国家自然科学基金(30672291)
- 作品数：22 被引量：51H指数：5
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- 信号转导与转录激活因子3在脉络膜新生血管发生中的可能作用
- 2010年
- 目的观察磷酸化信号转导与转录激活因子3（STAT3）在激光诱导的大鼠脉络膜新生血管（CNV）中的表达，探讨STAT3在CNV中可能的作用。方法建立激光诱导的大鼠CNV模型，免疫荧光法观察CNV生成早期磷酸化STAT3的表达。建立细胞缺氧模型，细胞培养液中加入Janus激酶2（JAK2）特异性阻断剂AG490后培养1、3、6、12、24h。流式细胞仪检测视网膜色素上皮（RPE）细胞的增生指数，反转录聚合酶链反应（RT—PCR）检测缺氧诱导因子-1α（HIF-1α）和VEGF的mRNA表达，蛋白质免疫印迹法检测HIF-1α蛋白表达，酶联免疫吸附试验检测细胞培养液上清液中血管内皮生长因子（VEGF）的含量。结果激光光凝后3d，磷酸化STAT3高表达于大鼠CNV区域。阻断JAK2／STAT3信号转导通路后，缺氧条件下人RPE细胞随时间增生指数明显降低（t=1．472，3．566，2．391，6．420；P=0．054，0．038，0．042，0．016）。随缺氧时间增加，HIF-1α和VEGFmRNA表达逐渐增强。采用AG490阻断JAK2／sTAT3信号转导通路后，缺氧条件下人RPE细胞HIF-1α mRNA和VEGFmRNA的表达、HIF-1α蛋白的活化均受明显抑制（t=0．07，0．02，0．01，P〈0．05）；细胞培养上清液中VEGF含量显著降低（t=1．330，1．106，2．828，7．742，5．610，6．894，P=0．082，0．063，0．014，0．002，0．016，0．011）。结论STAT3可能参与了CNV的发生，这一过程部分是通过JAK2／STAT3信号转导通路调控RPE细胞HIF-1α和VEGF表达而实现的。
- 李夏王雨生朱洁杨秀梅刘敏赵炜
- 关键词：色素上皮STAT3转录因子
- 吸烟与年龄相关性黄斑变性被引量：4
- 2007年
- 吸烟是年龄相关性黄斑变性（AMD）最重要和唯一公认的可修正危险因素。吸烟可增加AMD的患病风险，促进病变发展，而且与一些遗传易感因素可能具有联合作用。其作用机制包括影响血流动力学、氧化损伤和促进新生血管形成等。吸烟在AMD发生发展中的重要作用使其成为AMD防治研究中关注的焦点之一。
- 侯慧媛王雨生
- 关键词：年龄相关性黄斑变性吸烟
- 美国眼科学会黄斑下手术临床试验介绍
- 2007年
- 黄斑下手术为近年来开展的黄斑下脉络膜新生血管（CNV）治疗的方法之一，正确评估其有效性和安全性值得重视。在各种评估黄斑下手术有效性和安全性的临床研究中，以美国医学会发起的黄斑下手术临床试验（SST）的规模和影响最大。SST包括N、B、H等3个系列研究组，分别评价了黄斑下手术治疗有CNV形成的老年性黄斑病变性、眼组织胞浆菌病以及特发性CNV的有效性和安全性。结果发现黄斑下手术对治疗CNV并无明显优势，也不能提高患者与视力相关的生活质量。
- 陈立军王雨生
- β淀粉样蛋白在玻璃膜疣形成中的作用被引量：2
- 2010年
- β淀粉样蛋白（Aβ）是由淀粉样前体蛋白在体内经过一系列酶水解后形成的.生理情况下,Aβ的生成和降解处于动态平衡中;当机体应激或众多因素刺激使这一平衡破坏时,Aβ会在眼内大量聚集,成为玻璃膜疣的主要致病成分之一.Aβ能与I因子和H因子等免疫因子相互作用,参与补体旁路途径的激活;还能与Cl相互作用,参与补体经典途径的激活,产生级联放大效应,激活下游的免疫分子和炎症分子,参与老年性黄斑变性（AMD）的形成过程.敲除表达Aβ降解酶的基因,能成功建立AMD模型;通过抑制Aβ生成及其作用,有可能成为治疗AMD的新靶点.
