国家自然科学基金(81060201)
- 作品数：20 被引量：48H指数：5
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- 慢病毒RNA干扰E2F-1对人胃癌裸鼠皮下瘤耐药性的影响被引量：5
- 2013年
- 目的观察E2F-1基因沉默的慢病毒载体E2F-1／RNAi—LV对人胃癌裸鼠皮下瘤耐药性的影响。方法将人胃癌SGC7901-顺铂（DDP）耐药细胞接种于裸鼠皮下，建立人胃癌耐药裸鼠皮下瘤模型。将成瘤的36只裸鼠随机分为E2F-1／RNAi—LV组、LV—scrRNAi组和PBS组，每组12只。隔日向3组裸鼠肿瘤内分别注射E2F—1／RNAi—LV、LV—scrRNAi或PBS，并按体重腹腔注射DDP，共9次。注射期间和处死裸鼠后测量各组裸鼠的肿瘤体积。应用TUNEL法检测肿瘤细胞的凋亡指数，应用半定量RT—PCR和Western blot法检测肿瘤组织中E2F-1、c—Myc、survivin、多药耐药基因1（MDRl）和多药耐药相关蛋白（MRP）mRNA和蛋白的表达。结果注射慢病毒后，E2F-1／RNAi—LV组肿瘤的生长速度明显减慢。处死裸鼠后，E2F-1／RNAi—LV组裸鼠的肿瘤体积为（745．13±154．42）mm^3，明显低于LV—scrRNAi组[（1988．80±171．35）mm^3]和PBS组[（1633．48±215．25）mm^3，P〈0．05]。E2F-1／RNAi-LV组肿瘤组织的凋亡指数为（27．5±9．7）％，明显高于LV-scrRNAi组[（7．0±1．1）％]和PBS组[（7．3±1．2）％，P〈0．05]。E2F-1／RNAi—LV组肿瘤组织中E2F-1mRNA和蛋白的表达量分别为0．40±0．32和0．35±0．01，明显低于LV-scrRNAi组和PBS组（P〈0．05）。E2F-1／RNAi—LV组c—Myc、survivin、MDR1和MRPmRNA和蛋白的表达量亦明显低于LV-scrRNAi组和PBS组（均P〈0．05）。结论慢病毒载体E2F-1／RNAi-LV瘤内注射可降低人胃癌SGC7901-DDP耐药细胞对DDP的耐药性,抑制人胃癌耐药裸鼠皮下瘤的生长。
- 孔凡彪王晓通谢玉波肖强
- 关键词：胃肿瘤裸鼠
- RNA干扰鼠尾同源盒转录因子2基因沉默逆转人胃癌裸鼠耐药模型耐药性的研究被引量：1
- 2013年
- 多药耐药（MDR）的产生是胃癌化疗失败的主要原因，而特异性核转录凶子鼠尾同源盒转录因子2（Cdx2）的高表达可阻碍化疗药物甲氨碟呤（MTX）破坏细胞[1]，但Cdx2沉默在胃癌多药耐药中的作用尚不明确。本实验旨在观察RNA干扰介导Cdx2基因沉默对人胃癌耐顺铂细胞SGC-7901／DDP裸鼠皮下移植瘤模型化疗敏感性的影响。
- 韦尉元孔凡彪王晓通谢玉波肖强
- 关键词：RNA干扰介导基因沉默人胃癌耐药模型裸鼠鼠尾
- Cdx2过表达对裸鼠人胃癌移植瘤生长和转移的影响被引量：4
- 2012年
- 目的观察Cdx2基因过表达对裸鼠人胃癌移植瘤生长和转移的影响。方法利用脂质体将pCMV-Cdx2-HA质粒或pCMV-HA质粒分别转染人胃癌MGC-803细胞,命名为MGC-803/Cdx2细胞或MGC-803/EV细胞。将两种细胞分别注射入裸鼠近腋右背侧皮下,待皮下成瘤后将瘤组织接种于胃,建立裸鼠人胃癌移植瘤模型:接种MGC-803/Cdx2皮下瘤的裸鼠为实验组,接种MGC-803/EV皮下瘤的裸鼠为对照组;30 d后处死裸鼠,观察移植瘤生长、转移情况,并应用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot技术检测移植瘤中Cdx2 mRNA和蛋白的表达。结果实验组肿瘤体积为(13.42±2.34)mm3,明显低于对照组的肿瘤体积(17.59±2.80)mm3(P<0.05);实验组成瘤率(73.3%)低于对照组成瘤率(86.7%);两组肿瘤转移情况比较,差异无统计学意义(P>0.05);实验组肿瘤组织Cdx2 mRNA和蛋白表达明显增加(P<0.05)。结论 Cdx2过表达抑制裸鼠人胃癌移植瘤的生长,但对肿瘤转移无明显影响。
