国家自然科学基金(30672263)
- 作品数：5 被引量：9H指数：2
- 相关作者：黄绍平王雪莹杨琳李丹陈小聪更多>>
- 相关机构：西安交通大学医学院第二附属医院西安市儿童医院西安交通大学更多>>
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- 环孢素A对未成熟脑惊厥性损伤的保护作用及机制研究
- 2009年
- 目的探讨环孢素A(CsA)对未成熟脑惊厥性损伤的保护作用及机制。方法21日龄SD雄性大鼠67只,制作氯化锂-匹鲁卡品癫模型,分别于制模后6、30、54 h采用CsA干预,分5、10、25 mg/(kg.次),三个干预剂量,与模型不干预组对比,观察制模后72 h脑海马CA1区凋亡细胞、多药耐药基因产物P-糖蛋白(P-gp)、星形胶质细胞纤维酸性蛋白(GFAP)表达情况等。结果模型组比假手术组海马CA1区凋亡细胞、P-gp、GFAP表达明显增加,CsA 5 mg/(kg.次)干预组可显著减少P-gp、GFAP表达,且与假手术组水平接近,CsA 10 mg/(kg.次)、CsA 25 mg/(kg.次)有相似效果,但不及CsA 5 mg/(kg.次)效果明显。CsA干预不能减少凋亡细胞。结论中小剂量CsA可以通过降低海马CA1区、P-gp、GFAP表达而减轻未成熟脑惊厥性损伤。
- 郭亚乐黄绍平李丹杨琳周戬平
- 关键词：环孢素A未成熟脑P-糖蛋白
- SD大鼠脑皮层星形胶质细胞的原代培养及纯化方法改良被引量：5
- 2009年
- 目的:探讨大鼠大脑皮层星形胶质细胞的培养方法,以获得纯度高的细胞进一步对其进行体外实验研究。方法:在Mc-Carthy方法基础上改用出生后1d的SD大鼠的大脑皮层,结合机械分离和胰酶消化后制备单细胞悬液接种,差速贴壁1h,培养14d以后上摇床以去除混杂细胞,细胞融合后传代,每次传代前都经历胰酶冲洗和差速贴壁,传3代后利用GFAP-FITC免疫荧光法对所获细胞进行鉴定。结果:经过原代传代及纯化,大脑皮层星形胶质细胞体外培养成功,并有较高的纯度。GFAP-FITC免疫荧光染色阳性。结论:经过合理取材、改良纯化方法后,可以更为简便得到纯度很高的星形胶质细胞。
- 王雪莹黄绍平陈小聪姜永生
- 关键词：星形细胞细胞培养大脑皮层
- 不同增生程度星形胶质细胞对癫癎大鼠多药耐药基因MDR表达的影响被引量：1
- 2010年
- 目的探讨星形胶质细胞增生与癫癎大鼠多药耐药基因(MDR)表达的关系。方法将新生Spra-gue-Dawley大鼠大脑皮层星形胶质细胞分离、纯化并培养至第3代后,采用肿瘤坏死因子(TNF-α)分别作用2h、24h及48h以刺激星形胶质细胞增生。将不同增生程度的星形胶质细胞培养液分别注入到癫癎大鼠侧脑室,用PCR法、免疫组化法和免疫印记法测定脑组织MDR产物P-糖蛋白(P-gp)表达。结果 TNF-α刺激后2h胶质细胞开始增生,24h达高峰;增生的胶质细胞培养液可使癫癎大鼠MDR表达上调,表达量与增生程度一致。结论星形胶质细胞增生可使癫癎大鼠MDR基因表达上调,可能参与了难治性癫癎的形成。
- 陈小聪黄绍平王雪莹
- 关键词：星形胶质细胞增生多药耐药基因
- 环氧化酶-2选择性抑制剂塞来考昔对癫癎持续状态大鼠脑组织P-糖蛋白表达的影响被引量：3
- 2015年
