水鱼养殖中的应用前景广阔。
王芳屈小媛李永霞余波周思璇罗永成
关键词：细菌耐药性抗生素残留微生态制剂益生元合生元冷水鱼
大鲵致病性嗜水气单胞菌SYBR GreenⅠ荧光定量PCR诊断试剂盒的研制被引量：3
2014年
根据GenBank中致病性嗜水气单胞菌特异性的气溶素基因序列,设计1对引物,利用普通PCR技术扩增获得hlyA基因片段,并克隆到pMD-18T载体上作为阳性标准品。通过对SYBR GreenⅠ荧光定量PCR反应条件的优化,建立了快速检测致病性嗜水气单胞菌的SYBR GreenⅠ荧光定量诊断方法,以此为基础研制出试剂盒。试剂盒扩增产物的熔解曲线分析只出现1个单特异峰,无引物二聚体,对非致病性嗜水气单胞菌、弗氏柠檬酸杆菌、迟缓爱德华菌、柱状黄杆菌均无阳性信号扩增,重复性好,灵敏度可达1.0x101拷贝/uL。结果表明研制的致病性嗜水气单胞菌SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR试剂盒具有特异、灵敏、快速、重复性好等特点,适合于大鲵临床样品的检测。
余波罗永成马永兵徐景峨周思旋杨莉史开志
关键词：致病性嗜水气单胞菌荧光定量PCR
大鲵虹彩病毒贵州分离株MCP基因的克隆与B细胞表位预测
2016年
为了研究大鲵虹彩病毒(GSIV)MCP基因以及预测其B细胞表位,试验采用PCR方法扩增大鲵虹彩病毒MCP基因,采用生物学软件对大鲵虹彩病毒MCP基因的氨基酸序列进行B细胞表位预测分析。结果表明:扩增产物大小为1 392 bp,将该序列与Gen Bank中大鲵虹彩病毒MCP基因中的中国分离株核苷酸相似性为99.8%。MCP蛋白有多个抗原表位位点,抗原性指数较高,而这些区域可能是B细胞抗原表位区域。说明预测的结构、亲水性、柔性区域和抗原指数可用于大鲵虹彩病毒亚单位疫苗和分子诊断试剂的研究。
王芳康超余波李永霞周思旋
关键词：B细胞表位预测氨基酸序列
大鲵柱状黄杆菌SYBR GreenⅠ荧光定量PCR诊断试剂盒的研制被引量：4
2014年
根据Gen Bank中柱状黄杆菌16S r RNA序列,设计1对特异性引物,PCR扩增获得16S r RNA基因片段,并克隆到p MD-18T载体上作为阳性标准品。通过对SYBR Green I荧光定量PCR反应条件的优化,建立了黄杆菌的SYBR Green I荧光定量PCR诊断方法 ,以此为基础研制试剂盒。试剂盒扩增产物的熔解曲线分析只出现1个单特异峰,无引物二聚体,对嗜水气单胞菌、荧光假单胞菌、迟缓爱德华、弗氏柠檬酸杆菌均无阳性信号扩增,重复性好,灵敏度可达12拷贝/μL。结果表明,研制的柱状黄杆菌SYBR Green I实时荧光定量PCR试剂盒具有特异、灵敏、快速、重复性好等特征,适合于大鲵临床样品的检测。
余波罗永成徐景峨周思旋杨莉马永兵
关键词：柱状黄杆菌RRNA基因
大鲵虹彩病毒套式PCR诊断方法的建立及应用被引量：4
2016年
根据Gen Bank中大鲵虹彩病毒主要衣壳蛋白MCP基因序列,设计2对特异性的引物,通过对第1步和第2步PCR反应条件进行优化,建立大鲵虹彩病毒主要衣壳蛋白套式PCR诊断方法。结果表明,该方法重复性好,第1次PCR扩增敏感性达10 pg/m L,第2次PCR敏感性是1 fg/m L,对锦鲤疱疹病毒、斑点叉尾病毒、嗜水气单胞菌、柠檬酸杆菌、黄杆菌DNA扩增结果均为阴性。表明建立的套式PCR方法适合于大鲵虹彩病毒临床样品的快速诊断。
王芳康超李永霞余波周思旋
关键词：套式PCR
弗氏柠檬酸杆菌SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR诊断方法的建立及耐药性分析
2016年
根据GenBank中弗氏柠檬酸杆菌ompA基因序列,设计1对特异性引物,PCR扩增弗氏柠檬酸杆菌ompA基因片段,T克隆到pMD-18T载体上构建标准阳性质粒。通过SYBR GreenⅠ荧光定量PCR反应条件优化,建立弗氏柠檬酸杆菌SYBR GreenⅠ荧光定量PCR诊断方法,结果显示重复性好、特异性高,灵敏度可达1.0×10~1拷贝/μL,说明建立的弗氏柠檬酸杆菌SYBR GreenⅠ荧光定量PCR方法适合于弗氏柠檬酸杆菌病临床疑似病料样品的快速诊断。对分离得到的83株弗氏柠檬酸杆菌进行药敏试验,结果表明冷水鱼养殖中耐药性问题日益严重。
王芳康超李永霞余波周思旋罗永成马永兵
关键词：荧光定量PCR耐药性
虹鳟鱼小瓜虫与水霉混合感染的诊治被引量：1
2014年
为了查明贵阳市某养鱼公司饲养的虹鳟鱼病死原因,试验临床观察虹鳟病鱼,病理剖检,并采集肝脏、胰脏、心脏、肠、体表黏液、鳃丝等组织样品进行细菌培养和显微镜检查。结果表明:黏液样品上可见小瓜虫,鳃样上可见小瓜虫和水霉菌丝。说明该养鱼场的虹鳟鱼为小瓜虫与水霉的混合感染。
肖芳萍余波徐景峨周思旋罗永成崔伟马永兵
关键词：虹鳟鱼小瓜虫病水霉病
1例人工养殖大鲵腹水病的诊治
2014年
为了对大鲵患病情况进行确诊,试验采用临床症状观察、病理解剖及实验室诊断的方法。结果表明:大鲵为嗜水气单胞菌和维氏气单胞菌的混合感染;通过采取综合有效的防治措施,大鲵养殖场疫情得到有效控制。
吴玙彤余波周思旋徐景峨罗永成杨莉谭诗文
关键词：嗜水气单胞菌维氏气单胞菌腹水病
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