国家自然科学基金(31171719)
- 作品数：3 被引量：5H指数：2
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- 相关机构：东北农业大学佳木斯大学更多>>
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- 相关领域：轻工技术与工程生物学更多>>
- 应用实时荧光定量PCR方法定量检测双歧杆菌对Caco-2细胞的黏附被引量：2
- 2015年
- 【目的】采用实时荧光定量PCR的方法定量分析黏附于Caco-2细胞的双歧杆菌,并建立一种快速有效分离黏附于细胞的细菌的方法。【方法】采用Triton X-100溶液处理黏附于Caco-2细胞上的菌体,确定获得最佳分离效果的处理时间;建立实时荧光定量PCR定量检测双歧杆菌的方法,获得标准曲线,进行特异性、灵敏度、重复性评价;应用建立的方法分析11株双歧杆菌对Caco-2细胞的黏附能力。【结果】Triton X-100处理黏附于Caco-2细胞的双歧杆菌的最佳作用时间为10 min。实时荧光定量PCR定量检测双歧杆菌的方法重复性好、特异性强、灵敏度高;起始模板浓度范围在104-108 CFU/m L之间具有良好的线形关系,相关系数>99%,在该浓度范围线性方程为:y=-3.345 2x+37.637 0。应用建立的方法定量分析双歧杆菌的黏附能力,与直接镜检法相比差异不显著(P>0.05),检测时间由48 h缩短至4 h。【结论】Triton X-100分离处理结合实时荧光定量PCR方法是一种快速、有效的检测双歧杆菌对Caco-2细胞黏附能力的方法。
- 杨丽梅朱德全孙娱孟祥晨
- 关键词：双歧杆菌TRITON实时荧光定量PCR
- 低pH处理对两歧双歧杆菌KLDS2.0603黏附能力的影响被引量：2
- 2012年
- 【目的】确定低pH处理对两歧双歧杆菌KLDS2.0603黏附能力及其表面物理化学性质的影响。【方法】将两歧双歧杆菌KLDS2.0603菌体在不同低pH的PBS溶液中处理一定时间后,采用平板菌落计数法和直接镜检法,测定其经历不同pH的酸性环境后的黏附能力,及其表面疏水性和自动聚集能力。【结果】不同pH的PBS溶液处理后的双歧杆菌菌体,其黏附能力均不同程度下降,除pH 5.0的处理组外,其余处理组均显著低于空白组。此外,经不同pH的PBS溶液处理后,仅pH 3.0和3.5的两处理组,双歧杆菌表面疏水性显著提高。除pH 1.0、1.5和5.0的处理组外,其余处理组的自动聚集能力均显著下降。【结论】低pH的酸性环境会降低两歧双歧杆菌KLDS2.0603的黏附能力,并且双歧杆菌的自动聚集能力和表面疏水性也发生相应变化。除pH 3.0和3.5的处理组外,三者之间呈现一定的正相关性。
- 王彦孟祥晨王丽群李馨
- 关键词：两歧双歧杆菌PH疏水性
- 消化道环境胁迫对青春双歧杆菌KLDS2.0003粘附能力影响被引量：1
- 2013年
- 确定消化道环境胁迫对青春双歧杆菌KLDS2.0003粘附能力、菌体表面性质及菌体细胞膜脂肪酸组成影响。采用体外方法模拟消化道环境,以Caco-2细胞作为粘附模型,青春双歧杆菌KLDS2.0003相继经过模拟唾液、模拟胃液以及模拟肠液处理后,测定经历模拟消化道环境前后存活率、粘附能力、自动聚集能力和表面疏水性,同时采用扫描电镜和透射电镜观察菌体形态以及采用GS-MS法测定菌体处理前后细胞膜脂肪酸组成变化。结果表明,青春双歧杆菌KLDS2.0003经模拟消化道环境胁迫后,粘附能力下降,菌体表面疏水性、自动聚集能力菌下降、菌体细胞形态发生改变,膜不饱和脂肪酸与饱和脂肪酸比例增加,而且有一种新长链不饱和脂肪酸C18:2n6c产生。结果显示,消化道环境胁迫会降低青春双歧杆菌KLDS2.0003粘附能力,同时菌体自动聚集能力和表面疏水性均降低,三者之间呈现一定相关性,此外,在消化道环境胁迫条件下,膜脂肪酸组成发生改变,诱导产生一种新长链不饱和脂肪酸C18:2n6,c推测该菌通过调节膜脂肪酸组成变化以抵抗消化道环境中不利因素。
- 孟祥晨李馨朱德全范修海
- 关键词：青春双歧杆菌粘附胁迫疏水性
