福建省科技计划重点项目(2009Y0028)
- 作品数:6 被引量:31H指数:4
- 相关作者:林燕萍林煜吴银生黄云梅卢天祥更多>>
- 相关机构:福建中医药大学福建省泉州市第一医院厦门大学更多>>
- 发文基金:福建省科技计划重点项目国家自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 相关因素对破骨细胞功能活性影响的研究进展被引量:3
- 2011年
- 破骨细胞作为骨吸收的主要细胞,其活性及骨吸收功能受激素、细胞因子的作用和调节。因此主要就激素、细胞因子及中药对破骨细胞功能活性的影响进行回顾和综述。
- 段晓敏吴银生林丽琼林燕萍
- 关键词:破骨细胞功能活性
- 人参皂甙Rg1与钛微粒对大鼠颅骨成骨细胞的影响被引量:3
- 2013年
- 目的:探讨人参皂甙Rg1与钛微粒对大鼠颅骨成骨细胞的影响,为人工关节假体松动的防治提供新思路。方法:收集、纯化新生SD大鼠颅骨成骨细胞,筛选钛微粒,配制钛微粒浸提液,进行内毒素检测后,将培养的第3代成骨细胞以1×105个.mL-1的密度传代接种于5组培养液中,即正常组(含10%胎牛血清的DMEM培养基)、钛微粒组(体积比为0.1%的钛微粒混悬液+含10%胎牛血清的DMEM培养基)、钛+高Rg1组(体积比为0.1%的钛微粒混悬液+终浓度为100μg.m-1的人参皂苷Rg1+含10%胎牛血清的DMEM培养基)、钛+中Rg1组(体积比为0.1%的钛微粒混悬液+终浓度为50μg.m-1的人参皂苷Rg1+含10%胎牛血清的DMEM培养基)、钛+低Rg1组(体积比为0.1%的钛微粒混悬液+终浓度为25μg.m-1的人参皂苷Rg1+含10%胎牛血清的DMEM培养基)。连续培养24 h后,观察成骨细胞形态;采用酶联免疫吸附法检测细胞培养液中前列腺素E2、肿瘤坏死因子α、白细胞介素6、白细胞介素1及白细胞介素1受体拮抗剂的浓度;采用实时荧光定量法检测成骨细胞中环氧化酶2mRNA、肿瘤坏死因子αmRNA的表达;采用Western Blotting法检测成骨细胞中环氧化酶2蛋白的表达。结果:5组成骨细胞培养液前列腺素E2光密度值的差异有统计学意义(F=244.895,P=0.000);钛微粒组、钛+高Rg1组、钛+中Rg1组均高于正常组[(53.362±0.307),(41.048±0.431),(38.998±0.234),(31.687±0.466),P=0.000,P=0.000,P=0.000];钛+高Rg1组、钛+中Rg1组、钛+低Rg1组(32.501±0.124)均低于钛微粒组(P=0.000,P=0.000,P=0.000);钛+低Rg1组低于钛+高Rg1组、钛+中Rg1组(P=0.000,P=0.000);钛+高Rg1组高于钛+中Rg1组(P=0.000);正常组与钛+低Rg1组比较,差异无统计学意义(P=0.168)。5组成骨细胞培养液肿瘤坏死因子α光密度值的差异有统计学意义(F=72.340,P=0.000);钛微粒组、钛+高Rg1组、钛+中Rg1组、钛+低Rg1组均高于正常组[(50.121±0.532),(49.675±0.336),(46.431±0.245),(42.521±0.5
- 林煜张怡元冯尔宥吴银生林燕萍
- 关键词:成骨细胞细胞培养技术人参皂甙细胞因子类环氧化酶2
- 健骨颗粒对体外破骨细胞整合素α_V及β_3 mRNA表达的影响被引量:5
- 2012年
- 目的:探讨补肾健脾中药健骨颗粒对体外破骨细胞整合素(Itg)αV、β3mRNA表达的影响。方法:采用破骨前体细胞系诱导培养法,通过M-CSF和RANKL诱导剂诱导RAW264.7细胞,分化为成熟破骨细胞。分别用健骨颗粒含药血清和生理盐水血清干预,运用实时荧光定量PCR法检测ItgαV、β3mRNA表达,并取骨片行甲苯胺蓝染色,骨陷窝和骨吸收面积计算分析。结果:经M-CSF和RANKL诱导后,RAW264.7细胞的形态特征、TRAP染色均符合成熟破骨细胞特异性表现;含药血清组破骨细胞ItgαV、β3mRNA表达水平明显低于生理盐水血清组(P<0.05),同时骨磨片的骨吸收陷窝数和面积亦呈同样变化趋势。结论:RAW264.7细胞经诱导分化后可以获取成熟破骨细胞;健骨颗粒能有效抑制破骨细胞Itgαv、β3 mRNA表达,影响破骨细胞功能活性。
- 林燕萍何嘉承佘家姮巫阳生吴银生林煜黄云梅黄美雅
- 关键词:健骨颗粒破骨细胞
- 健骨颗粒对成骨细胞分化的影响被引量:16
