甘肃省自然科学基金(3ZS051-A25-094)
- 作品数：3 被引量：8H指数：2
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- 相关机构：兰州生物制品研究所北京生物制品研究所兰州大学更多>>
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- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位的克隆、表达及初步纯化被引量：4
- 2005年
- 为研究大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位(LTB)的佐剂活性。从大肠杆菌中调出LTB的原始基因,将该基因克隆、构建pET21b-LTB表达载体、转化大肠杆菌BL21(DE3)进行表达,并对表达产物进行初步纯化;经DNA测序、SDS-PAGE、ELISA检测,结果表明成功构建了能够稳定表达可溶性LTB的菌株,并获得初步纯化LTB的方法。为今后LTB的研究及应用奠定了基础。
- 黄思扬马超雷清蒋琳沈心亮王锐
- 关键词：纯化粘膜佐剂
- 重组大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位表达条件的优化及其佐剂作用被引量：2
- 2008年
- 目的优化重组大肠杆菌不耐热肠毒素B亚单位(LTB)的表达条件,并检测其黏膜佐剂作用。方法通过向LB培养基中添加葡萄糖(终浓度为0.5%)、低温培养诱导等方法诱导LTB的表达;采用阳离子交换法对目的蛋白进行纯化;以LTB作为佐剂进行免疫试验。结果可溶性重组大肠杆菌不耐热肠毒素(LTB)的表达量明显提高,纯化后蛋白含量达95%以上,经纯化的LTB作为三价流感裂解疫苗或gD抗原的佐剂免疫BALB/c小鼠,可提高小鼠血清及黏膜的抗体水平,且其效果与铝化剂及福氏佐剂相当或更高。结论优化了LTB的表达条件,且表达的LTB具有较强的黏膜免疫佐剂作用。
- 雷清黄思扬应莲芳梁凌宇马亚茹蒋琳
- 关键词：黏膜免疫纯化佐剂
- 热休克蛋白HSP65嵌合表达系统的构建和表达被引量：2
- 2007年
- 设计一条含(GlySer)3连接肽的引物,从BCG经PCR得到HSP65-Linker的基因片段。将该基因定向克隆入原核表达载体pET42b(+),用大肠杆菌BL21(DE3)转化,构建了pET42-LHSP65的嵌合表达载体。DNA测序正确后经IPTG诱导表达,得到可溶性目的蛋白,Western-blot也证实了此重组蛋白可与抗HSP65发生特异性免疫反应。此重组体的构建为进一步探索HSP65的免疫佐剂功效奠定了基础。
- 雷清蒋琳马超刘鹏
- 关键词：HSP65连接肽基因表达
