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超声微泡介导ABCB1a基因siRNA质粒转染的效率及对ABCB1a和P-gp表达的影响: 2012年; 目的研究超声微泡介导ABCB1a基因siRNA质粒转染L2RYC细胞的效率以及对ABCB1a水平和P-糖蛋白(P glycoprotein,P-gp)表达的影响。方法制备脂质微泡;设计4对siABCB1a序列,并构建4种真核表达质粒pSES-siABCB1a;转染L2RYC细胞(单纯质粒组、质粒+微泡组、质粒+超声组、质粒+微泡+超声组),另设空白对照组。采用流式细胞术检测质粒的转染效率;实时荧光定量PCR及Western blot检测转染后L2RYC细胞中ABCB1a基因及P-gp的表达。结果 4种pSES-siABCB1a质粒经PCR、双酶切及测序证实构建正确;质粒+微泡+超声组pSES-siABCB1a质粒可高效转染L2RYC细胞,可见荧光表达,转染效率为(49.35±5.89)%;转染后ABCB1a基因mRNA及P-gp的表达均明显降低(P<0.05)。结论超声微泡可促进外源基因体外转染L2RYC细胞,siABCB1a能有效抑制ABCB1a基因和P-gp的表达。; 何昀李奇林温晟刘东尧李明勇王强魏光辉; 关键词：超声微泡转染 P-糖蛋白

BMP9和VEGF联合诱导小鼠间充质干细胞成骨分化的体外研究被引量：1: 2015年; 目的:探讨重组腺病毒介导的骨形态发生蛋白9(bone morphogenetic protein 9,BMP9)和血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)共感染对骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)成骨分化的影响。方法:将重组腺病毒介导的BMP9和VEGF分5组感染小鼠间充质干细胞C3H10T1/2,Ad-BMP9组、Ad-VEGF组、AdVEGF+Ad-BMP9组、空载体腺病毒组和空白组,感染7 d后,real-time PCR检测BMP9和VEGF的m RNA水平,real-time PCR检测成骨指标骨钙蛋白(osteocalcin,OC)、骨保护素(osteoprotegerin,OPG)、骨桥蛋白(osteopontin,OPN)的m RNA水平,Western blot检测OPN蛋白的表达,各组细胞行碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性的定量检测、ALP染色和钙盐沉积的检测。结果:BMP9和VEGF在Ad-VEGF+Ad-BMP9组高效共表达,OC、OPG、OPN m RNA水平和OPN蛋白水平在Ad-BMP9组和Ad-VEGF+Ad-BMP9组的表达明显高于其他各组(P﹤0.05),且在Ad-VEGF+Ad-BMP9组表达最高(P﹤0.05)。Ad-VEGF+AdBMP9组的ALP活性、ALP染色和钙盐沉积明显高于其他各组(P﹤0.05)。结论:联合VEGF可明显增强BMP9诱导C3H10T1/2细胞成骨分化能力。; 贺引何昀; 关键词：血管内皮细胞生长因子成骨分化

白血病儿童生存质量影响因素及国内外研究进展被引量：13: 2015年; 通过文献检索得到关于白血病儿童生存质量(quality of life,QOL)影响因素及研究现状的相关中文文献24篇,英文文献52篇。分析国内外文献,得出3个领域共19个方面的影响因素,主要为:(1)疾病领域:疾病的初次诊断、确诊年龄、患病时间和年住院次数、疾病阶段、疾病治疗等;(2)环境领域:地域及文化环境、社会支持、医务人员的信息支持、家庭支持等;(3)生活方式:运动锻炼、饮食控制等。分别对国内外的影响因素进行回顾性分析,探讨我国白血病儿童QOL影响因素研究领域的不足,为国内进一步探索指明方向,同时为临床医务工作者制定合理的干预措施提供参考。; 石林莫霖何昀刘洋王紫娟; 关键词：白血病儿童影响因素干预措施

小干扰RNA抑制L2RYC细胞MDR1表达及逆转对长春新碱的耐药性被引量：2: 2012年; 目的研究携带多药耐药基因(MDR1)小干扰RNA(siMDR1)的真核表达质粒对L2RYC卵黄囊瘤细胞株中MDR1基因及蛋白表达的抑制效果,并观察siMDR1作用前后细胞对长春新碱(VCR)耐药性的变化。方法设计4对特异性针对大鼠MDR1的siRNA序列,分别与pSES-HUS质粒重组获得pSES-siMDR1真核表达质粒,通过脂质体转染到L2RYC细胞中,用实时荧光定量PCR及Western blot检测转染后MDR1的mRNA及蛋白表达。转染后的细胞中再加入不同浓度的VCR,用MTT法检测吸光度,并计算出各组半数抑制浓度(IC50)值。结果 4对siMDR1分别转染均能不同程度地抑制L2RYC细胞MDR1基因表达,pool组MDR1的相对表达量最低(0.396±0.080);MDR1蛋白表达也能被有效抑制;经不同siMDR1转染的细胞加入VCR后细胞增殖被抑制,IC50降低,pool组最显著为(1.632±0.423)mg/L,与其余各组比较有明显差异(P<0.05)。结论 pSES-siMDR1真核表达质粒能有效抑制MDR1基因和蛋白的表达,MDR1表达被抑制后L2RYC细胞对VCR的敏感性增加。; 何昀刘东尧温晟李明勇王强华燚魏光辉; 关键词：多药耐药基因卵黄囊瘤长春新碱

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国家自然科学基金(81001030)