国家自然科学基金(30672314)
- 作品数：7 被引量：13H指数：2
- 相关作者：李德懿李树波章立群葛锡锐姜茜更多>>
- 相关机构：上海交通大学医学院附属第九人民医院中国科学院上海生命科学研究院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市教育委员会重点学科基金上海-联合利华研究与发展基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 机械损伤大鼠结合上皮后的组织修复观察被引量：1
- 2009年
- 目的:观察两种机械方式破坏大鼠结合上皮(JE)后的组织修复过程。方法:12只健康SD大鼠分别用探针、龈下刮治器损伤左、右下前牙JE,于2、7、14、21d处死大鼠,HE、PCNA染色,镜下观察计数。结果:第2天大量炎细胞浸润,上皮PCNA阳性细胞散在分布;第7天炎症减轻,上皮PCNA阳性率开始增加,增殖并部分和牙面贴附;14d纤维组织增殖明显,上皮增厚;21dJE基本修复。结论:龈下刮治对牙周损伤比探损伤重;结缔组织的快速增殖可能会阻止LJE形成。
- 章立群李德懿
- 关键词：结合上皮增殖牙周愈合
- 人结合上皮细胞体外培养与冻存方法的改良被引量：4
- 2007年
- 目的:改良人结合上皮(junctional epithelium,JE)细胞的分离培养及冻存方法。方法:取正畸拔除的牙周组织健康的前磨牙,沿龈缘剪去冠方1mm左右的沟内上皮,用无菌11号刀片紧贴牙面刮下、剪碎JE组织,简化培养操作步骤。取第2代JE细胞,加入冻存液,按设定的降温程序(从0℃开始,以每分钟下降1.5℃速度下降至-18℃,保持5min;再以每分钟下降20℃的速度降至-80℃,然后投入-196℃液氮罐)冻存细胞,40℃水浴复苏,进一步研究JE细胞的形态、增殖、鉴定及复苏后存活率等生物学活性。结果:不用Dispase冷消化,采用0.1%胰蛋白酶-0.02%EDTA消化,同样可成功地培养人JE细胞;JE细胞复苏后的存活率为(93.87±3.11)%,生长状况良好,与第2代细胞相似;免疫细胞化学染色显示,培养的JE细胞角蛋白-19(cytokeratin-19,CK19)表达强阳性,而波形丝蛋白(vimentin)表达也为阳性。结论:改良的JE分离培养与冻存方法可行,JE表型在体内和体外并非完全一致,可能与细胞生长的底物有关。
- 李树波李德懿葛锡锐
- 关键词：结合上皮细胞培养细胞冻存免疫细胞化学
- 人牙龈结合上皮和口腔龈上皮细胞的附着生长特性比较被引量：2
- 2008年
- 目的比较牙龈结合上皮（junctional epithelium，JE）与口腔龈上皮（oralepithelium，OE）细胞的生长附着特性，观察附着结构的形成过程，为牙周附着的形成提供实验依据。方法人JE和OE取自正畸或阻生原因拔除的牙周健康牙，采用酶消化法和无血清角质细胞培养液分离培养细胞。将5×10^8个／LJE细胞1ml接种到放置于24孔板的预处理5m×3mm×1mm牙骨质片上（每孔3片，共21片），于37℃5％CO2培养箱中复合培养，1～14d内取样本，透射电镜下观察附着结构的形成；同法以人OE细胞一牙骨质片复合培养作对照研究。结果JE细胞形态多样，排列散乱，CK19表达强阳性；OE细胞呈多边形或角形，“铺路石”状排列，仅少量OE细胞CK19阳性。JE细胞-牙骨质片复合培养1～3d，牙片上附着细’胞少，9d时接触牙片的细胞膜局部出现少量电子致密沉积物，11—14d出现复层生长，与牙面接触处可见半桥粒样结构；而OE细胞一牙骨质片复合培养1—3d牙骨质片上细胞较多，部分已伸展成扁平形，7d时细胞膜和牙面间出现大量颗粒状电子致密沉积物，9d时细胞呈复层生长，可见半桥粒样结构。结论人JE细胞是一种不同于OE细胞的未成熟、低分化细胞，在同样条件下体外培养的JE细胞在牙片上的生长和附着均较OE细胞慢，其对牙面的附着强度值得深入研究。
- 李德懿王丽珍姜茜张秀丽张濒
- 关键词：牙龈细胞培养技术
- 表皮生长因子对结合上皮和牙龈上皮体外损伤修复的影响被引量：1
- 2008年
