江苏省普通高校研究生科研创新计划项目(CXZZ12-0323)
- 作品数：1 被引量：0H指数：0
- 相关作者：黄捷陈海姚文兵田浤更多>>
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- 发文基金：中央高校基本科研业务费专项资金江苏省普通高校研究生科研创新计划项目国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 基于神经网络和遗传算法的非天然氨基酸突变蛋白的培养优化
- 2013年
- 非天然氨基酸定点改构技术已被广泛应用于蛋白质结构与功能研究以及新药开发等,然而常用的无机盐培养基营养匮乏导致突变蛋白的产量过低,严重限制了该技术的进一步应用。相比传统的优化方法,文章结合了人工神经网络以及遗传算法,更方便、更准确地对大肠杆菌发酵突变蛋白的培养条件进行了优化。试验以引入对乙酰基苯丙氨酸的尿酸酶作为模式蛋白,以尿酸酶的酶活测定直观反映蛋白表达量,对培养条件中4个因素进行了摸索并优化,最终获得了最佳培养条件为:甘油1.04%、非天然氨基酸溶液1 mmol/L、金属离子综合液0.86×、IPTG 0.5 mmol/L,并且利用优化后的培养条件发酵获得的尿酸酶产量较未优化前提高了14%。并且通过测定尿酸酶酶活的精确比较,验证了ANN方法较响应面法在优化复杂的非线性生物工艺方面的优势。本试验的顺利完成,不仅提高了引入对乙酰基苯丙氨酸的尿酸酶的产量,同时也为其他非天然氨基酸定点引入蛋白的发酵培养基优化提供了重要参考。
- 黄捷田浤陈海姚文兵
- 关键词：人工神经网络遗传算法非天然氨基酸尿酸酶培养基优化
