上海市科委医学引导类科技项目(114119a9300)
- 作品数：5 被引量：13H指数：2
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- 沉默Bmi-1表达对人食管鳞癌细胞生长影响观察被引量：1
- 2013年
- 目的:通过RNA干扰(RNA interference,RNAi)抑制人食管鳞癌细胞Eca109Bmi-1表达,探讨其对Eca109细胞生物学特性的影响及可能机制。方法:通过对Bmi-1的小干扰RNA(siRNA)重组腺相关病毒(Bmi-1shRNA)转染Eca109细胞,以转染空病毒(AAV-Null)的Eca109细胞作阴性对照组,以未转染Eca109细胞作空白对照组(PBS),应用蛋白质印迹法分析,绘制细胞生长曲线、流式细胞检测、裸鼠成瘤实验和免疫组化分析等方法观察RNAi对Bmi-1基因的抑制情况及沉默Bmi-1表达在体外及体内对Eca109细胞增殖、侵袭、致瘤和凋亡的影响。结果:转染Bmi-1shRNA后蛋白质印迹法检测结果显示,Bmi-1shRNA组蛋白条带灰度扫描值为681.74±28.89,明显低于AAV-Null组的964.00±41.73(P=0.001)和空白对照组的1 005.51±41.16,P=0.001;AAV-Null组与空白对照组比较,差异无统计学意义,P=0.007。实验组细胞生长曲线较平缓,细胞生长速度较对照组(P=0.009)和空白对照组(P=0.031)明显降低。Eca109细胞转染AAV-Bmi-1shRNA后,Bmi-1shRNA组增殖指数(proliferation index,PI)为0.42±0.13,明显低于AAV-Null组的0.81±0.37(P=0.023)和空白对照组的0.91±0.25(P=0.006),提示RNAi后细胞增殖活性明显降低。裸鼠成瘤实验提示转染Bmi-1shRNA后肿瘤生长减慢,Bmi-1shRNA组肿瘤质量(1.47±0.35)g明显低于AAV-Null组的(1.83±0.28)g(P=0.028)和空白对照组的(1.96±0.40)g,P=0.004;Bmi-1shRNA组细胞凋亡指数(16.9±5.31)%明显高于AAV-Null组的(9.57±3.84)%和空白对照组的(8.13±3.97)%,差异有统计学意义,P值均为0.001。结论:沉默Bmi-1表达能显著抑制Eca109细胞生长,减慢肿瘤细胞的增殖,促进凋亡,抑制肿瘤生长。
- 李白翎钟铿张冠鑫金磊
- 关键词：RNA干扰食管肿瘤转染
- 非小细胞肺癌组织Bmi-1和VEGF表达及其临床意义的研究被引量：5
- 2012年
- 目的:探讨鼠类淋巴瘤滤过性病毒致癌基因(Bmi-1)和血管内皮生长因子(VEGF)在非小细胞癌(NSCLC)组织中的表达及其与临床预后的相关性。方法:应用免疫组化SABC法检测180例NSCLC组织中Bmi-1与VEGF表达水平及微血管密度(MVD)。结果:NSCLC组织中Bmi-1阴性表达为10.6%(19/180),阳性表达率为30.6%(55/180),强阳性表达率为58.9%(106/180);Bmi-1与癌旁组织比较,差异有统计学意义,P=0.026。Bmi-1的表达与VEGF表达密切相关,P=0.001;并且Bmi-1高表达也同时伴随着MVD计数增高,P=0.005。在VEGF强阳性/Bmi-1阳性组的23例患者中有14例(60.9%)MVD计数增高,差异有统计学意义,P=0.001。在VEGF强阳性/Bmi-1强阳性组的41例患者中有34例(82.9%)MVD计数增高,差异有统计学意义,P=0.001。多因素统计分析显示,Bmi-1阳性或强阳性合并VEGF强阳性表达、淋巴结转移和MVD增高是NSCLC预后的独立危险因素。结论:Bmi-1在NSCLC的肿瘤血管生成和进展中起重要作用,Bmi-1和VEGF同时高表达是NSCLC不良预后的因素。
