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江苏省高校自然科学研究项目(06KJB320114)
作品数:
4
被引量:7
H指数:1
相关作者:
毛立军
刘俊杰
郑骏年
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郑骏年
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3篇
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溶瘤腺病毒介导RNA干扰人端粒酶逆转录酶抑制HeLa细胞生长
被引量:1
2009年
目的观察表达人端粒酶逆转录酶siRNA(hTERT-siRNA)的溶瘤腺病毒ZD55-TERT-siRNA对体外培养人宫颈癌HeLa细胞生长及hTERT基因表达的影响。方法以溶瘤腺病毒ZD55-EGFP、表达hTERT-siRNA的增殖缺陷腺病毒AD-TERT-siRNA和增殖缺陷腺病毒AD-EGFP作为对照组。不同滴度四种病毒分别感染HeLa细胞,结晶紫法检测细胞毒作用,MTT法测定细胞生长抑制率;RT-PCR、Western blot、免疫细胞化学(ICC)法分别检测hTERT的mRNA、蛋白质及抗原表达,Western blot和ICC法分别测定腺病毒E1A蛋白及抗原表达。结果对HeLa细胞的生长抑制作用和细胞毒作用ZD55-TERT-siRNA>AD-TERT-siRNA和ZD55-EGFP>AD-EGFP;ZD55-TERT-siRNA和ZD55-EG-FP感染的HeLa细胞表达E1A;抑制hTERT表达作用依次为ZD55-TERT-siRNA>AD-TERT-siRNA>ZD55-EGFP、AD-EGFP。结论溶瘤腺病毒介导RNA干扰hTERT能有效抑制HeLa细胞生长及hTERT基因表达。
刘艳华
郑骏年
毛立军
孙方浩
温儒民
张宝福
李望
刘俊杰
裴冬生
关键词:
溶瘤腺病毒
RNA干扰
表达人端粒酶逆转录酶小干扰RNA的增殖腺病毒对肝癌细胞的抑制作用
被引量:1
2008年
目的观察表达人端粒酶逆转录酶小干扰RNA(hTERT—siRNA)的增殖腺病毒(ZD—hTERT)对人肝癌Bel-7402细胞增殖及凋亡影响。方法ZD—hTERT、增殖腺病毒ZD—EGFP、表达hTERT—siRNA的增殖缺陷腺病毒Ad—hTERT、增殖缺陷腺病毒Ad—EGFP分别感染人肝癌Bel-7402细胞。Western blot法检测E1A表达;逆转录-聚合酶链反应(RT—PCR)、Western blot法检测hTERT表达;噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞存活;结晶紫染色法检测细胞毒作用;原位末端标记法(TUNEL)检测凋亡。结果感染ZD—hTERT、ZD-EGFP的Bel-7402细胞表达E1A;抑制hTERT表达作用依次为ZD—hTERT〉Ad—hTERT〉ZD—EGFP〉Ad—EGFP;抑制Bel-7402细胞生长及细胞毒作用依次为ZD—hTERT〉ZD—EGFP=Ad—hTERT〉Ad—EGFP。感染ZD—hTERT、ZD—EGFP、Ad—hTERT、Ad—EGFP的Bel-7402细胞凋亡率(%)分别为(88.1±2.2)、(39.2±2.1)、(42.1±5.1)、(7.5±2.1),ZD—hTERT诱导凋亡作用最高(P〈0.01)。结论表达hTERT—siRNA的增殖腺病毒能显著抑制人肝癌Bel-7402细胞hTERT基因表达,进而抑制其增殖,促进其凋亡。
徐为
刘俊杰
宋文哲
毛立军
高超
韩东
裴冬生
郑骏年
关键词:
腺病毒
HTERT基因
表达Ki67-siRNA的溶瘤腺病毒抑制人肾癌ACHN细胞Ki67基因表达及增殖研究
2008年
目的:研究表达Ki67-siRNA的溶瘤腺病毒(ZD55-Ki67)对肾癌ACHN细胞Ki67基因表达及增殖抑制作用。方法:ZD55-Ki67、溶瘤腺病毒ZD55、表达Ki67-siRNA的增殖缺陷腺病毒Ad-Ki67感染人肾癌ACHN细胞。Western印迹法检测E1A表达;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Western印迹、免疫组织细胞化学法检测Ki67表达;原位末端标记法(TUNEL)检测细胞凋亡;MTT法检测细胞存活;结晶紫染色法检测细胞毒作用。结果:感染ZD55-Ki67、ZD55的ACHN细胞表达E1A;抑制Ki67表达作用依次为ZD55-Ki67>Ad-Ki67>ZD55。ZD55-Ki67、ZD55、Ad-Ki67感染的ACHN细胞凋亡率(%)分别为(56.3±3.1)、(25.3±2.5)、(37.0±3.0),均显著高于对照组(5.5±2.1)(P<0.01),每种病毒之间均有显著差异(P<0.01);存活率(%)分别为(40.9±2.2)、(71.3±6.6)、(86.8±3.1),每种病毒之间均有显著差异(P<0.01);对ACHN细胞的细胞毒作用ZD55-Ki67>ZD55>Ad-Ki67。结论:表达Ki67-siRNA的溶瘤腺病毒具有显著的抑制肾癌ACHN细胞Ki67基因表达、诱导凋亡、杀伤肾癌细胞作用。
史震
郑骏年
毛立军
郑宏祥
温儒民
李望
刘俊杰
关键词:
溶瘤腺病毒
KI67基因
RNA干扰
荷载hTERT-siRNA的溶瘤腺病毒对人肾癌细胞增殖的抑制作用
被引量:5
2008年
目的研究荷载hTERT-siRNA的溶瘤腺病毒(ZD-hTERT)对肾癌Ketr-3细胞增殖抑制作用。方法ZD-hTERT、溶瘤腺病毒ZD-EGFP、表达hTERT-siRNA的增殖缺陷腺病毒Ad-hTERT感染人肾癌Ketr-3细胞。Westernblot检测E1A表达;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)、Westernblot检测hTERT表达;原位末端标记法(TUNEL)检测凋亡;噻唑蓝(MTT)比色法检测细胞存活;结晶紫染色法检测细胞毒作用。结果感染ZD-hTERT、ZD-EGFP的Ketr-3细胞表达E1A;抑制hTERT表达作用依次为ZD-hTERT〉Ad-hTERT〉ZD-EGFP。感染ZD-hTERT、ZD-EGFP、Ad-hTERT的Ketr-3细胞凋亡率(%)分别为(65.9±1.4)、(26.5±2.8)、(16.3±3.2)。感染ZD.hTERT、ZD-EGFP、Ad-hTERT的Ketr-3细胞存活率(%)分别为(30.9±3.6)、(51.6±3.8)、(87.9±3.1),每种病毒之间差异有统计学意义(P〈0.01);对Ketr-3细胞的细胞毒作用ZD-hTERT〉ZD-EGFP〉Ad-hTERT。结论表达hTERT-siRNA的溶瘤腺病毒具有显著的抑制。肾癌Ketr.3细胞hTERT基因表达、诱导凋亡、杀伤肾癌细胞作用。
陈仁富
郑骏年
李望
刘艳华
毛立军
刘俊杰
温儒民
孙方浩
裴冬生
关键词:
溶瘤腺病毒
HTERT基因
RNA干扰
肾癌
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