山东省自然科学基金(Z2002C40)
- 作品数：8 被引量：38H指数：4
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- 蜂胶水提液对人脐动脉平滑肌细胞增殖作用的影响
- 2009年
- 目的观察蜂胶水提液对血管紧张素Ⅱ诱导的人脐动脉平滑肌细胞增殖作用的影响。方法贴块法培养人脐动脉平滑肌细胞,用50、100和200 mg/L蜂胶水提液进行干预。细胞计数法检测人脐动脉平滑肌细胞数量;流式细胞仪检测细胞周期;免疫细胞化学法观察增殖细胞核抗原;分光光度计检测培养液中超氧化物歧化酶及丙二醛的含量;用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记技术检测细胞凋亡。结果100 mg/L和200mg/L的蜂胶水提液能减少血管紧张素Ⅱ对细胞的增殖作用,增加G_0/G_1期细胞的百分比,降低增殖细胞核抗原阳性率,蜂胶各浓度组总超氧化物歧化酶活力升高,而丙二醛含量降低,凋亡指数降低(P<0.01)。结论一定浓度的蜂胶水提液能抑制血管紧张素Ⅱ诱导的人脐动脉平滑肌细胞增殖;机制可能与蜂胶水提液影响细胞增殖周期、抑制增殖细胞核抗原的表达、提高人脐动脉平滑肌细胞抗氧化能力有关。
- 桑慧王家富商战平李卫红姚树桐
- 关键词：细胞增殖
- 蜂胶水提液对平滑肌细胞SOD及MDA含量的影响被引量：5
- 2006年
- 目的:探讨蜂胶水提液对脐动脉平滑肌细胞过氧化物歧化酶活性及丙二醛含量的影响。方法:分光光度计测定平滑肌细胞培养液中过氧化物歧化酶(SOD)的活性及丙二醛(MDA)的含量。结果:蜂胶水提液组SOD活性较对照组有显著性差异(P<0.01),高浓度的蜂胶水提液能减少MDA的生成(P<0.01)。结论:蜂胶水提液可明显提高平滑肌细胞抗氧化性。
- 桑慧商战平王建礼王家富韩霞
- 关键词：蜂胶平滑肌细胞SODMDA
- 人脐动脉平滑肌细胞原代培养方法的比较被引量：1
- 2005年
- 目的比较人脐动脉平滑肌细胞(HUASMC)两种原代培养方法的优劣.方法分离脐动脉,剥离中膜,将其剪成小块,贴块法将小块直接接种于培养瓶中;酶解法①单用胶原酶Ⅰ(0.2%)分别消化5小时、8小时、24小时后接种于培养瓶,②分别用胶原酶Ⅰ(0.2%)消化3小时和胰蛋白酶(0.25%)消化2小时,接种于培养瓶.结果贴块法6天可以见到细胞从组织块周围游出,20～30天后可以进行传代;单用胶原酶Ⅰ消化24小时可以见到少量细胞,但由于细胞数少,无法进行传代;单用胶原酶Ⅰ消化5小时和8小时以及用胶原酶Ⅰ和胰蛋白酶联合消化均未见到贴壁生长的细胞.结论HUASMC原代培养贴块法较酶解法简便经济且成功率较高.
