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甘肃省科技攻关计划(GK972-2-81A)

作品数:2 被引量:5H指数:2
相关作者:贺雪姣朱任之郁荣杨国嵘薛永杰更多>>
相关机构:解放军第一医院兰州大学甘肃省人民医院更多>>
发文基金:甘肃省自然科学基金甘肃省科技攻关计划更多>>
相关领域:医药卫生更多>>

文献类型

  • 2篇中文期刊文章

领域

  • 2篇医药卫生

主题

  • 2篇原核表达
  • 1篇蛋白
  • 1篇蛋白质
  • 1篇蛋白质类
  • 1篇融合蛋白
  • 1篇融合蛋白质类
  • 1篇克隆
  • 1篇分子
  • 1篇分子克隆
  • 1篇白质
  • 1篇CDNA
  • 1篇DECORI...

机构

  • 2篇甘肃省人民医...
  • 2篇兰州大学
  • 2篇解放军第一医...

作者

  • 2篇何晓霞
  • 2篇薛永杰
  • 2篇杨国嵘
  • 2篇郁荣
  • 2篇朱任之
  • 2篇贺雪姣

传媒

  • 1篇中国病理生理...
  • 1篇西北国防医学...

年份

  • 1篇2007
  • 1篇2005
2 条 记 录,以下是 1-2
排序方式:
胶原沉积抑制因子cDNA的分子克隆及其在大肠杆菌DH5α的表达被引量:3
2005年
目的:获取胶原沉积抑制因子(Decorin)互补脱氧核糖核酸(cDNA)并在大肠杆菌DH5α中表达出成熟蛋白。方法:用巢式逆转录聚合酶链反应(nest-RT-PCR)法从体外培养的成纤维细胞(2BS)中获取Decorin cDNA,克隆入pMD18-T载体。测序后,将成熟蛋白区亚克隆入pGEX-4T-1中,用PCR法、限制性酶切和测序对融合克隆进行鉴定。经过鉴定的融合克隆在大肠杆菌DH5α中进行表达。结果:获取的1 181 bp的Decorin cDNA片段与基因bank中收录的序列相似性达99.75%;可从GST-Decorin成熟蛋白cDNA融合克隆中扩增出和酶切出1 005 bp的目的片段;融合克隆有完整的开放阅读框架;融合蛋白在大肠杆菌DH5α中成功表达。结论:获取了Decorin cDNA并在大肠杆菌DH5α中表达出GST-Decorin成熟蛋白。
杨国嵘朱任之何晓霞薛永杰贺雪姣郁荣
关键词:克隆原核表达
胶原沉积抑制因子在大肠杆菌DH5α中的表达特性被引量:2
2007年
目的:研究人胶原沉积抑制因子(decorin)在大肠杆菌DH5α中的表达特性。方法:用SDS-PAGE法检测pGEX-4T-1-decorin融合克隆在大肠杆菌DH5α中表达,选择阳性表达克隆;测定1mmol/L异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)最佳诱导时间;用超声波裂解法分析GST-decorin融合蛋白的可溶性。用West-ern blotting进行定性分析。结果:用1mmol/LIPTG诱导时,融合蛋白可在大肠杆菌DH5α中表达;最佳诱导时间为4h;大部分融合蛋白以包涵体的形式存在;所表达蛋白为GST融合蛋白。结论:GST-decorin融合蛋白可在大肠杆菌DH5α中大量表达,但以包涵体的形式存在。
杨国嵘朱任之何晓霞薛永杰贺雪姣郁荣
关键词:DECORIN融合蛋白质类原核表达
共1页<1>
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