“十五”国家科技攻关计划(2004BA721A11)
- 作品数：7 被引量：173H指数：6
- 相关作者：李志勇孙建宁张硕峰李飞刘芳更多>>
- 相关机构：北京中医药大学中央民族大学中国中医科学院更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 次乌头碱对乳大鼠原代培养心肌细胞的毒性作用被引量：18
- 2010年
- 目的探讨次乌头碱(HA)对心肌细胞的毒性作用。方法制备乳大鼠原代心肌细胞,用锥虫蓝染色法检测心肌细胞存活率,用小鼠抗大鼠α横纹肌肌动蛋白和兔抗大鼠纤连蛋白多克隆抗体免疫化学染色法鉴定心肌细胞。制备的原代细胞培养3～4d,分别加入HA0,3,6,30,60和120μmol·L-1培养5,15,30和60min,记录每组细胞搏动频率;以HA体外引起心肌细胞搏动消失的浓度及作用时间为依据,将心肌细胞分为培养基对照,二甲亚砜(DMSO)对照,HA30,60和120μmol·L-1组,分别连续培养5,15,30和60min,比色法检测乳酸脱氢酶(LDH)漏出率,倒置显微镜下观察细胞形态的变化。结果与HA0μmol·L-1组比较,HA30μmol·L-1与心肌细胞作用5,15,30和60min时细胞搏动频率增加,由40±26,42±27,38±19和(20±10)min-1分别增加到114±27,98±32,100±32和(49±13)min-1(n=12,P<0.01);HA120μmol·L-1立即导致心肌细胞停搏。不同浓度的HA随着作用时间的延长,导致LDH漏出率不同程度的增加,其中HA30,60和120μmol·L-1作用60min时细胞LDH漏出率分别为(29±8)%,(42±10)%和(57±9)%与同一时间点DMSO组比较有明显差异(P<0.01)。倒置显微镜观察发现,随着HA浓度的增加和作用时间的延长,心肌细胞有死亡现象。结论 HA对心肌细胞有毒性作用,主要表现为细胞搏动频率加快,细胞膜稳定性破坏;HA120μmol·L-1与心肌细胞作用超过120min会引起少量心肌细胞死亡。
- 李志勇孙建宁张硕峰
- 关键词：次乌头碱心肌细胞毒性
- HPLC测定附子及其炮制品中3种双酯型生物碱的含量被引量：56
- 2006年
- 目的：建立同时测定附子中3种双酯型生物碱——新乌头碱、乌头碱、次乌头碱含量的HPLC分析方法。方法：Zorbax Eclipse XDB C18柱，40mmol乙酸铵缓冲液-乙腈，梯度洗脱，流速1.0mL·min^-1，检测波长230nm。结果：3种双酯型生物碱新乌头碱、乌头碱、次乌头碱均达到了较好的分离，分别在0．0357-1.784μg（r=0．9999），0.0126-0．632μg（r=0．9997）和0．0334-1．672μg（r=0．9997）呈良好的线形关系。结论：该方法简便、快速、灵敏，可有效地用于附子的鉴别和内在质量控制。
- 刘芳于向红李飞谈钰元乔延江
- 关键词：附子双酯型生物碱HPLC梯度洗脱
- 不同炮制时间附子饮片对水合氯醛麻醉大鼠心功能的影响被引量：6
- 2009年
- 目的:观察不同炮制时间附子对水合氯醛麻醉大鼠心功能的影响及其心脏毒性。方法:采用侵入法观察大鼠十二指肠注射不同炮制时间的附子后心脏LVSP、心率、+dp/dtmax及t-dp/dtmax变化,计算其效价强度。结果:附子能在一定程度上抑制水合氯醛麻醉大鼠心脏LVSP、+dp/dtmax变化率的负性增大,炮制5～100 min的附子,其效价强度较高;炮制120 min后的附子效价强度降低。结论:附子改善心功能的作用受炮制时间的影响,采用高压蒸制的方法炮制40～100 min时间段获取的附子饮片可能具有较佳的药效。