- 綦惠商战平王家富张铭伟
- 关键词：人脐动脉平滑肌细胞原代培养酶解法
- 大鼠淋巴滞留性脑病bcl-2、bax表达和细胞凋亡的动态变化被引量：9
- 2006年
- 目的:研究大鼠淋巴滞留性脑病模型中大脑皮层bcl-2、bax基因表达和细胞凋亡的动态变化。方法:用阻断颈部淋巴引流的方法复制大鼠淋巴滞留性脑病模型,术后1、2、3、5、7和14d处死动物,HE染色观察脑组织结构变化,TUNEL荧光标记检测原位细胞凋亡,RT-PCR检测大脑皮层凋亡相关基因bcl-2和bax的表达。结果:显微镜下见脑组织有水肿的结构变化,第5d最明显。大脑皮层TUNEL阳性细胞数和bax表达从术后2d开始增多,5d达最高峰,14d降至对照组水平。bcl-2表达于术后1d开始增高,5d达最高值,第7d下降至对照组水平。bax表达增高的程度大于bcl-2。结论:阻断颈部淋巴引流可导致淋巴滞留性脑病,大脑皮层神经细胞死亡以凋亡为主并与bcl-2和bax的表达增加有关。
- 李育娴夏作理陈连璧叶文静杨明峰孙巧玲
- 关键词：脑病细胞凋亡基因表达
- 蜂胶抗氧化性的实验研究被引量：13
- 2008年
- 目的:探讨蜂胶在动脉粥样硬化中的抗氧化作用。方法:组织块法培养脐动脉平滑肌细胞,按分组分别施加药物孵育24h后,分光光度计测定细胞培养液中过氧化物歧化酶(SOD)的活性及丙二醛(MDA)的含量。新西兰大白兔饲喂不同的饲料后,检测血清中低密度脂蛋白(LDL)及总SOD活力、MDA的含量。结果:在蜂胶水提液抑制AngⅡ诱导的平滑肌细胞增殖过程中总SOD活力增加,MDA含量降低,与AngⅡ组均差异显著(P(0.01);蜂胶能增加高脂血症兔的总SOD活力,降低LDL、MDA含量,与模型组相比,差异显著(P(0.01)。结论:在抑制动脉粥样硬化病变过程中,蜂胶具有抗脂质过氧化作用。
- 桑慧司艳红王家富商战平
- 关键词：蜂胶动脉粥样硬化抗氧化
- 在内皮素-1诱导增殖的血管平滑肌细胞中骨桥蛋白的表达被引量：4
- 2005年
- 目的观察在内皮素-1(ET-1)诱导增殖的人脐动脉平滑肌细胞(HUASMC)中骨桥蛋白(OPN)表达的变化。方法组织贴块法培养HUASMC后;随机分成5组,组1、组2、组3分别给予ET-1100nmol/L、10nmol/L、1nmol/L刺激48h,组4为不加ET-1的对照组,组5给予10μmol/LBQ123(ET-1A型受体的特异性拮抗剂)预处理后,再用10nmol/LET-1刺激48h,MTT比色法检测细胞在490nm的吸光度值(OD490),组间进行比较;免疫细胞化学方法检测OPN在不同组之间的表达,计算并比较表达的阳性率;分析OPN表达与HUASMC增殖的相关关系。结果ET-1剂量依赖性刺激HUASMC增殖,组间OD490比较有统计学意义(P<0.01),BQ123可以抑制ET-1的作用;随ET-1浓度的升高,OPN表达阳性率升高(P<0.01),给予BQ123预处理后,OPN表达的阳性率亦显著低于单独ET-1刺激组(P<0.01)和对照组(P<0.05);OPN表达阳性率与OD490值之间存在直线正相关(r=0.962,P<0.01)。结论ET-1剂量依赖性刺激血管平滑肌细胞(VSMC)增殖,在ET-1诱导增殖的VSMC中OPN表达增加,OPN表达和HUASMC增殖之间存在直线正相关关系,检测VSMC中OPN的表达,对于VSMC增殖情况有一定预测价值。
- 綦惠商战平王家富
- 关键词：内皮素-1血管平滑肌细胞骨桥蛋白
- 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3 mRNA在淋巴滞留性脑病大鼠脑皮质及海马的表达被引量：2
- 2006年
