国家自然科学基金(30170048)
- 作品数：3 被引量：6H指数：2
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- β3整合素酵母双杂交载体的构建及鉴定被引量：1
- 2005年
- 根据Genebank,设计β3膜外区引物,通过RT PCR方法扩增β3片段,然后克隆入RRS酵母双杂交载体——pYesM△playA中,构成猎物.限制性内切酶酶切鉴定表明载体构建正确,β3整合素测序正确.表明成功扩增出人β3整合素基因胞外区,构建获得β3pYesM△playA酵母表达载体.用乙酸锂法,将重组子转染至酵母温度敏感株cdc252,检测其对RRS系统的激活作用.自激活试验为阴性表明β3整合素不能自激活cdc252在36℃生长,表明该载体可用于酵母双杂交检测β3整合素与汉坦病毒受体结合蛋白(VAP)间相互作用.为进一步研究β3整合素在病毒感染中的作用奠定了基础.
- 白文涛张芳琳吴兴安于澜史梦远胡刚王海涛徐志凯
- 关键词：汉滩病毒整合素酵母双杂交
- 整合素β_3与汉坦病毒囊膜糖蛋白在RRS系统中的相互作用被引量：2
- 2009年
- 目的:采用RRS酵母双杂交系统,研究人整合素β3与汉坦病毒囊膜糖蛋白的相互作用,进一步揭示汉坦病毒入胞机制。方法:大量制备前期构建的β3-pYesM△PolyA、G1-Met和G2-Met质粒,共转染至酵母温度敏感株cdc25-2,进行双杂交鉴定。结果:双杂交结果表明,β3可与汉坦病毒囊膜糖蛋白G2在酵母菌中相互作用,而不与G1相互作用。结论:在汉坦病毒与整合素β3受体相互作用的过程中,汉坦病毒囊膜糖蛋白G2可能起到主要作用。
- 白文涛胡刚司瑞史梦远王海涛吴兴安徐志凯张芳琳
- 关键词：汉坦病毒整合素Β3酵母双杂交
- 汉滩病毒糖蛋白G2酵母双杂交诱饵载体的构建及初步鉴定被引量：5
- 2005年
- 目的利用Ras募集系统(RRS),构建并鉴定含汉滩病毒囊膜糖蛋白G2的诱饵载体。方法将汉滩病毒76-118株囊膜糖蛋白G2基因与Ras基因连接,构建嵌合基因Ras-G2及Ras-G2’(G2’无前导肽序列)。将两个嵌合基因分别克隆入酵母表达载体pMet25,并转化至酵母温度敏感株cdc25-2,检测其对RRS系统的激活作用。结果限制性内切酶酶切鉴定表明,Met-G2和Met-G2’载体构建正确。激活试验结果为阴性。结论Met-G2和Met-G2’载体可用于从cDNA文库中筛选汉滩病毒受体。
- 白文涛张芳琳吴兴安胡刚于澜史梦远王海涛徐志凯
- 关键词：汉滩病毒酵母双杂交