- 李白翎金磊钟铿韩林
- 关键词：病毒蛋白质类血管内皮生长因子
- 小干扰RNA抑制ΔNp63α表达对人食管鳞癌细胞生物学特性的影响被引量：7
- 2013年
- 目的通过腺相关病毒介导的小干扰RNA(siRNA)抑制人食管鳞癌细胞Eca109中ΔNp63α的表达,观察其对食管鳞癌细胞生物学特性的影响。方法构建H1启动子驱动的表达针对ΔNp63α的siRNA重组腺相关病毒AAV-ΔNp63αshRNA并感染Eca109细胞。同时以感染空腺相关病毒AAV-Null的细胞及不加腺相关病毒的细胞分别作为对照组和空白对照组,观察siRNA干扰ΔNp63α表达在体外及体内对Eca109细胞生长、增殖、致瘤及凋亡的影响。结果与对照组和空白对照组比较,Eca109细胞感染AAV-ΔNp63αshRNA后ΔNp63α蛋白表达下降(P均<0.05),细胞生长速度减慢(P均<0.05),细胞增殖指数(proliferation index,PI)降低(P均<0.01),裸鼠瘤体质量减轻(P均<0.05),细胞凋亡增加(P均<0.05)。结论腺相关病毒介导的siRNA干扰能显著抑制Eca109细胞ΔNp63α的表达,减慢肿瘤细胞的增殖,促进肿瘤细胞凋亡,抑制肿瘤生长。
- 李白翎杜大海张冠鑫徐志云
- 关键词：鳞状细胞肿瘤
- △Np63α在食管鳞癌中的表达及其临床意义
- 2013年
- 目的探讨原癌基因△Np63α在食管鳞癌中的表达及与临床预后的相关性。方法应用免疫组织化学SABC法检测304例食管鳞癌组织中△Np63α表达水平及与临床病理的相关性。结果食管鳞癌组织中△Np63α阳性表达为40％（122／304例）；与癌旁组织比较，差异有统计学意义（P=0．034）。△Np63α表达水平与淋巴结转移、分化程度、浸润深度、TNM分期、VEGF表达均明显相关（P=0．001）。多因素统计分析提示△Np63α阳性是食管鳞癌预后的独立危险因素（P=0．001）。结论△Np63α阳性表达与肿瘤的复发、转移密切相关。
- 李白翎薛清张冠鑫王崇徐志云
- 关键词：食管肿瘤肿瘤转移
- 人肺腺癌细胞系Ch-Huang-1的建立和生物学特性研究
- 2012年
- 背景与目的肺癌是严重威胁人类生存和发展的恶性疾病之一,本研究旨在建立人肺腺癌细胞系,探讨其生物学特性,为进一步明确肺癌的发生机理,提供一个技术平台。方法取人肺腺癌新鲜手术肿瘤标本,经组织块体外培养并克隆建系,命名为Ch-Huang-1。采用光镜、细胞生长曲线、染色体核型分析、克隆形成率及免疫缺陷小鼠成瘤实验对细胞系生物学特性进行分析。结果细胞系及移植瘤标本证实具有腺癌恶性细胞特征。生长曲线呈S型,细胞群体倍增时间为36 h。分裂指数曲线为倒V字型,培养第30小时处于分裂期的细胞最多。克隆形成率为0.803%±0.078%。观察到肿瘤细胞染色体数目为亚三倍体,有明显的染色体异常。裸鼠皮下异种移植形成移植瘤。结论根据细胞系特征显示该细胞系是一新建的肺腺癌细胞系。
- 李白翎钟铿金磊袁扬龚德军刘晓红黄盛东
- 关键词：肺肿瘤细胞系生物学特性
