广东省科技计划工业攻关项目(2010B031600038)
- 作品数：2 被引量：0H指数：0
- 相关作者：陈俊张滨王博齐涛陈征更多>>
- 相关机构：中山大学附属第三医院云南省第一人民医院更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目国家自然科学基金广东省医学科学技术研究基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 大鼠PnNOS基因修饰脂肪源性干细胞的构建
- 2014年
- 目的构建过表达大鼠阴茎神经源性一氧化氮合酶(PnNOS)基因大鼠脂肪源性干细胞(ADSCs),为基因修饰ADSCs移植治疗勃起功能障碍(ED)大鼠模型提供种子细胞。方法获取大鼠PnNOS基因,并与线性化的腺病毒真核表达载体pDC315-EGFP定向克隆连接。构建正确的pDC315-PnNOS-EGFP穿梭质粒转染293 T细胞,采用Western Blot检测PnNOS基因在293 T细胞中的表达情况。利用AdMax腺病毒包装系统包装产生重组腺病毒,包装后扩增纯化并测定病毒滴度。PnNOS基因重组腺病毒转染大鼠ADSCs,观察GFP表达情况和Western Blot检测PnNOS基因表达情况。结果经PCR鉴定、限制性酶切分析、测序鉴定和目的质粒Western Blot表达检测鉴定,证实pDC315-PnNOS-EGFP重组腺病毒载体构建成功。重组腺病毒包装成功且病毒滴度为5.0×109 PFU/ml。Western Blot于大鼠ADSCs中检测到约161 KDa大小条带,其与PnNOS蛋白分子量大小基本相一致。结论大鼠PnNOS基因修饰的ADSCs构建成功,从而为基因修饰ADSCs移植治疗ED提供了良好的基因工程细胞。
- 陈俊胡志明转黎张滨肖恒军齐涛王博黄展森
- 关键词：脂肪源性干细胞重组腺病毒勃起功能障碍
- 氢气治疗缺血/再灌注损伤相关疾病的研究进展
- 2012年
- 氢气是属于生理性惰性气体,溶解度低,不能被机体大量吸收,因此,氢气在高等生物体内的作用一直没有重视。自2007年Ohsawa等[1]发现氢气可以通过选择性的中和羟自由基对氧化应激细胞损伤、
- 陈征陈俊
- 关键词：氢气缺血再灌注损伤