- 目的 研究环氧化酶-2（COX-2）选择性抑制剂塞来考昔对癫癎持续状态大鼠脑组织中P-糖蛋白（P-gp）表达的影响,为寻找治疗难治性癫癎的新药物提供理论依据.方法 健康成年雄性SD大鼠60只按随机数字表法随机分为空白对照组、癫癎模型组和塞来考昔干预组.氯化锂-毛果芸香碱诱发SD大鼠癫癎持续状态,48只纳入实验,每组16只.各实验组均采用免疫组织化学法和Western blot法检测鼠额叶皮质区及海马区P-gp的表达情况.结果 免疫组织化学结果显示：与空白对照组比较,癫癎模型组中P-gp的表达显著增高,差异有统计学意义（P＜0.01）;塞来考昔干预后的大鼠脑组织P-gp较癫癎模型组显著下降,差异有统计学意义（P＜0.01）.Western blot法检测结果提示：各组额叶皮层和海马中均有P-gp的表达.与空白对照组比较,癫癎模型组中P-gp的表达量显著增高,差异有统计学意义（P＜0.01）;塞来考昔干预组大鼠脑组织P-gp的表达量较癫癎模型组显著下降,差异有统计学意义（P＜0.05）.结论 COX-2抑制剂塞来考昔可降低P-gp在癫癎持续状态大鼠脑组织中的表达,有望成为治疗难治性癫癎的新方法.
- 王雪莹黄绍平宋婷婷李丹杨琳
- 关键词：环氧化酶-2选择性抑制剂P-糖蛋白
- 环孢素抑制未成熟脑惊厥性脑损伤大鼠多药耐药基因的剂量探讨
- 2010年
- 目的探讨环孢素对未成熟脑惊厥性脑损伤大鼠多药耐药基因表达的抑制作用及其剂量依赖性和不良反应。方法 21日龄雄性SD大鼠67只分为5组:假手术组(A组)、模型对照组(B组)、环孢素10mg.kg-1干预组(C组)、环孢素5mg.kg-1干预组(D组)、环孢素25mg.kg-1干预组(E组),22日龄时制作氯化锂-匹鲁卡品癫模型(A组除外),采用环孢素每次10mg.kg-1、5mg.kg-1、25mg.kg-1分别在造模后6h、30h、54h腹腔注射干预,观察大鼠造模72h病死率、行为变化、体质量变化、脑海马CA1区电镜神经元形态变化及多药耐药基因产物P-糖蛋白(P-gp)表达水平。结果 1.总体病死率为26.9%,B组病死率为16.7%,采用环孢素干预,最小剂量5mg.kg-1.次-1干预可显著降低病死率,达到A组水平,而中间剂量10mg.kg-1.次-1干预也可显著降低病死率至9.1%,但25mg.kg-1.次-1干预可提高病死率至38.5%。2.B组行为能力差,E组行为能力最差,而D组行为能力与A组接近。3.各组间体质量变化无明显差异。4.环孢素干预可以减轻惊厥幼鼠脑海马CA1区神经细胞水肿程度,减轻凋亡核固缩程度,减轻线粒体水肿,保护细胞间连接,但C、D、E组间差别不明显。5.B组脑海马CA1区多药耐药基因表达产物P-gp的灰度值及阳性细胞数分别为110.44±16.70及(1444.44±271.85)mm-2,环孢素干预可以使其表达显著降低,D组与C组效果比较差异无统计学意义,E组也有降低作用,虽有统计学意义,但不及C、D组作用明显。结论环孢素可以通过降低惊厥幼年雄性SD大鼠脑P-gp表达水平对未成熟的惊厥性脑损伤后多药耐药基因表达进行抑制,环孢素中小剂量应用效果明显,5mg.kg-1.次-1连用3次效果最佳,且不良反应不明显。
- 郭亚乐黄绍平李丹赵小鸽杨琳周戬平王雪莹
- 关键词：环孢素惊厥脑损伤未成熟脑
