国际科技合作与交流专项项目(2010DFA31430)
- 作品数：5 被引量：15H指数：3
- 相关作者：李晓萌李江乔巍汪小莞张琦更多>>
- 相关机构：东北师范大学吉林大学口腔医院吉林省人民医院更多>>
- 发文基金：国际科技合作与交流专项项目国家自然科学基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- DMA2抗体的制备及在前列腺癌细胞系中的检测研究
- ADAM2是一种新型的癌/睾丸抗原(Cancer-Testis Antigen,CT抗原)。本研究旨在利用基因重组方法制备ADMA2抗体,检测前列腺癌细胞系ADMA2的表达情况。PCR扩增编码人ADAM2第384-473...
- 赵兵西野善一川村贞文佐藤郁朗辻一郎李晓萌
- 胃铋镁中药组分对胃癌细胞周期的调节和裸鼠体内肿瘤抑制的实验研究被引量：7
- 2016年
- 目的研究胃铋镁中药组分(弗朗鼠李皮、茴香、石菖蒲、甘草和芦荟)对胃癌细胞周期的调节作用和对胃癌移植瘤的生长抑制作用。方法将胃铋镁和胃铋镁中药总组分及其组分中弗朗鼠李皮、茴香、石菖蒲、甘草、芦荟分别作用于胃癌细胞SGC-7901,MTT法检测各处理组细胞的增殖状态;流式细胞仪检测细胞周期;Western blot检测细胞周期相关蛋白的表达。构建裸鼠SGC-7901胃癌移植瘤模型,研究胃铋镁及其中药总组分及其组分对胃癌移植瘤的生长抑制作用;免疫组化检测STAT3信号通路相关蛋白STAT3、p-STAT3、Bcl-2、Cyclin D1和Survivin的表达情况。结果胃铋镁中药总组分及其组分中的弗朗鼠李皮、茴香和石菖蒲对SGC-7901细胞的抑制率显著高于对照组(P<0.05);流式检测和Western blot结果显示,胃铋镁、胃铋镁中药总组分及其组分中弗朗鼠李皮、茴香和石菖蒲均可以使胃癌细胞阻滞于G1期(P<0.05),并能够有效下调细胞周期蛋白Cyclin A、B、D、E的表达;但甘草和芦荟对胃癌细胞的增殖抑制和细胞周期阻滞作用不显著。荷瘤裸鼠实验结果显示,胃铋镁中药总组分组、弗朗鼠李皮组、茴香组和石菖蒲组对胃癌细胞的生长抑制作用显著强于对照组和三联药(三种市售胃炎胃溃疡类药物联合用药)组(P<0.05),并可以抑制STAT3的磷酸化,下调STAT3信号通路靶基因Bcl-2、Cyclin D1和Survivin的表达。结论胃铋镁及其中药组分中的弗朗鼠李皮、茴香和石菖蒲可以显著抑制胃癌细胞SGC-7901增殖,阻滞细胞周期于G1期,并可以在体内抑制荷瘤裸鼠肿瘤的生长。
- 乔巍邸军汪小莞董旭张琦姜春娃李江李晓萌
- 关键词：中药组分胃癌细胞周期
- 四种倍半萜类化合物广谱抗肿瘤效应的研究进展被引量：8
- 2016年
- 目的倍半萜类化合物(sesquiterpenoids)是存在于自然界中的一大类天然化合物,在植物中最为丰富。小白菊内酯、木香烃内酯、异土木香内酯和土木香内酯是4种具有代表性的倍半萜类化合物,它们主要存在于菊科植物小白菊和土木香等药用植物中,具有镇痛、抗菌及消炎的作用。近年来,这类化合物的抗肿瘤特性引起了科学家的重视。它们对正常的细胞无毒害,却表现了对多种肿瘤细胞的广谱的细胞毒和促凋亡效应,提示了其作为重要肿瘤抑制药物的开发前景。为此,本文就这4种倍半萜类化合物的天然来源、结构特征、分子靶点、抗肿瘤关联信号通路的调节机制等方面作以综述。
- 乔巍汪小莞李晓春李江李晓萌
- 关键词：倍半萜类化合物癌症凋亡信号通路
- 类泛素化修饰蛋白SUMO3/GST融合蛋白表达载体的构建及表达
- 2011年
