国家自然科学基金(30070342)
- 作品数：2 被引量：4H指数：1
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- 相关机构：首都医科大学中国医科大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 重组人肝刺激因子非融合性蛋白表达载体的构建及其在大肠杆菌中的表达和纯化
- 2006年
- 目的构建人肝刺激因子(human hepatic stimulator substance,hHSS)体外表达体系。方法hHSS基因片段经PstⅠ和NdeⅠ消化后,应用T-A克隆技术,克隆到质粒pT7-7载体,通过限制性酶切图谱分析及DNA测序反应鉴定hHSS基因。再将pT7-7-hHSS表达载体转化到BL21(DE3)中表达,通过超滤膜及阴离子交换柱纯化,获得目的蛋白。结果表达产物在15 000处有一明显条带,蛋白质肽指纹图谱分析与预期结果相符,经Western blot杂交印证,该15 000蛋白质为hHSS。结论通过构建pT7-7-hHSS原核表达体系,能正确高效地表达hHSS。
- 刘贺佳吴媛杨琳安威
- 关键词：原核表达载体基因表达
- 人肝刺激因子基因5′-侧翼序列克隆和结构分析被引量：4
- 2003年
- 为探讨人肝刺激因子 (humanhepaticstimulatorsubstance ,hHSS)基因表达调控的分子机制 ,分离人了hHSS基因组DNA ,克隆其 5′ 侧翼序列 4 890bp ,与GenBank比对后 ,将hHSS基因定位于人 16号染色体。通过逆转录PCR(RT PCR)和 5′RACE确定hHSS基因转录起始位点 。
- 王新楠宋智刚吴媛陈莉赵彦艳安威
- 关键词：基因转录