- 李志勇孙建宁张硕峰畅洪昇赵晖
- 关键词：附子心功能
- 次乌头碱对乳大鼠原代培养心肌细胞Ca^(2+)及Cx43表达的影响被引量：7
- 2011年
- 目的观察次乌头碱对原代培养的心肌细胞内Ca2+浓度及缝隙连接蛋白Cx43表达的影响。方法体外培养乳大鼠心肌细胞,采用流式细胞技术观察30,60,120μmol/L的次乌头碱在15,30,60 min对心肌细胞内Ca2+浓度变化的影响,并应用Western blot技术检测次乌头碱作用心肌细胞15 min后的细胞缝隙连接蛋白Cx43的表达水平。结果次乌头碱能提高心肌细胞[Ca2+]i,这种作用在给药后15 min时最显著,随着作用时间的延长,细胞[Ca2+]i下降;次乌头碱作用心肌细胞15 min能降低心肌细胞Cx43的表达量,但无显著性差异。结论次乌头碱能促进心肌细胞内Ca2+增高,进而导致细胞Cx43表达降低,增加心肌细胞发生心律失常的易感性。
- 李志勇谭鹏孙建宁刘永刚李彦文
- 关键词：次乌头碱钙离子CX43
- 不同附子炮制品中乌头碱、新乌头碱、次乌头碱含量的HPLC测定被引量：59
- 2006年
- 目的:建立 RP-HPLC 方法,分离和测定15种附子炮制品中乌头碱、新乌头碱、次乌头碱的含量。方法:采用 HypersilBDS C_(18)色谱柱(4.6mm×150mm,5μm),以甲醇-0.1%三乙胺(60:40)为流动相,流速1.0mL·min^(-1),检测波长240nm。结果:不同附子炮制品中乌头碱、新乌头碱、次乌头碱含量差异悬殊。结论:本研究所建立的 HPLC 方法适用于双酯型生物碱的定量分析,结果准确可靠。
- 王瑞刘芳孙毅坤李飞乔延江
- 关键词：附子乌头碱新乌头碱次乌头碱
- 不同炮制时间附子饮片双酯型生物碱含量变化与饮片安全的相关性研究被引量：25
- 2009年
- 目的:对不同炮制时间附子饮片的毒-效性与饮片3种双酯型生物碱的含量变化进行相关性研究。方法:以附子"回阳救逆"功效为评价重点,采用Bliss法和序贯法对不同炮制时间附子饮片进行安全性评价;将饮片乌头碱、中乌头碱、次乌头碱含量变化与饮片TD50,ED50,TI进行关联性分析,并对3种双酯型生物碱与饮片毒性、药效的相关性进行分析。结果:具有"回阳救逆"功效和"高效低毒"特点的附子饮片保存了适量的中乌头碱和次乌头碱,乌头碱干扰了附子"回阳救逆"功效的显现(负相关),次乌头碱与附子的毒性和"回阳救逆"功效均成正相关。结论:中乌头碱、次乌头碱在饮片中的适当配比存在是保证附子"回阳救逆"及安全性的关键。
- 李志勇张硕峰畅洪昇孙建宁李飞
- 关键词：附子
- 近10年乌头碱类中药中毒临床文献分析被引量：28
- 2008年
- 乌头碱类中药指成分中含有双酯型生物碱的天然药物，包括附子、川乌、草乌、雪上一支蒿和一些地方药材及民族药材。此类中药味辛（苦），性温热，有大毒，入心、肾（肝）、脾经。具有回阳救逆、补火助阳、祛风除湿和温经散寒等功能，临床用于治疗气喘咳嗽、心腹疼痛、慢性腹泻、阳痿滑精、各种风湿疼痛、心衰、顽癣、
- 李志勇孙建宁张硕峰李彦文
- 关键词：乌头碱中毒文献计量学