- 目的:构建pGEX-4T-1/SUMO3重组表达质粒,并在大肠杆菌中表达和纯化出类泛素化修饰蛋白SUMO3/GST融合蛋白。方法:采用PCR技术利用pcDNA3.1-SUMO3质粒为模板,扩增出SUMO3全长编码序列(312bp),并将其重组于谷胱甘肽硫转移酶(GST)融合蛋白表达质粒pGEX-4T-1中,酶切、测序鉴定获得重组质粒。将重组质粒转化E.coli BL21,异丙基β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导产生GST-SUMO3的融合蛋白,并纯化获得相对分子质量为38 000的融合蛋白。结果:通过BamHⅠ和XhoⅠ双酶切,确定了重组质粒pGEX-4T-1/SUMO3中包含有312bp的小片段,并测序鉴定该插入片段序列与SUMO3序列一致;在终浓度为0.1mmol·L-1的IPTG诱导时,GST-SUMO3的融合蛋白也被成功地表达和纯化。结论:成功地制备和纯化了类泛素化修饰蛋白SUMO3/GST融合蛋白,为SUMO3多克隆抗体的制备提供了抗原基础,同时也为SUMO3及SUMO第二类家族功能的深入研究提供了保证。
- 杨南扬缪璇伍贤军刘金美辻一郎李晓萌
- 关键词：GST融合蛋白蛋白纯化
- GFP-SUMO-3融合蛋白的重组及其在LNCaP细胞中的表达和定位
- 2011年
- 目的:构建以绿色荧光蛋白(GFP)为报告基因的重组真核表达载体pEGFP-N1-SUMO-3,观察GFP-SUMO-3融合蛋白在人前列腺癌细胞LNCaP中的表达与定位。方法:采用PCR扩增SUMO-3基因全长cDNA编码区序列,克隆入pEGFP-N1真核表达载体。重组质粒pEGFP-N1-SUMO-3通过酶切和测序鉴定正确后,脂质体法将重组质粒转染至LNCaP中,利用GFP抗体通过Western blotting检测GFP-SUMO-3融合蛋白的表达,通过荧光显微镜观察其在细胞中的表达及分布。结果:重组质粒pEGFP-N1-SUMO-3经BamHⅠ和XhoⅠ双酶切鉴定,得到大小分别为4 700和312bp的条带,与预期结果一致。测序结果显示,GFP在N端,是阅读框正确的SUMO-3的基因序列。在LNCaP细胞中过表达GFP-SUMO-3融合蛋白,Western blotting得到相对分子质量为39 000的蛋白表达条带,与GFP-SUMO-3大小相符。荧光显微镜观察,转染重组质粒pEGFP-N1-SUMO-3的细胞中呈绿色荧光,主要在细胞核内表达,与DAPI重合。结论:成功构建重组质粒pEGFP-N1-SUMO-3,并表达代绿色荧光蛋白的SUMO-3融合蛋白,鉴定出SUMO-3在LNCaP细胞中的核定位性。
- 伍贤军缪璇程秀王妍青辻一郎李晓萌
- 关键词：重组蛋白质类LNCAP细胞基因表达
- 胃铋镁对胃癌细胞凋亡的诱导作用及机制研究被引量：4
- 2016年
- 目的研究胃铋镁对胃癌细胞株SGC-7901增殖和凋亡的作用及可能机制。方法以三联药(三种市售胃炎胃溃疡类药物联合用药)、胃铋镁、胃铋镁中药总组分、胃铋镁化药总组分为实验组,分别作用于胃癌细胞SGC-7901,MTT法检测细胞的增殖状态;Hoechst33342染色法检测细胞的凋亡;流式细胞仪检测细胞周期;Western blot法检测STAT3信号通路相关蛋白的表达。结果 4种药物分别处理细胞后,相比于对照组和三联药组,胃铋镁组和胃铋镁中药总组分组能够显著抑制细胞增殖且具有剂量依赖性;凋亡百分数显著增高(P<0.05);能将细胞周期阻滞于G1期(P<0.05);Western blot结果显示SGC-7901细胞中STAT3、磷酸化STAT3(p-STAT3)、CyclinD1、Bcl-2蛋白表达量显著降低。结论胃铋镁及其中药总组分可以显著抑制胃癌细胞SGC-7901增殖,促进细胞凋亡,阻滞细胞周期,其作用机制可能与抑制STAT3信号通路相关蛋白p-STAT3、CyclinD1、Bcl-2表达有关。
- 乔巍邸军汪小莞孙佳昕张琦李江李晓萌
- 关键词：胃癌STAT3信号通路