- 廉超王晓通谢玉波肖强
- 关键词：CDX2胃癌移植瘤
- Cdx2小分子干扰RNA对胃癌细胞增殖及凋亡的影响被引量：3
- 2011年
- 目的观察Cdx2小分子干扰RNA（Cdx2-siRNA）对人胃癌MGC-803细胞增殖及凋亡的影响。方法设计合成针对Cdx2基因的siRNA寡核苷酸以及阴性对照siRNA。将人胃癌MGC-803细胞接种于培养板中，分为3组，正常对照组不作任何处理，Cdx2-siRNA组和阴性对照组分别用Lipofectamine^TM2000将Cdx2-siRNA或阴性对照siRNA转染进细胞内。应用半定量逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）和Westernblot技术检测转染24h时胃癌MGC-803细胞中Cdx2mRNA和蛋白的表达，应用噻唑蓝（MTT）比色法检测24、36、48、60、72h的细胞活力，应用克隆形成实验检测转染7d时MGC-803细胞增殖的变化，应用流式细胞仪检测转染24h时MGC-803细胞周期和细胞凋亡的变化。结果Cdx2-siRNA或阴性对照siRNA成功转染进胃癌MGC-803细胞内；Cdx2-siRNA组Cdx2mRNA和蛋白的表达量分别为（0．07±0．01）和（0．15±0．02），明显低于阴性对照组和正常对照组（P〈0．05）；Cdx2-siRNA组细胞活力和增殖能力下降，24、36、48、60、72h的吸光度值分别为（0．125±0．003）、（0．193±0．005）、（0．223±0．005）、（0．267±0．003）、（0．315±0．006），克隆形成数为（51．4±3．2），均明显低于阴性对照组和正常对照组（P〈0．05）；而且，Cdx2-siRNA组细胞凋亡率为（12．5±0．6）％，G。／G，期比例为（73．1±7．8）％，明显高于阴性对照组和正常对照组（P〈0．05）；阴性对照组和正常对照组比较，上述指标差异无统计学意义（P〉0．05）。结论Cdx2-siRNA可抑制人胃癌细胞的活力和增殖能力，其机制与诱导细胞凋亡、使细胞周期停滞有关。
- 崔建华谢玉波王晓通肖强
- 关键词：胃癌RNA干扰CDX2增殖脱噬作用
- Cdx2-siRNA对胃癌MGC-803细胞黏附能力的影响被引量：2
- 2011年
- 我们选用人胃癌MGC-803细胞为实验对象，设计合成针对Cdx2的小干扰RNA（siRNA）并转染MGC-803细胞，观察Cdx2基因表达下调后对细胞黏附能力以及PTEN表达的的影响。
- 吴锟王晓通谢玉波肖强
- 关键词：胃癌MGC-803MGC-803细胞PTEN表达CDX2表达下调
- Cdx2-RNA基因沉默转染胃癌MGC-803细胞对中药人参黄芪复方药物敏感性的影响被引量：6
- 2013年
- 目的观察携带人尾型同源盒转录因子2(Cdx2)基因沉默的重组慢病毒颗粒(Cdx2-RNAi-LV)转染人胃癌MGC-803细胞对中药人参黄芪复方药物敏感性的影响。方法采用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot检测Cdx2基因表达;MTT方法检测细胞的增殖抑制率;Giemsa染色检测细胞的克隆形成;流式细胞仪检测细胞的凋亡;细胞划痕实验检测细胞迁移能力。结果含Cdx2基因沉默的重组慢病毒颗粒转染人胃癌MGC-803细胞有效沉默Cdx2基因表达;中药人参黄芪复方能抑制人胃癌MGC-803细胞生长、抑制细胞克隆形成、诱导细胞凋亡、抑制细胞迁移;Cdx2基因沉默转染胃癌MGC-803细胞组应用中药人参黄芪复方,其细胞增殖抑制率、细胞凋亡率明显高于单用中药未转染组(P<0.05),其细胞克隆形成、细胞迁移面积均显著低于单用中药未转染组(P<0.05)。结论 Cdx2基因沉默转染人胃癌MGC-803细胞,可明显提高胃癌细胞对中药人参黄芪复方的敏感性。
- 韦尉元吴琨王晓通谢玉波肖强
- 关键词：CDX2胃癌
- miR-1284过表达对胃癌细胞中EIF4A1的影响被引量：3
- 2016年