- 目的:探讨半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3mRNA在淋巴滞留性脑病大鼠脑皮质及海马中的表达情况及其与神经元凋亡之间的关系。方法:选取成年雄性Wistar大鼠88只,随机分为脑淋巴引流阻断组40只、假手术组40只及正常对照组8只。脑淋巴引流阻断组和假手术组分为术后1,3,5,7,14d5个时间点,每个时间点8只。脑淋巴引流阻断组建立淋巴滞留性脑病动物模型,在损伤后各时间点取颞顶皮质、海马区脑组织。假手术组只分离和暴露淋巴结,但不结扎淋巴管,亦不摘除淋巴结。用半定量反转录-聚合酶链反应方法观察淋巴滞留性脑病大鼠损伤后半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3mRNA的表达情况。结果:88只大鼠均进入结果分析。①在颞顶皮质,Caspase3mRNA在淋巴阻塞后3d内表达上调,以第1天表达最高,淋巴阻塞后3d内Caspase3mRNA表达比假手术组及对照组高,且有统计学意义(F=29.892,P=0.001<0.01)。淋巴阻塞3d后表达接近正常对照及假手术组。对照组与假手术组之间差异无统计学意义。②在海马,Caspase3mRNA较颞顶皮质表达上调更明显,以第1天表达最高,淋巴阻塞后5d内Caspase-3mRNA表达比假手术组及对照组高,差异有统计学意义(P<0.05),5d后表达接近正常对照及假手术组。结论:在淋巴滞留性脑病大鼠模型中神经元凋亡的发生可能与半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3mRNA的激活有关。
- 夏作理李修彬叶文静翟西菊
- 蜂胶水提液影响血管紧张素Ⅱ促血管平滑肌细胞增殖的作用被引量：8
- 2006年
- 目的:观察蜂胶水提液对血管紧张素Ⅱ诱导的人脐动脉平滑肌细胞增殖作用的影响。方法:实验于2005-03/2006-04在泰山医学院基础医学研究所完成。组织块法培养人脐动脉平滑肌细胞,取3～5代细胞进行实验。将培养的人脐动脉平滑肌细胞随机分为4组:①对照组:不加任何药物。②模型组:加入100nmol/L的血管紧张素Ⅱ。③蜂胶组:分别加入50mg/L、100mg/L、200mg/L的蜂胶水提液预处理2h后,再加入终浓度为100nmol/L的血管紧张素Ⅱ。④氯沙坦组:加入1.5μmol/L的氯沙坦预处理2h后,再加入终浓度为100nmol/L的血管紧张素Ⅱ。同步化后,按分组分别加入处理药物孵育24h,倒置显微镜下动态观察细胞形态学的变化,同时计数细胞存活率,并用血细胞计数板计数各组细胞。采用流式细胞仪检测细胞周期,并分析细胞不同周期所占比例。采用免疫细胞化学检测增殖细胞核抗原。计算增殖细胞核抗原阳性细胞百分率。增殖细胞核抗原阳性细胞百分率(%)=增殖细胞核抗原阳性细胞总数/血管平滑肌细胞总数×100%。结果:①相差倒置显微镜下观察各组细胞加药前后形态学无明显变化,细胞存活率均达95.0%以上。②模型组细胞计数高于对照组和氯沙坦组(P<0.01),100mg/L和200mg/L蜂胶组低于模型组(P<0.01);50mg/L和100mg/L蜂胶组高于氯沙坦组(P<0.01),200mg/L蜂胶组与氯沙坦组差异无显著性(P>0.05)。③模型组G0/Gl期细胞百分比低于对照组、氯沙坦组(P<0.01);100mg/L和200mg/L蜂胶组高于模型组(P<0.01);50mg/L蜂胶组低于氯沙坦组(P<0.05),100mg/L、200mg/L蜂胶组与氯沙坦组差异显著性(P>0.05)。④模型组增殖细胞核抗原阳性率高于对照组、氯沙坦组(P<0.01);100mg/L和200mg/L蜂胶组低于模型组(P<0.01),蜂胶各浓度组与氯沙坦组间差异无显著性意义。结论:血管紧张素Ⅱ诱导血管平滑肌细胞的增殖,氯沙坦能阻滞该作用;一定浓度的蜂胶水提液
- 桑慧王家富商战平李卫红姚树桐司艳红
- 关键词：蜂胶细胞计数
