中央高校基本科研业务费专项资金(XDJK2009C126)
- 作品数：6 被引量：28H指数：3
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- 结球甘蓝花粉类钙调素蛋白基因BoCML49的克隆及表达分析被引量：12
- 2012年
- 以结球甘蓝E1为材料,提取花粉萌发前和萌发后的混合花粉总蛋白,总蛋白双向电泳后通过MALDI-TOF-MS鉴定分析差异点,根据差异点分析结果,利用同源克隆得到甘蓝BoCML49基因707bp的cDNA片段。通过对BoCML49基因的qPCR分析表明其表达量在花粉萌发前约为萌发后的2.73倍,表明BoCML49基因在花粉萌发后表达下调。通过5-Race和3-Race分别得到550bp和721bp大小cDNA片段,最终得到结球甘蓝BoCML49全长cDNA序列,开放阅读框位于125~1078bp处,加尾信号（AATAAA）位于第1222bp处。通过cDNA推导得到的氨基酸序列分析表明,BoCML49编码317个氨基酸残基,预测分子量为33.51kD,pI为6.93,经Smart-embl预测其含2个重要的EF-hand结构,分别位于序列第150~178和第216~244位氨基酸残基处,预测结果显示其含有7个α-螺旋和10个β-折叠结构。系统发育树表明结球甘蓝BoCML49与拟南芥AtCML49和AtCML50的亲缘关系较近。BoCML49基因的原核表达得到37.55kD的融合蛋白。
- 宋明许俊强孙梓健汤青林王志敏王小佳
- 关键词：结球甘蓝花粉
- 超干处理对种子生物膜及种子活力的影响被引量：5
- 2011年
- 生物膜结构和功能的完整性与种子活力之间存在着十分密切的联系,在掌握与生物膜有关的生理生化指标的前提下,从研究超干处理对生物膜产生影响的角度出发,通过讨论两者之间的关系,可以进一步加深对超干处理如何影响种子活力的了解。
- 王爱君王志敏汤青林宋明
- 关键词：超干处理种子活力生物膜生理生化
- 结球甘蓝花粉蛋白延伸因子基因的克隆及其序列分析被引量：2
- 2013年
- 以结球甘蓝(Brassica oleracea L.var.capitata L.)E1花粉为试材,对萌发前后的花粉总蛋白进行双向电泳及差异蛋白质谱分析,发现延伸因子BoEF-Tu蛋白在花粉萌发后较萌发前表达上调。利用同源克隆得到甘蓝BoEF-Tu基因的全长cDNA序列,其长度为1 728 bp,具有一个完整开放阅读框(ORF),位于112～1 473 bp处,编码453个氨基酸残基,预测分子量为49.17 kD,等电点为6.52。生物信息学分析表明:BoEF-Tu蛋白含有9个α–螺旋结构,18个β–折叠结构,不含信号肽和跨膜区,在106～121位氨基酸残基处有1个GTP结合区域(DKAPEEKKRGITIATA)。氨基酸同源性分析表明,BoEF-Tu与拟南芥EF-TuM同源性较高,达到93%;系统进化分析表明,BoEF-Tu与拟南芥EF-Tu的亲缘关系最近。
- 王志敏牛义许俊强孙梓健丁泽琴杨修勤汤青林宋明
- 关键词：结球甘蓝花粉
- 结球甘蓝花粉膜联蛋白基因的克隆及其表达分析被引量：2
- 2012年
- 对结球甘蓝(Brassica oleracea L.var.capitata L.)花粉总蛋白双向电泳及差异蛋白质谱分析,发现膜联蛋白在花粉萌发后较萌发前表达下调。通过同源扩增和RACE等方法首次在结球甘蓝花粉中扩增得到BoAnnexin2基因的cDNA序列,该基因cDNA全长1157bp,开放阅读框为951bp,编码316个氨基酸残基,预测分子量为36.02kD,等电点6.33。BoAnnexin2编码蛋白C端有4个膜联蛋白重复序列,共2个Ⅱ型钙结合区域,在第4个钙结合区位点包含GXXXGXS(T)/DXXG基序。实时荧光定量试验表明,BoAnnexin2在甘蓝成熟未萌发花粉中的表达量是萌发45min后表达量的8倍,表明BoAnnexin2在甘蓝花粉萌发起始阶段起到重要调控作用。
- 孙梓健许俊强宋明韦静宜汤青林王志敏王小佳
- 关键词：结球甘蓝花粉膜联蛋白
- 生姜二倍体与四倍体基因组DNA的RAPD和ISSR分析被引量：7
- 2013年
- 利用RAPD和ISSR标记对生姜二倍体和四倍体的遗传差异进行研究,结果表明:71个RAPD引物和14个ISSR引物对生姜二倍体和四倍体都扩增出了条带,其中有25个RAPD引物和7个ISSR引物在二倍体与四倍体之间扩增出了差异带,并且86%的ISSR引物序列为(GA)或(AG)的简单重复序列.表明在用一定浓度秋水仙素诱导生姜体细胞染色体加倍过程中,会引起基因组DNA的核苷酸碱基序列的改变,并以腺嘌呤和鸟嘌呤组合的简单序列重复区间易形成新的结合位点.
- 王志敏牛义汤青林宋明
- 关键词：生姜四倍体RAPDISSR
- 不同含水量大葱种子贮藏中活力及抗氧化能力的研究被引量：1
- 2011年
- 对不同含水量的3个品种大葱种子常温贮藏1年后的种子活力及抗氧化能力变化进行了研究,结果表明:将大葱种子含水量由10.0%左右降至8.5%～2.5%时,大葱种子的发芽率、发芽指数、活力指数、超氧化物歧化酶、过氧化物酶和过氧化氢酶活性都有不同程度的提高,而丙二醛含量和相对电导率则有所降低,特别是种子含水量降到4.5%～2.5%时,各指标的变化与对照相比差异显著;当含水量低于2.0%时,种子活力显著下降并且抗氧化能力减弱,说明适度超干有利于大葱种子活力的提高,而3个品种间以辽葱1号大葱更适合进行超干贮藏.
- 王志敏牛义汤青林宋明李晓伟
- 关键词：大葱种子超干抗氧化