- 2012年
- 目的:观察健骨颗粒对成骨细胞分化过程的影响。方法:取第3代SD大鼠颅骨成骨细胞,生理盐水血清组加入生理盐水血清;含药血清组加入最佳浓度的健骨颗粒颗粒含药血清;MTT法检测最佳含药血清浓度;运用采用ELISA法检测成骨细胞OCN的表达,采用比色法测羟脯氨酸(HYP)、碱性磷酸酶(AKP),实时荧光定量PCR-SYBR GREEN法检测核心结合因子(Cbfα1)、I型胶原(Col I)、成骨转录因子(OSX)mRNA的表达。取第4代细胞采用茜素红染色法染色矿化结节。结果:MTT法检测显示含药血清最佳浓度为20%;钙化结节观察显示含药20%组最先出现矿化结节,结节数量增多;含药血清组细胞液内OCN、AKP和HYP含量高于生理盐水血清组(P<0.05);Real-time PCR检测结果显示含药血清组Cbfα1、ColⅠ、OSX基因mRNA的相对表达水平明显高于生理盐水血清组(P<0.05)。结论:健骨颗粒含药血清能提高体外培养成骨细胞中矿化结节的数量、AKP、HYP、OCN的含量、ColⅠ、Cbfα1、OSX mRNA的表达,促进成骨细胞增殖,加快细胞分化。
- 林煜吴银生卢天祥黄云梅林燕萍
- 关键词:成骨细胞细胞分化骨质疏松健骨颗粒
- 健骨颗粒促进成骨细胞增殖的分子机制被引量:10
- 2013年
- 背景:ERK是依赖于Ras途径激活的一个蛋白激酶,在成骨细胞增殖和分化过程中发挥重要作用。而PD98059是MEK特异性抑制剂,它可通过抑制MEK的活性来抑制ERK的磷酸化,从而起到阻断ERK信号通路的作用。目前有关ERK在大鼠成骨细胞增殖和分化过程中的作用研究甚少。ERK在健骨颗粒促进大鼠成骨细胞增殖和分化过程中调控的作用更未被阐明。目的:观察ERK信号转导通路在健骨颗粒促成骨细胞增殖和分化过程中的作用。方法:取第3代SD大鼠头盖骨成骨细胞,空白组加入生理盐水血清;中药组加入最佳浓度的健骨颗粒含药血清;阻滞剂组添加PD98059阻断剂,中药加阻断剂组添加PD98059阻断剂与健骨颗粒含药血清。用MTT法测定细胞的增殖能力,比色法测碱性磷酸酶、羟脯氨酸水平。收集细胞实时荧光定量PCR-SYBRGREEN法检测Cbfa1、Ⅰ型胶原、OSXmRNA的表达,Westrenblot法检测成骨细胞ERK的表达情况。结果与结论:添加PD98059阻断剂后,阻滞剂组和中药加阻滞剂组中ERK的表达显著低于空白组和中药组。阻断剂组的成骨细胞内碱性磷酸酶、羟脯氨酸的表达以及Cbfa1、Ⅰ型胶原、OSXmRNA表达显著低于空白组和中药组。ERK在健骨颗粒促进大鼠成骨细胞增殖和分化过程中发挥重要作用,ERK信号通路可能是健骨颗粒促进成骨细胞增殖和分化的主要途径。
- 林煜卢天祥吴银生黄云梅林燕萍
- 关键词:骨组织构建PD98059健骨颗粒成骨细胞增殖CBFA1OSX
- p38MAPK通路在健骨颗粒促成骨细胞早期分化中的作用被引量:4
- 2010年
- 目的观察p38MAPK信号转导通路在健骨颗粒促进体外培养成骨细胞早期分化过程中的作用。方法采用酶消化法分离、培养SD大鼠成骨细胞,分4组进行干预:对照组(加入生理盐水血清)、阻断剂组(加入p38MAPK的阻断剂SB202190)、中药组(加入健骨颗粒含药血清)和中药加阻断剂组(加入健骨颗粒含药血清和SB202190),运用化学比色法检测上清液中碱性磷酸酶(AKP)活性及羟脯氨酸(HYP)含量,实时荧光定量PCR-SYBR GREEN法检测成骨细胞Ⅰ型胶原(ColⅠ)的表达。结果在AKP活性、HYP含量及ColⅠmRNA表达3项指标上,中药组>中药加阻断剂组>对照组>阻断剂组,各组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论体外培养大鼠成骨细胞的早期分化与p38MAPK信号转导通路有关;健骨颗粒含药血清能促进成骨细胞的早期分化,但这一作用仅部分通过p38MAPK信号通路实现。
- 吴银生林煜卢天祥郑良朴陈旭征林燕萍
- 关键词:P38MAPK血清学试验
- 健骨颗粒对体外破骨细胞整合素αV、β3mRNA表达的影响
- 破骨细胞是骨吸收的主要细胞,破骨细胞的数量和功能直接关系到骨重建,因此抑制破骨细胞的数量、活性及功能是防治骨质疏松研究的一个重点。近年来研究发现,整合素(Itg)αV、β3在破骨细胞性骨吸收中发挥了重要作用,作为抑制骨吸...
- 林燕萍何嘉承佘家姮巫阳生吴银生林煜黄云梅黄美雅
- 关键词:健骨颗粒破骨细胞
- 文献传递