- 目的通过验证miR-1284可能的靶基因,从而探讨miR-1284影响胃癌发生发展可能的分子作用机制。方法采用生物信息学软件预测miR-1284可能的靶基因。以慢病毒介导miR-1284过表达转染胃癌MGC-803细胞为miR-1284组(LV-miR-1284组),转染空载体慢病毒载体的细胞为阴性对照组,未转染慢病毒载体的细胞为空白对照组。运用荧光定量PCR检测各组EIF4A1基因的表达,Western blot法检测各组EIF4A1蛋白的表达,通过双荧光素酶对EIF4A1进行靶基因验证。结果与阴性对照组和空白对照组比较,miR-1284组的EIF4A1基因和蛋白的表达量下降,双荧光素酶示miR-1284能与靶基因EIF4A1的3'UTR的结合。结论 miR-1284通过作用其靶基因EIF4A1发挥生物功能学作用。
- 詹泽栩韦尉元曹稳珑余晗肖强谢玉波
- 关键词：胃癌
- 双向凝胶电泳及质谱分析法在筛选人胃癌标记物中的应用
- 2012年
- 目的初步筛选人胃癌相关抗原,为进一步认识胃癌的发生、发展机制及其早期诊断、靶向治疗提供依据。方法采用双向凝胶电泳及免疫印迹法分离人胃癌组织的总蛋白质,以PD Quest 8.0软件分析图谱;用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱及蛋白质数据库搜索对差异蛋白点进行鉴定。结果获得分辨率高、匹配性好的人胃癌组织总蛋白双向凝胶电泳图谱,图像分析显示3块胶的点数为789±27、匹配点数为684±21、匹配率为86.7%;获得高分辨率的免疫印迹反应图谱,图像分析找出差异反应蛋白质19处,质谱鉴定共得到11种蛋白质(包括结蛋白、β微管蛋白、波形蛋白及胶转蛋白等)。结论利用血清蛋白质组分析可初步筛选、鉴定11种人胃癌相关抗原,此对进一步认识胃癌的发生、发展机制及其早期诊断、靶向治疗提供了依据。
- 孔凡彪王连振谢玉波肖强
- 关键词：双向凝胶电泳肿瘤标记物
- SOX2和CDX2在胃癌发生中的作用及相关性研究进展被引量：2
- 2012年
- 胃黏膜肠上皮化生（Intestinal metaplasia，IM）是肠型胃癌发病机制Correa惫级联反应的一个中间步骤，被认为是一种癌前病变，其机制尚未详细阐明。若想预防IM发展为胃癌，就有必要研究IM向胃癌发展过程中的相关基因。现对性别决定区Y框蛋白2（SRY—related high—mobility group box 2，SOX2）和尾型同源盒转录因子2（CDX2）在胃癌发生中的作用及相关性研究进展综述如下。
- 孔凡彪肖强
- 关键词：SOX2CDX2肠上皮化生
- 转录因子CDX2过表达对人胃癌SGC-7901细胞增殖和细胞周期的影响被引量：6
- 2014年
- 目的:探索CDX2过表达对人胃癌SGC-7901细胞增殖、生长和细胞周期的影响及其分子机制。方法:采用携带CDX2基因的重组慢病毒颗粒(LV-CDX2-GFP)感染SGC-7901细胞,作为实验组(LV-CDX2-GFP组);以对照慢病毒颗粒(LV-GFP)感染SGC-7901细胞,作为阴性对照组(LV-GFP组);空白对照组常规培养,不做任何处理。分别采用CCK-8法检测细胞的增殖活力,流式细胞术检测各组细胞周期的分布,半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blotting技术检测细胞中CDX2、Bax、Bcl-2、cyclin D1和survivin mRNA和蛋白的表达。结果:与LV-GFP组和空白对照组比较,LV-CDX2-GFP组细胞增殖活力明显降低(P<0.05),G0/G1期所占比例上升(P<0.05),Bcl-2、cyclin D1和survivin mRNA和蛋白的表达降低(P<0.05),Bax mRNA和蛋白的表达上调(P<0.05),而LV-GFP组与空白对照组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:慢病毒介导的CDX2过表达抑制胃癌细胞增殖和生长,使细胞周期停滞在G0/G1期,其机制可能与CDX2过表达使胃癌细胞Bcl-2、cyclin D1、survivin表达下调和Bax表达上调有关。
- 曹稳珑韦尉元张笑石罗文严林海谢玉波肖强
- 关键词：SGC-7901细胞