- 叶子王雨生
- 关键词：淀粉样Β蛋白
- 补体和补体调节系统在年龄相关性黄斑变性发生中的作用
- 2008年
- 年龄相关性黄斑变性（AMD）是老年致盲性疾病的常见原因。目前认为，补体和补体调节系统在AMD发生过程中发挥重要作用。部分补体及其调节因子与AMD发生的关系已经明确，但由于AMD的发生是多因素共同作用的结果，要完全阐明补体激活与抑制的平衡机制与AMD发生的相互关系，尚有待进行深入研究。
- 叶子王雨生
- 关键词：黄斑变性补体补体调节蛋白
- 脯氨酸羟化酶2对氧诱导视网膜病变新生血管生成的影响被引量：2
- 2011年
- 目的观察脯氨酸羟化酶2(proline hydroxylase2,PHD2)对氧诱导小鼠视网膜病变动物模型新生血管生成的影响。方法 40只7d龄的C57BL/6J幼鼠随机分为4组,即正常对照组、高氧组、300mg.kg-1和500mg.kg-1PHD2抑制剂处理组,每组各10只。后3组放入动物氧舱,在氧气含量为体积分数(75±2)%的高氧环境中连续饲养5d,正常对照组于正常大气环境中饲养。300mg.kg-1和500mg.kg-1PHD2抑制剂处理组在结束高浓度给氧后,腹腔注射不同剂量的PHD2抑制剂(黄芩素),高氧组和正常对照组给予腹腔注射生理盐水,每天1次,连续5d。于末次注射结束后处死小鼠,Western blotting法检测视网膜中PHD2蛋白的表达,视网膜铺片法观察视网膜血管的情况,HE染色后计数突破内界膜的内皮细胞核数,免疫组织化学法检测视网膜a-SMA和VEGF蛋白的表达。结果 Western blotting显示视网膜中存在PHD2蛋白的表达,且高氧组蛋白表达量明显高于正常对照组(P=0.002),正常对照组高于300mg.kg-1、500mg.kg-1PHD2抑制剂组(P=0.004、0.001)。视网膜铺片结果显示高氧组自视盘发出的血管扩张迂曲,中周部视网膜有大量新生血管生成,近视盘周围有明显的血管无灌注区;300mg.kg-1和500mg.kg-1PHD2抑制剂处理组较高氧组明显改善。突破视网膜内界膜的内皮细胞核数正常对照组、高氧组、300mg.kg-1和500mg.kg-1PHD2抑制剂处理组分别为(0.60±0.84)个、(39.40±5.17)个、(15.80±1.93)个和(6.30±1.57)个,4组比较差异有统计学意义(P<0.05),高氧组最多,正常对照组最少。免疫组织化学染色结果显示300mg.kg-1和500mg.kg-1PHD2抑制剂处理组a-SMA表达较高氧组明显增加;高氧组、300mg.kg-1及500mg.kg-1PHD2抑制剂处理组的VEGF表达量均较正常对照组明显升高,300mg.kg-1和500mg.kg-1PHD2抑制剂处理组与高氧组比较,VEGF表达量无明显降低。结论视网膜存在PHD2的表达,抑制其表达后能有效改善高氧所致小鼠视网膜血管的
- 屈晓杰王雨生张鹏储昭节
- 关键词：视网膜新生血管氧诱导视网膜病变
- 玻璃体内注射载HIF-1α shRNA质粒的PLGA纳米粒眼部转染效率
- 2009年
- 目的观察携带载缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)短发卡式小干扰RNA(shRNA)质粒(pshHIF-1α)的纳米粒转染眼部组织的可行性。方法应用聚乳酸聚乙醇酸共聚物(PLGA)包载绿色荧光蛋白(GFP)表达的pshHIF-1α,制备纳米粒,检测其粒径、包封率、载药量及体外释放情况;将48只大鼠分为4组,每组12只(12只眼),分别向玻璃体内注入10μL磷酸盐缓冲液(PBS)、空白纳米粒(1.89mg/mL)、裸质粒pshHIF-1α(0.02mg/mL)和pshHIF-1α纳米粒(1.89mg/mL)。