- 目的:研究表皮生长因子(epidermal growth factor,EGF)对结合上皮(junctional epithelium,JE)和牙龈上皮(gingival epithelium,GE)体外损伤后细胞修复和增殖的影响。方法:采用RT-PCR和免疫细胞化学方法,分别检测表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)mRNA和蛋白在JE和GE中的表达;制备细胞爬片,待生长融合至单层时,于玻片中央作宽为3mm的损伤区,然后加入含有EGF(20ng/mL)的条件培养液继续培养,直接加新鲜培养液作为阴性对照。在损伤后第5、9和12天,分别作HE和增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)染色,计算细胞修复率及PCNA阳性率,采用SAS6.12软件也进行统计学分析。结果:RT-PCR显示,JE表达EGFR mRNA,与GE之比为1:1.2;EGFR蛋白在两者表达均为阳性。在第9天,EGF促进GE和JE损伤后的细胞增殖,与阴性对照组比较,均有显著性差异(P<0.05),但GE和JE两级间无显著差别(P>0.05)。另外,EGF也可以促进GE和JE损伤后的细胞修复,在第9和12天,GE的修复速度显著快于JE(P<0.05)。结论:JE和GE细胞均存在EGFR,EGF对两者体外损伤后的细胞修复与增殖具有调节作用。
- 李树波李德懿
- 关键词：结合上皮牙龈上皮表皮生长因子表皮生长因子受体
- 长结合上皮和结合上皮生物学特性的比较被引量：3
- 2009年
- 目的:体外培养长结合上皮(long junctional epithelium,LJE)细胞,研究其生物学特性并与结合上皮细胞(junctional epithelium,JE)进行比较。方法:LJE取自慢性牙周炎患者翻瓣手术切除的标本,无菌剪刀剪去沟内上皮,采用酶消化法和无血清的角化上皮细胞培养液培养。JE取自健康正畸牙或阻生牙,同法培养。采用细胞分析仪、流式细胞仪和激光共聚焦显微镜比较2种细胞在形态、大小、细胞活力、分子表达及增殖凋亡上的差异。采用SPSS11.5软件包对数据进行独立样本t检验。结果:LJE和JE细胞形态相似,LJE活力低于JE细胞但不存在统计差异(P>0.05)。LJE细胞直径为(19.03±0.19)μm,体积为(4.29±0.19)×103fL;JE细胞直径为(17.16±0.95)μm,体积为(3.20±0.52)×103fL,2种细胞大小有显著差异(P<0.05)。LJE细胞的倍增时间比JE细胞长。CK19在LJE中表达比JE细胞弱,而CK6、CK13在2种细胞中的表达相似。与对照组相比,LJE细胞的早期、晚期凋亡率分别是(4.62±2.16)%和(9.46±1.84)%,而JE细胞分别是(0.47±0.33)%和(3.84±0.98)%,2组细胞的凋亡率有显著差异(P<0.05)。结论:LJE和JE细胞在大小、CK19表达、增殖、凋亡上存在差异,对进一步了解LJE的生物学特性和牙周炎损伤、修复过程有一定意义。
- 章立群李德懿
- 关键词：细胞培养角蛋白增殖凋亡
- 牙龈上皮细胞的抗菌防御作用被引量：2
- 2008年
- 牙龈上皮细胞不仅具有屏障作用,还具有先天免疫抗菌功能,如牙龈上皮细胞表面受体的信号传递、分泌抗菌多肽、蛋白酶和细胞因子等。下面就Toll样受体、抗菌多肽或蛋白、细胞因子或趋化因子、蛋白酶等与牙龈上皮细胞关系的研究进展作一综述,旨在加强对牙龈上皮细胞防御机制的认识。
- 章立群李德懿
- 关键词：牙龈上皮细胞TOLL样受体抗菌多肽细胞因子
- 结合上皮在牙周防御反应中的作用被引量：1
- 2007年
- 结合上皮是龈牙结合部的牙龈上皮组成部分,呈领圈状紧密附着于牙面。它独特的解剖位置使得其在组织内环境稳定和抵抗微生物及代谢产物中具有重要作用。研究表明,结合上皮的组织结构、代谢更新和免疫应答等方面在牙周防御反应中发挥着积极作用。本文就这些研究进展作一综述,旨在阐明牙周病发生和发展机制。
- 李树波李德懿
- 关键词：结合上皮防御反应牙周病
