吉林省科技厅资助项目(200505118)
- 作品数：4 被引量：5H指数：2
- 相关作者：刘禄成李然伟王颂高瑞娟李哲更多>>
- 相关机构：吉林大学第二医院吉林大学更多>>
- 发文基金：吉林省科技厅资助项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 可溶性血管内皮生长因子受体2片段的表达及其对血管内皮细胞增殖的影响被引量：2
- 2008年
- 目的探讨可溶性血管内皮生长因子受体2（sKDR）抑制血管内皮细胞增殖及在血管生成中的作用。方法提取脐静脉内皮细胞（HUVEC）总RNA,扩增KDR基因膜外1~4结构域,构建原核表达载体pQE40-KDR,转化E.coli M15,经IPTG诱导表达,镍离子柱亲和层析纯化后复性,用Western blot检测sKDR蛋白的表达,MTT比色法和鸡胚尿囊膜（CAM）试验分别检测其对HUVEC增殖的影响及其对血管生成的作用。结果经RT-PCR扩增得到了1150 bp左右的sKDR片段,并在pQE40原核表达系统中表达了sKDR蛋白,以包涵体形式存在。纯化后蛋白电泳呈现相对分子质量50000左右的单一条带,纯化蛋白占总蛋白的98%,蛋白含量为80μg/ml。Western blot证实其为重组sKDR蛋白。MTT检测结果显示,sKDR可抑制血管内皮生长因子（VEGF）刺激的HUVEC增殖,并阻滞VEGF诱导的CAM血管增生。结论已成功构建sKDR原核表达载体,并在大肠杆菌M15中获得表达,纯化的sKDR片段具有与VEGF结合的生物学功能,有望成为基因治疗肿瘤血管形成的理想靶点。
- 李然伟刘禄成李哲王颂高瑞娟
- 关键词：血管内皮生长因子受体2血管生成人脐静脉内皮细胞鸡胚尿囊膜
- 荷瘤裸鼠膀胱癌原位模型的建立被引量：2
- 2007年
- 目的通过细胞移植法建立模拟人的膀胱原位癌荷瘤裸鼠模型,为临床膀胱癌的防治提供新的思路。方法将人膀胱移行细胞癌株T24原位移植到裸鼠膀胱内后定期用磁共振成像(MRI)检测,并进行解剖,组织病理学和免疫细胞学检查。结果裸鼠膀胱内的癌发生率为94.0%(47/50),组织病理学检查:Ⅰ级23例,Ⅱ级15例,Ⅲ级9例,免疫细胞学证实该模型具有人膀胱移行细胞癌株T24的特性。结论模拟人的荷瘤裸鼠膀胱癌原位模型符合临床上膀胱肿瘤向膀胱内生长的过程,具有很强的实用性。
- 任明梁新刘禄成李然伟郭航王颂
- 血管内皮生长因子siRNA联合丝裂霉素诱导膀胱癌细胞凋亡的研究被引量：1
- 2008年
- 血管内皮生长因子（VEGF）是目前发现最强效的促血管生长因子，也是目前肿瘤治疗的理想靶点。本研究旨在观察利用小干扰RNA技术下调VEGF表达与丝裂霉素（MMC）联合应用对膀胱癌细胞增殖和凋亡的影响。
- 李然伟陈秀玲刘禄成王颂
- 关键词：血管内皮生长因子癌细胞凋亡丝裂霉素SIRNA促血管生长因子VEGF表达
- 血管内皮生长因子siRNA对人膀胱癌裸鼠移植瘤生长的实验研究
- 2008年
- 目的观察VEGF siRNA对人膀胱癌裸鼠皮下移植瘤生长的抑制作用,探讨VEGF作为膀胱癌基因治疗靶点的有效性。方法已稳定转染pGC-siVEGF的T24接种至裸鼠皮下,建立荷瘤裸鼠膀胱癌模型。利用免疫组织化学方法(SABC)检测肿瘤细胞VEGF和肿瘤间质CD34的水平,根据CD34表达情况评价肿瘤微血管密度(MVD),末端脱氧核苷酸转移酶标记法(TUNEL)测定肿瘤细胞凋亡指数。结果实验组与对照组相比较:成瘤率低,肿瘤生长速度缓慢(P<0.01);VEGF水平下降(P<0.01);肿瘤微血管密度减少(P<0.01);凋亡指数升高(P<0.01)。组间比较差异均具有显著性。结论以VEGF为靶点的小干扰RNA有抑制VEGF表达、遏制膀胱癌T24细胞在体内生长的作用,VEGF有可能成为临床膀胱癌基因治疗的有效靶点,为膀胱癌的抗血管生成疗法提供理论基础。
- 刘禄成李然伟许宗革李哲高瑞娟
- 关键词：膀胱癌血管内皮生长因子小干扰RNA裸鼠