分别在注药后3、7、14、28d观察纳米粒的眼内穿透性和基因转染情况。通过组织病理学检查,观察注射后第3天眼内组织结构的改变。结果纳米粒的载药率和包封率分别为1.06%和60.2%,平均粒径为284nm,体外释药达4周。体内实验显示,载pshHIF-1α纳米粒定向聚集于视网膜色素上皮(RPE)层,GFP表达时间持续达28d。组织病理学检查眼内未见明显炎性细胞浸润。结论纳米粒可向眼底递送质粒形式的DNA,是眼部基因治疗安全、有效的载体之一。
- 张楚王雨生吴红张朝霞蔡岩马吉献
- 关键词：基因载体PLGA纳米粒缺氧诱导因子-1Α
- Ephrin配体和Eph受体酪氨酸激酶家族在眼部血管发生中的作用
- 2008年
- 在正常发育以及多种疾病过程中血管发生都发挥着重要作用，包括肿瘤血管发生、缺血性修复以及损伤愈合等。近年来，人们逐渐关注到Eph受体和其配体在血管形成以及血管发生中的作用。Eph受体家族是最大的受体酪氨酸激酶系统，Eph受体和它们的膜锚定配体Ephrin的特点是能够介导双向信号，传递位置导向信息，作用于发育中的血管系统细胞，控制动静脉非对称地建立，从而起着装配新生血管的作用。Ephrin／Eph系统在眼部血管发生相关疾病中的作用也越来越受到关注，目前已在角膜、视网膜以及脉络膜的新生血管上发现Ephrin／Eph系统具有作用。本文介绍Ephrin配体和Eph受体酪氨酸激酶家族，综述其在眼部血管发生中的作用。
- 赵炜王雨生
- 关键词：血管发生受体酪氨酸激酶EPH受体
- 骨髓来源细胞在脉络膜新生血管生成中的作用被引量：6
- 2009年
- 目的探讨骨髓来源细胞（BMCs）在脉络膜新生血管（CNV）生成中的作用。方法将绿色荧光蛋白（GFP）转基因小鼠骨髓细胞移植给野生型C57BL／6J小鼠建立嵌合体，应用532nm倍频激光诱发嵌合体小鼠（处理组）和野生型小鼠（对照组）CNV。利用脉络膜铺片观察由GFP阳性细胞形成的新生血管；免疫荧光染色观察CNV中GFP阳性细胞是否表达血管内皮生长因子（VEGF）和碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）。结果激光光凝后第29天，脉络膜铺片显示CNV中有大量绿色的骨髓来源细胞，由其组成的血管面积约占CNV表面积的16．22％；免疫荧光染色结果显示，CNV区域的一些BMCs表达VEGF和bFGF。结论BMCs通过参与新生血管组成及分泌促血管生成因子的方式，可能在CNV发生过程中发挥着重要作用。
- 侯慧媛王雨生徐建峰
- 关键词：脉络膜新生血管化骨髓细胞血管生成诱导剂
- 整合素在脉络膜新生血管生成中的作用
- 2009年
- 整合素是一类异二聚体家族,作为细胞外基质(extracellular matrix,ECM)的受体,选择性表达于激活的内皮细胞的有腔和无腔表面,参与内皮细胞的移行、增生、分化和毛细血管样管腔结构的形成,并最终形成新生血管。在脉络膜新生血管形成过程中,整合素与多种细胞因子如碱性成纤维细胞生长因子、血管内皮生长因子、血小板衍生生长因子等,以及基质金属蛋白酶协同作用,介导细胞向细胞间和ECM的移行和黏附,并调控细胞周期。整合素及其ECM配体的结合引发一系列复杂的胞内级联信号,包括黏着斑激酶的酪氨酸磷酸化、细胞内钙离子水平增加、细胞周期蛋白合成以及早期基因表达等;阻断整合素及其配体的作用能抑制细胞生长或诱导细胞凋亡。已有的研究结果提示,整合素可能是未来治疗脉络膜新生血管的有效靶点之一。
- 张楚王雨生
- 关键词：整合素脉络膜新生血管细胞外基质
